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桌面干式培养箱在体外受精胚胎培养中的临床效果观察
编辑人员丨1周前
目的 评估桌面干式培养箱与传统湿式培养箱在胚胎培养中的效果差异.方法 回顾性分析2019年1月至2022年9月于我院生殖中心就诊行体外受精(IVF)治疗的共3 177个周期的临床资料.根据培养环境不同分为两组:以传统湿式箱培养的为C200(湿式)组(n=2 820),以桌面干式培养箱培养的为MIRI(干式)组(n=357),比较两组的患者一般情况、胚胎培养情况和妊娠结局.结果 两组间女方年龄、体质量指数(BMI)、不孕年限、不孕类型、基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、窦卵泡数计数(AFC)、促性腺激素(Gn)总量比较均无显著差异(P>0.05);两组间双原核(2PN)率、D3优胚率、D3可用胚胎率、囊胚形成率比较均无显著差异(P>0.05).在D3卵裂期胚胎新鲜移植的患者中,C200(湿式)组活产率显著低于MIRI(干式)组(36.06%vs.46.09%,P<0.05),两组间胚胎种植率、临床妊娠率、流产率、早产率、双胎率及胎儿出生体重比较均无显著差异(P>0.05).在D5囊胚新鲜移植患者中,C200(湿式)组流产率显著低于MIRI(干式)组(13.20%vs.20.63%,P<0.05),两组间胚胎种植率、临床妊娠率、活产率、早产率、双胎率及胎儿出生体重比较均无显著差异(P>0.05).结论 两种培养模式整体上可获得相似的胚胎培养结果,但桌面干式培养箱可能更适合于D1~D3胚胎的培养,而D4至囊胚阶段的培养更适合在传统湿式培养箱中进行.
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编辑人员丨1周前
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红细胞来源外泌体对NK细胞增殖和分泌INF-γ的影响
编辑人员丨1周前
目的:评价红细胞来源外泌体对自然杀伤细胞(NK细胞)增殖和分泌INF-γ的影响。方法:储存时间为14~21 d的5袋红细胞,采用ExoQuick试剂盒分离外泌体。应用磁珠法和流式细胞仪分离、鉴定健康志愿者外周血NK细胞,以2×10 5个/ml分别接种于96孔板和24孔板,采用随机数字表法分为2组( n=18):对照组(C组)和外泌体组(E组)。E组加入外泌体,终浓度为5 μg/ml;C组加入相应体积RPMI1640培养液。置于37 ℃、5%CO 2、饱和湿度培养箱中培养,分别于细胞培养第1和3天采用CCK8法检测NK细胞增殖水平,第5天采用ELISA法检测上清液INF-γ浓度。 结果:2组培养第1和3天时NK细胞增殖水平比较差异无统计学意义( P>0.05);与C组比较,E组上清液IFN-γ浓度降低 ( P<0.05)。 结论:红细胞来源外泌体对NK细胞增殖无明显影响,可抑制NK细胞分泌INF-γ。
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编辑人员丨1周前
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重症中暑大鼠血小板计数和功能动态变化研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨重症中暑大鼠血小板数量和功能的动态变化规律.方法 雄性SD大鼠30只,随机分为5组:常温组(sham)、重症中暑(HS)复温0h组(HS-0h)、重症中暑复温3h组(HS-3h)、重症中暑复温6h组(HS-6h)和重症中暑复温9h组(HS-9h),每组6只.常温组置于室温(温度22.0±0.5℃和湿度50.0%±5.0%),重症中暑各组置于高温气候人工培养箱(温度39.5±0.2℃和湿度60.0%±5.0%),以直肠温度(Tr)达43℃作为重症中暑标准.大鼠重症中暑后于室温进行自然降温处理,分别于复温0、3、6、9h进行腹主动脉采血,采用富血小板血浆(PRP)法分离血小板并行纯度鉴定.采用血液细胞分析仪检测各组血小板数目;流式细胞仪检测血小板活化标记物CD62P;全自动血小板聚集仪检测血小板最大聚集率;Sonoclot全血凝血和血小板功能分析仪检测血小板功能(PF).结果 与常温组比较,重症中暑组大鼠随复温时间延长,血小板计数呈现下降趋势(P<0.001).血小板CD62P呈现时间依赖性上升(P<0.05);血小板最大聚集率呈现时间依赖性下降(P<0.001);血小板功能呈现时间依赖性下降(P<0.05).结论 血小板数量和聚集及止血功能下降为重症中暑凝血紊乱的重要表现,其相关机制研究利于重症中暑发病机制的认识.
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编辑人员丨2023/8/6
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胚胎培养微滴内的温度变化研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究胚胎培养皿(以下简称培养皿)从胚胎培养箱取出后放置于恒温热平板(以下简称热平板)上时胚胎培养微滴(以下简称微滴)内的温度变化及放回4 种不同类型胚胎培养箱后的复温时间. 方法 本研究选择 4 种不同类型的商品化培养箱,#1 为大型箱式培养箱;#2 为小型箱式培养箱;#3 为桌面干式培养箱;#4 为桌面湿式培养箱.将商品化的温度测定仪温度探头偶联在胚胎培养皿上,自组装一套简易装置实现对培养皿内微滴温度检测.将胚胎培养皿从 CO2培养箱取出后放置在热平板上,采用该装置每 30 s测量一次培养皿中微滴内的温度的变化,温度下降至30℃时分别将培养皿放回4 种不同培养箱中,记录温度恢复至 37℃的复温时间. 结果 胚胎培养皿离开CO2培养箱,随着在热平板上操作时间的延长,微滴内的温度逐渐降低.离箱操作 3 min,微滴温度降至(36.50±0.52)℃;离箱操作 5 min,微滴温度降至(36.17± 0.67)℃;10 min时降至(35.53±0.64)℃;10 min以后,微滴温度趋于平稳.培养皿在重新放回培养箱后,35℃恢复至 37℃的时间分别为(5.58±1.37)min、(15.69±5.19)min、(5.21±0.45)min、(4.88±0.51)min,其中#2 培养箱的复温时间显著长于#1、#3、#4 培养箱(P<0.05),#4 培养箱的复温时间最短,但#1、#3 和#4 培养箱之间的复温时间无显著性差异(P>0.05).结论 从温度上考虑,结合已有的报道,建议胚胎离开CO2培养箱在热平板的时间应控制在 3 min内.在重新放回胚胎培养箱后,不同类型培养箱内微滴的复温时间是有差异的,在实际工作中,应尽量选择复温时间短的培养箱以优化胚胎培养效果.
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编辑人员丨2023/8/6
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乌索酸对高糖诱导人系膜细胞损伤的作用
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨乌索酸(UA)对高糖诱导人系膜细胞损伤的保护作用.方法 人系膜细胞复苏后,用MCM 4201完全培养基常规培养,置于37℃、饱和湿度5% CO2的孵箱内贴壁传代培养,隔天换液1次,取5~9代对数生长期细胞,分为正常糖组(5.5mmol· L-1葡萄糖),高糖组(30.0 mmol·L-1葡萄糖),高渗对照组(5.5 mrnol·L-1葡萄糖+24.5 mmol·L-1甘露醇),乌索酸治疗A、B、C组(30.0 mmol·L-1葡萄糖,A、B、C组分别给予0.5、1.0、2.0 μmol· L-1乌索酸).6组均给药48 h.利用MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测系膜细胞凋亡,采用实时PCR及Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-xL、Bax、survivin mRNA及蛋白表达,细胞损伤相关蛋白TGFβ-1、FN mRNA及蛋白表达.结果 0.5 μmol·L-1乌索酸治疗组与正常糖组、高渗对照组系膜细胞增殖程度差异无统计学意义(P>0.05),2.0 μmol·L-1乌索酸治疗组大部分系膜细胞已经死亡.1.0 μmol·L-1乌索酸组抑制高糖诱导的系膜细胞增殖和TGF-β1、FN、Bcl-xl、survivin mRNA及蛋白表达,增强促凋亡基因BaxmRNA及蛋白表达,促进系膜细凋亡.结论 乌索酸通过促进系膜细胞早期凋亡抑制系膜细胞增殖,抑制TGF-β1表达和FN聚集,减轻系膜细胞损伤.
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编辑人员丨2023/8/6
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Raptor的表达与西罗莫司对膀胱癌BIU-87细胞周期及迁移的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨Raptor在膀胱癌BIU-87细胞中的表达及西罗莫司对BIU-87细胞迁移和细胞周期的影响.方法 将BIU-87细胞贴壁培养于10%胎牛血清、100 U/mL青霉素、100μg/mL链霉素的RPMI-1640培养液中,37℃、5%CO2饱和湿度培养箱中培养.取对数生长期细胞,处理组加入浓度分别为(50-200)nmol/L西罗莫司;对照组不加药物,每天更换1640培养液.实时PCR法检测Raptor在BIU-87细胞中的表达,Transwell法检测BIU-87细胞的体外迁移能力,流式细胞仪检测不同浓度西罗莫司对BIU-87细胞周期的影响.结果 西罗莫司处理组的Raptor的表达量明显下降,BIU-87体外迁移能力明显下降,呈剂量依赖性.西罗莫司将BIU-87细胞周期阻滞在G0/G1期,从而抑制了细胞的增殖.结论 西罗奠司抑制BIU-87细胞增殖和迁移的能力与抑制Raptor的表达相关.
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编辑人员丨2023/8/6
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缺氧环境中RA滑膜成纤维细胞促进巨噬细胞向M2极化
编辑人员丨2023/8/6
研究模拟RA患者关节腔特征性缺氧环境,探索滑膜成纤维细胞(fibroblast-like synoviocyte,FLS)对巨噬细胞向经典活化型巨噬细胞(classically activated macrophage,M1)和替代活化型巨噬细胞(alternatively activated macrophage,M2)极化的影响,探讨巨噬细胞在RA进展中的作用.利用抗M1、M2特征性表面标志(CD197和CD206)抗体对RA组和对照组[骨关节炎(osteoarthritis,OA)]患者关节滑膜组织进行免疫组织化学染色,分析M1、M2数量及比值.佛波酯体外诱导人单核细胞(THP-1)为M0巨噬细胞,用Transwell非接触式共培养体系将RA-FLS与M0置于缺氧和常氧培养箱共培养,实时荧光定量PCR及免疫荧光法检测M0极化情况.免疫组织化学结果显示,RA组的M1和M2细胞数量多于OA组,M1/M2比值低于OA组,差异有统计学意义(P<0.05).21% O2培养箱中共培养体系巨噬细胞M1表型基因CCR7、TNF-α的mRNA表达水平高于单独培养组,NOS-2的mRNA表达水平低于单独培养组,M2表型基因IL-10、TGF-β的mRNA表达水平低于单独培养组,差异均有统计学意义(P<0.05);3% O2培养箱中共培养体系巨噬细胞M1和M2表型基因的mRNA表达水平均高于单独培养组,差异均有统计学意义(P<0.05).细胞免疫荧光检测结果与实时荧光定量PCR一致.以上结果提示缺氧环境下RA-FLS有促进巨噬细胞向M2极化的作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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基于云平台的新生儿培养箱中央智能监护系统的设计与应用
编辑人员丨2023/8/6
新生儿培养箱中央监护系统的研究对培养箱的临床应用和安全监测具有重要意义.目前,国内暂无统一的实时监测报警网络系统.本文通过无线温湿度传感器对培养箱内温湿度数据进行实时采集,并将采集的数据通过物联网关采用无线传输方式传送至云平台.中央智能监护系统与云平台进行数据对接,实现培养箱温湿度数据及报警信息的集中监测和存储.同时,医护人员可根据报警情况对培养箱电源进行远程智能化操作.
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编辑人员丨2023/8/6
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受精液平衡方式对新建胚胎实验室鼠胚实验的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨授精当日配皿与前日配皿对昆明小白鼠卵母细胞体外受精及胚胎发育的影响,为人类辅助生殖技术(ART)胚胎实验室选择最佳配皿方案提供参考. 方法 选择SPF级昆明小白鼠进行实验,对同一批次雌鼠统一超促排卵后按照随机原则分为当日配皿组(当日配制授精皿)与前日配皿组(前日配制授精皿)进行鼠胚实验.授精前1日配制含10%SPS的Quinn's 1020液,置于37℃、5%CO2、5%O2的饱和湿度培养箱中过夜平衡后当日配皿为当日配皿组;于授精前1日配制含10%SPS的Quinn's 1020液,并直接配皿后置于37℃、5%CO2、5%O2的饱和湿度培养箱过夜平衡为前日配皿组.观察并比较两组不同受精液平衡方式中小鼠卵母细胞的受精及胚胎发育情况. 结果 当日配皿组完成124个小鼠促排卵周期,总获卵4 731枚,受精率为68.2%,卵裂率97.7%,囊胚形成率76.7%;前日配皿组完成80例促排卵周期,总获卵2 683枚,受精率为84.5%,卵裂率99.6%,囊胚形成率88.8%.前日配皿组的受精率、卵裂率和囊胚形成率均显著高于当日配皿组(P<0.01). 结论 受精培养液的平衡方式对昆明小白鼠卵母细胞的受精及胚胎发育可产生显著影响,前日配皿较当日配皿更有利于小鼠卵母细胞的受精及后期的胚胎发育.
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编辑人员丨2023/8/6
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实时观察培养和三气培养选择性单囊胚移植的临床结局分析
编辑人员丨2023/8/6
目的 比较实时观察培养和三气培养选择性单囊胚移植的临床结局. 方法 选择2015年1月1日至2018年5月31日在本院生殖中心接受常规辅助生殖治疗且获卵数≥5个的1 717个移植周期.根据胚胎培养的方式不同,分为实时观察培养(191个周期)和三气培养(1 526个周期)两组,全部采用形态学评分选择单囊胚移植.比较两组间的受精率、卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率、囊胚形成率、移植的优质囊胚率、临床妊娠率和流产率. 结果 实时观察培养组和三气培养组的受精率(88.0% vs.82.7%)、正常受精率(75.6% vs.67.5%)、可用胚胎率(81.5% vs.75.9%)、优质胚胎率(58.1% vs.54.1%)、囊胚形成率(69.3% vs.64.7%)和移植的优质囊胚率(78.0% vs.69.9%)相比,两组差异均有统计学意义(P<0.05),但三气培养组的卵裂率显著高于实时观察培养组(98.8%v s.97.0%);两组的临床妊娠率(75.9% vs.70.3%)无显著性差异,但实时观察培养组有增高的趋势(P>0.05);两组的流产率也无显著性差异,但实时观察培养组流产率有低于三气培养组的趋势(4.1% vs.8.3%,P>0.05). 结论 实时观察培养可能有优于湿式三气培养箱的趋势,但还需要多中心、大样本研究进一步证实.
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编辑人员丨2023/8/6