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苦参碱调节RhoA-ROCK信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响
编辑人员丨5天前
目的 探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞 17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响.方法 建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg-1)组、苦参碱高剂量(200 mg·kg-1)组及苦参碱高剂量(200 mg·kg-1)+LPA组(10 mg·kg-1).超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素 17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素 1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心肌梗死情况;TUNEL染色进行心肌组织中细胞凋亡情况检测;试剂盒检测RhoA活性;Western Blot法进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1、ROCK2 蛋白表达水平检测.结果 与对照组比较,模型组心肌组织有大量蓝色胶原纤维沉积,左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2 表达水平明显升高,左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室缩短分数(left ventricular shortening fraction,LVFS)、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2 表达水平明显降低(P<0.05).与模型组比较,Matrine-L组、苦参碱高剂量组心肌组织蓝色胶原纤维逐渐减少,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL 阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA 活性、RhoA、ROCK1、ROCK2 表达水平依次明显降低,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2 表达水平依次明显升高(P<0.05).与苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+LPA组心肌组织蓝色胶原纤维增多,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL 阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA 活性、RhoA、ROCK1、ROCK2 表达水平明显升高,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2 表达水平明显降低(P<0.05).结论 苦参碱通过抑制 RhoA-ROCK信号通路调节Th17/Treg细胞平衡,改善冠心病大鼠心肌损伤.
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编辑人员丨5天前
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肌醇需求酶1对顺铂所致小鼠耳蜗毛细胞凋亡的作用研究
编辑人员丨5天前
目的 研究肌醇需求酶1(inositol-requiring enzyme 1,IRE1)对顺铂所致小鼠耳蜗毛细胞凋亡的作用.方法 分离生后3~5 d的健康昆明小鼠(500只)耳蜗基底膜并进行体外培养,24 h后随机分为对照组和不同浓度顺铂组(4、8、16和32 μg/ml)(每组200条),再培养24 h.应用异硫氰酸荧光素(FITC)染色观察小鼠耳蜗毛细胞的缺失;应用Hoechst 33258和四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)标记的鬼笔环肽双重荧光染色观察小鼠耳蜗毛细胞的凋亡;并用Western blot检测小鼠耳蜗中p-IRE1α、p-JNK、Bax及caspase-3的蛋白水平.结果 与对照组比较,顺铂组小鼠耳蜗毛细胞缺失、细胞凋亡率以及p-IRE1α、p-JNK、Bax、caspase-3等蛋白水平显著增高(P<0.01),并且p-IRE1α与Bax、caspase-3表达和细胞凋亡率呈正相关(P<0.05).结论 IRE1可能参与调控顺铂所致小鼠耳蜗毛细胞凋亡.
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编辑人员丨5天前
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石菖蒲抗血管性痴呆的药理机制研究进展
编辑人员丨5天前
血管性痴呆是我国乃至全世界最主要的痴呆类型之一,其发病机制复杂,临床治疗尚无特效药,严重影响人类生活及健康.研究发现石菖蒲是中医治疗血管性痴呆最高频的核心中药,具有开窍豁痰、醒神益智、化湿开胃的功效,防治血管性痴呆具有确切优势.石菖蒲的化学成分复杂,其主要有效成分α-细辛醚、β-细辛醚因其广泛的药理活性成为研究热点.石菖蒲及其活性成分可在调节血脑屏障通透性,促进药物通过血脑屏障;清除自由基与提高抗氧化物质以抗氧化应激;调节炎症因子以抗炎;清除β-淀粉样蛋白以调节神经可塑性;调节神经递质以保护胆碱能神经;减少细胞凋亡保护海马神经元等方面发挥抗血管性痴呆的作用.本文对石菖蒲抗血管性痴呆的药理机制进行综述,为石菖蒲的运用提供理论依据及循证支持.
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编辑人员丨5天前
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BMSC外泌体抑制Rho/ROCK信号通路对口腔癌细胞生物活性的作用机制
编辑人员丨5天前
目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)外泌体(Exosomes)抑制Rho/ROCK信号通路对口腔癌细胞生物活性的作用机制.方法:细胞分组包括,对照组:正常胎牛血清培养Tca8113细胞;Exosomes 组:Tca8113 细胞与 Exosomes 标记的 1 μmol/L Dil 共培养;Y27632 组:Tca8113 细胞与 Rho/ROCK 信号通路抑制剂Y27632共培养;联合组:Tca8113细胞+Exosomes+Y27632共培养.分别采用CCK-8检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞凋亡率;划痕实验检测细胞迁移距离;Transwell法检测细胞侵袭数目;免疫印迹检测各组细胞RhoA、RhoC、ROCK1及ROCK2表达.结果:与对照组相比,Exosomes组24、48、72及96 h均降低,凋亡率升高,迁移距离及细胞侵袭数目均降低,Exosomes组、Y27632组比较差异无统计学意义;与Y27632组相比,联合组细胞活性、细胞迁移距离及侵袭数目均降低(P<0.05);与对照组相比,Exosomes组Tca8113细胞中RhoA、RhoC、ROCK1及ROCK2 均降低(P<0.05);与 Y27632 组相比,联合组 RhoA、RhoC、ROCK 1 及 ROCK2 均降低(P<0.05).结论:BMSC外泌体(Exosomes)对口腔癌Tca8113细胞具有增加凋亡,抑制细胞活性、侵袭及迁移,研究机制可能与抑制Rho/ROCK信号通路激活相关.
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编辑人员丨5天前
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浸润性乳腺癌中EphA2基因启动子区DNA低甲基化及与细胞焦亡的相关性
编辑人员丨5天前
目的:探讨浸润性乳腺癌中肝配蛋白A型受体2(ephrin A receptor 2,EphA2)表达及其启动子区DNA低甲基化与细胞焦亡发生的相关性.方法:应用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测42例乳腺癌患者正常乳腺组织、癌旁组织和癌组织中EphA2的表达情况;采用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检验细胞焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 1和炎性细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平;应用巢氏甲基化特异性 PCR(nested methylation-specific PCR,nMS-PCR)检验EphA2基因启动子区DNA甲基化水平;采用蛋白质印迹法测验DNA甲基转移酶 1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和 DNA 甲基转移酶 3a(DNA methyltransferase 3a,DNMT3a)蛋白表达水平;应用Pearson相关系数分别对患者癌组织中EphA2的蛋白表达和甲基化水平与NLRP3、Caspase 1、IL-1β、DNMT1和DNMT3a进行相关性分析.结果:与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组中EphA2蛋白表达水平明显升高(P均<0.01),NLRP3、Caspase 1和IL-1β的蛋白表达水平明显降低(P均<0.05);同时与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组织中EphA2基因启动子区DNA甲基化水平明显降低(P均<0.05),DNMT3a蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05),而DNMT1蛋白表达的差异未有统计学意义;Pearson相关性分析结果显示,EphA2蛋白与NLRP3 蛋白(r=-0.651 2,P<0.05)、Caspase 1 蛋白(r=-0.571 2,P<0.05)、IL-1 蛋白(r=-0.654 6,P<0.05)和 DNMT3a 蛋白(r=-0.537 4,P<0.05)的表达水平均呈负相关性;而EphA2基因的甲基化水平与 NLRP3 蛋白(r=0.634 1,P=0.026 8)、Caspase 1 蛋白(r=0.672 8,P=0.016 5)、IL-1β 蛋白(r=0.694 0,P=0.012 3)和 DNMT3a 蛋白(r=0.687 1,P=0.013 6)的表达水平呈正相关性.结论:乳腺癌组织中EphA2蛋白的表达水平上调并与细胞焦亡呈负相关性;DNMT3a可能参与了 EphA2基因启动子区发生DNA低甲基化的过程.
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编辑人员丨5天前
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败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭
编辑人员丨5天前
目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制.方法:收集2019 年2月至2020 年1 月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31 例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665 的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936 和miR-665 表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229 细胞,si-NC、si-circ_0000936 分别转染至 LN229 细胞,pcDNA-circ_0000936 转染至LN229 细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936 与miR-665 的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2 蛋白表达量.结果:胶质瘤组织中circ_0000936 的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665 的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936 和miR-665 呈负相关(r =-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2 蛋白水平和circ_0000936 的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665 的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936 后miR-665 的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2 蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936 能够逆转败酱草对LN229 细胞生物学行为的作用.结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665 诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭.
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编辑人员丨5天前
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氢分子在自身免疫性皮肤病中的治疗进展
编辑人员丨5天前
氢分子作为一种新型医学气体,已证明对特应性皮炎、银屑病、副银屑病、白癜风和扁平苔癣等多种自身免疫性皮肤病有效或具有潜在临床应用价值.这种治疗机制主要与氢分子的选择性抗氧化作用、抗炎作用和抗细胞凋亡作用有关.氢分子治疗自身免疫性皮肤病的给药方式多样,包括口服氢水、吸入氢气、静脉滴注含氢盐水、氢水泡浴和氢水含漱等多种方式.本文总结了氢分子在治疗自身免疫性皮肤病中的最新研究进展,为未来进一步相关的基础研究和临床研究提供启示.
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编辑人员丨5天前
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幽门螺杆菌感染所致人脐静脉内皮细胞功能异常及炎性反应的作用机制研究
编辑人员丨5天前
目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)通过激活转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖、迁移、凋亡及炎性反应的影响.方法 将HUVEC分为对照组(未感染Hp)和Hp感染组(Hp感染复数=25),通过倒置显微镜观察感染Hp的HUVEC形态变化;细胞计数试剂盒8细胞增殖实验和平板克隆实验检测2组HUVEC增殖能力,Transwell实验和划痕愈合实验检测HUVEC的迁移能力,流式细胞术检测HUVEC的凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应检测2组HUVEC中Hp细胞毒素相关基因A、白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)信使核糖核酸表达情况;Western blot检测HUVEC细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、原癌基因(C-Myc)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、B 淋巴细胞瘤 2 基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、STAT3/NF-κB信号通路蛋白表达情况.结果 与对照组比较,Hp组细胞增殖、纵向、横向迁移能力明显降低,CyclinD1、PCNA、C-Myc、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax、磷酸化STAT3/STAT3、磷酸化NF-κB P65/NF-κB-P65蛋白表达量和HUVEC凋亡率升高(P<0.05,P<0.01),炎性因子 IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α mRNA 水平升高(2.71±0.05 vs 1.06±0.41,1.42±0.02 vs 0.92± 0.11,2.50±0.29 vs 1.00±0.10,5.34±0.57 vs 1.00±0.16,P<0.01).结论 Hp 通过激活 STAT3/NF-κB 通路抑制HUVEC增殖、迁移,并诱导其凋亡和炎性反应的发生.
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编辑人员丨5天前
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克洛己新干混悬剂对LPS诱导支气管上皮细胞炎症反应的作用
编辑人员丨5天前
目的 探讨克洛己新干混悬剂对脂多糖(LPS)诱导支气管上皮细胞炎症反应的作用及其潜在机制.方法 将处于对数生长期的人支气管上皮细胞系BEAS-2B分为对照组(无干预)、LPS组(给予25 μg/ml LPS)、克洛己新干混悬剂组(给予1 mg/ml克洛己新干混悬剂)和LPS+克洛己新干混悬剂组(分别给予25 μg/ml LPS和1 mg/ml克洛己新干混悬剂).分别采用CCK-8法观察细胞活性变化;流式细胞术测定细胞凋亡水平;Western印迹检测Toll样受体(TLR)4、下游丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及核转录因子(NF)-κB的蛋白水平变化;DCFH-DA法检测细胞内活性氧自由基(ROS)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α及白细胞介素(IL)-1β的蛋白水平.结果 LPS处理显著抑制BEAS-2B细胞活性,促进细胞发生凋亡,激活TLR4/MAPK/NF-κB信号通路的活化(均P<0.05),还可显著增加细胞内ROS、TNF-α及IL-1β水平(均P<0.05).同时给予细胞克洛己新干混悬剂治疗可显著逆转上述变化(均P<0.05),并可抑制TLR4/MAPK/NF-κB信号通路的激活(均P<0.05).结论 克洛己新干混悬剂可能通过抑制TLR4/MAPK/NF-κB信号通路的激活,从而保护支气管上皮细胞减轻LPS诱导的炎症反应.
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编辑人员丨5天前
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中药固本散结汤组方成分抗胃癌的研究进展
编辑人员丨5天前
胃癌是常见的消化道恶性肿瘤.口服中药通过扶正祛邪、调节免疫系统,在防治肿瘤复发转移方面具有很好的临床效果.为进一步提高中药的应用价值,本研究围绕以"固本散结汤"为代表的中药成分对抑制肿瘤细胞增殖转移、诱导肿瘤细胞凋亡、调节免疫功能、增强化疗药物的敏感性、抗肿瘤血管生成等方面的作用进行归纳阐述,探索中药在治疗胃癌脱落细胞种植转移方面的作用,提供中药治疗肿瘤的新思路.
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编辑人员丨5天前