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LINC00665靶向miR-379-5p对肝癌细胞生物行为的影响及其机制研究
编辑人员丨5天前
目的:研究LINC00665对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响和潜在的分子机制。方法:选取2013年6月至2018年6月于济南市第三人民医院病理检查确诊为肝癌且经手术切除126例患者的肝癌组织及癌旁组织(距离肝癌组织边缘>2 cm),其中男86例,女40例,年龄25.0~72.0(48.2±9.9)岁。qRT-PCR检测126例肝癌组织和癌旁组织中LINC00665的表达,CCK8法测定肝癌HCC9204细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告系统验证LINC00665与miR-379-5p的调控关系。结果:与癌旁组织相比,肝癌组织组中的LINC00665表达量升高[(1.00±0.10)比(1.82±0.18)],差异具有统计学意义( P<0.05)。LINC00665含量降低后[(1.01±0.10)比(0.53±0.05)],HCC9204细胞中细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达量降低[(0.74±0.07)比(0.13±0.01);(0.81±0.08)比(0.35±0.03);(0.69±0.07)比(0.22±0.02)],p21、Bax和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达升高[(0.20±0.02)比(0.66±0.06);(0.26±0.03)比(0.78±0.08);(0.17±0.02)比(0.72±0.07)],细胞存活率降低[(100.13±10.14)%比(46.22±4.73)%],细胞凋亡率上升[(8.42±0.91)%比(23.34±2.37)%],迁移和侵袭细胞数均下降[(109±11)个比(53±5)个;(101±10)个比(47±5)个],差异均具有统计学意义(均 P<0.05)。过表达miR-379-5p组共转染野生型WT-LINC00665报告载体的细胞中萤火虫荧光素酶相对活性显著降低[(1.03±0.10)比(0.24±0.02)],转染突变型MUT-LINC00665的细胞中荧光素酶相对活性差异不具有统计学意义( P>0.05);LINC00665过表达组(pcDNA3.1-LINC00665)的miR-379-5p含量下降[(1.01±0.10)比(0.37±0.04)];LINC00665抑制组(si-LINC00665)的miR-379-5p含量上升[(0.98±0.10)比(1.66±0.17)],差异均具有统计学意义( P<0.05);降低LINC00665含量同时降低miR-379-5p含量,细胞存活率升高[(46.53±4.72)%比(82.26±8.34)%],细胞凋亡率降低[(23.51±2.44)%比(12.07±1.21)],迁移细胞数和侵袭细胞数均升高[(54±6)个比(92±9)个;(48±5)个比(88±9)个],差异均具有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:在肝细胞癌HCC9204中,LINC00665靶向调控miR-379-5p的表达,进而调控肝癌细胞HCC9204增殖、迁移、侵袭和凋亡,是肝癌的潜在分子靶点。
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编辑人员丨5天前
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环状RNA circEIF4G2靶向微小RNA-379-5p诱导婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖、迁移和侵袭的机制
编辑人员丨5天前
目的:探讨circEIF4G2对婴幼儿血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:收集2015年8月至2019至11月于山西医科大学第二医院行手术治疗的27例婴幼儿血管瘤患者的瘤组织和瘤旁正常皮肤组织,HemECs购自上海钦诚生物科技有限公司,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测组织和细胞中circEIF4G2和微小RNA-379-5p(miR-379-5p)表达。将HemECs分为si-NC、si-circEIF4G2、miR-379-5p、miR-NC、si-circEIF4G2+anti-miR-379-5p、si-circEIF4G2+anti-miR-NC组,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖,Transwell检测各组细胞迁移和侵袭。双荧光素酶报告基因实验验证circEIF4G2和miR-379-5p调控关系。两组间比较采用独立样本 t检验;多组间比较采用单因素方差分析,进一步两组间比较采用LSD- t检验。 结果:婴幼儿血管瘤组织中circEIF4G2表达高于正常皮肤组织(3.76±0.42比1.00±0.13, t= 32.619, P<0.05),而miR-379-5p表达低于正常皮肤组织(0.46±0.07比1.00±0.12, t=20.197, P<0.05)。HemECs中circEIF4G2表达高于正常血管内皮细胞(2.61±0.20比1.00±0.07, t=22.794, P<0.05),而miR-379-5p表达低于正常血管内皮细胞(0.41±0.03比1.00±0.09, t=18.657, P<0.05)。si-circEIF4G2、si-NC组HemECs的吸光度( A)值分别为0.57±0.04、1.01±0.07,迁移数分别为(82.00±3.17)、(191.00±8.26)个,侵袭数分别为(61.00±3.11)、(132.00±7.73)个,si-circEIF4G2组各检测指标均低于si-NC组( t=16.187、36.960、25.564, P均<0.05)。miR-379-5p组和miR-NC组HemECs的 A值分别为0.61±0.05、1.11±0.09,迁移数分别为(94.00±5.10)、(187.00±6.10)个,侵袭数分别为(71.00±4.27)、(138.00±8.10)个,miR-379-5p组各检测指标均低于miR-NC组( t=13.768、35.089、21.951, P均<0.05)。circEIF4G2靶向结合并负调控miR-379-5p表达。si-circEIF4G2+anti-miR-379-5p组和si-circEIF4G2+anti-miR-NC组HemECs的 A值分别为1.04±0.09、0.58±0.05,迁移数分别为(184.00±10.02)、(86.00±4.10)个,侵袭数分别为(143.00±8.06)、(65.00±2.16)个,si-circEIF4G2+anti-miR-379-5p组各检测指标均高于si-circEIF4G2+anti-miR-NC组( t=13.462、27.156、28.043, P均<0.05)。 结论:circEIF4G2在血管瘤组织和HemECs中呈高表达,下调其表达可能通过靶向负调控miR-379-5p抑制HemECs增殖、迁移和侵袭,其可能成为婴幼儿血管瘤治疗的分子靶点。
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编辑人员丨5天前
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miR-379和人类驱动蛋白家族成员4A在三阴性乳腺癌中的表达及其关系
编辑人员丨5天前
目的:分析miR-379和人类驱动蛋白家族成员4A(KIF4A)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达及其关系。方法:回顾性选取2016年1月至2019年11月在东莞市人民医院普济分院乳腺科确诊的52例TNBC患者作为研究组,另选取同期确诊的70例非三阴性乳腺癌(NTNBC)患者作为对照组,检测两组患者组织中miR-379、KIF4A的mRNA表达水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,并计算miR-379、KIF4A预测TNBC的曲线下面积(AUC),分析miR-379、KIF4A表达水平与临床病理参数的关系,并分析miR-379表达水平与KIF4A表达水平的相关性。结果:研究组中KIF4A mRNA的表达水平高于对照组[(6.93±0.43) vs (3.75±0.25), P<0.05],miR-379的表达水平低于对照组[(0.54±0.17) vs (0.87±0.32), P<0.05];miR-379联合KIF4A检测对TNBC的诊断价值最大:AUC为0.823(95% CI:0.730~0.917),特异度为0.785,灵敏度为0.950;单因素分析结果显示,不同临床分期、不同肿瘤长径、淋巴结转移与否的TNBC患者miR-379表达比较,差异有统计学意义(均 P<0.05);不同临床分期、肿瘤长径的TNBC患者KIF4A mRNA表达比较,差异有统计学意义(均 P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,TNBC组织中miR-379和KIF4A的表达呈负相关( r=-0.349, P<0.05)。 结论:TNBC患者组织中miR-379表达下调,KIF4A表达上调,且与不良临床病理特征有关,对患者病情的评估有一定的指导意义。
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编辑人员丨5天前
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血浆miR-379、miR-195、Gas6水平早期检测在AMI患者中的应用价值
编辑人员丨1个月前
目的 分析血浆微小RNA-379(miR-379)、微小RNA-195(miR-195)、生长停滞特异性蛋白6(Gas6)水平早期检测在急性心肌梗死(AMI)患者中的应用价值.方法 选取2021年5至2022年7月于首都医科大学附属北京世纪坛医院心内科住院治疗的265例患者,分为AMI组(n=127)和非AMI组(n=138),选取同期120名健康体检者设为对照组.比较三组入组时的血浆miR-379、miR-195表达量及Gas6水平;采用Pearson相关系数分析AMI患者入组时的血浆Gas6水平与miR-379、miR-195表达量的关系;采用受试者工作曲线(ROC)分析入组时的血浆Gas6水平及miR-379、miR-195表达量对早期AMI的诊断价值.结果 三组入组时的血浆miR-379、miR-195、Gas6水平比较差异有统计学意义(P<0.05);血浆miR-379水平比较:AMI组<非AMI组<对照组,miR-195、Gas6水平比较:AMI组>非AMI组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05).Pearson相关系数分析显示,Gas6与miR-379水平呈负相关(P<0.05),与miR-195水平呈正相关(P<0.05).ROC结果显示,血浆miR-379、miR-195、Gas6水平单独诊断早期AMI具有一定局限性(AUC=0.808、0.718、0.752),三者联合诊断的效能更佳(AUC=0.879).结论 血浆miR-379、miR-195、Gas6水平在AMI患者中异常表达,三指标可作为AMI早期疾病诊断的参考指标.
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编辑人员丨1个月前
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ACI溶栓患者miR-379-5p表达水平与缺血再灌注损伤的相关性
编辑人员丨2024/3/2
目的 探讨急性脑梗死(ACI)溶栓患者miR-379-5p表达水平与缺血再灌注损伤的相关性.方法 选取2018年12月至2022年12月于新疆维吾尔自治区人民医院接受治疗的患者148例为观察组,同时健康体检正常者148例为对照组,均采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-379-5p表达水平并对比.根据血清miR-379-5p表达水平情况将观察组进行亚分组,根据中位数分为高表达组和低表达组,对比观察组中高表达组和低表达组一般资料、缺血再灌注损伤水平,采用Pearson分析ACI溶栓患者miR-379-5p表达水平与缺血再灌注损伤的相关性.结果 观察组miR-379-5p表达水平(1.09±0.24)较对照组miR-379-5p表达水平(1.88±0.21)低(t=30.137,P<0.01).根据观察组miR-379-5p表达水平中位数分组分为高表达组74例(miR-379-5p表达水平≥1.10)和低表达组74例(miR-379-5p表达水平<1.10);高表达组溶栓后NIHSS评分、血清晚期氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平较低表达组低,血清过氧化物歧化酶(SOD)水平较低表达组高(P<0.05);Pearson相关性分析显示:miR-379-5p表达水平与溶栓后NIHSS评分、血清AOPP、MDA、TNF-α、CRP 及 MCP-1 水平(r=-0.465,P<0.05;r=-0.273,P<0.05;r=-0.429,P<0.05;r=-0.486,P<0.05;r=-0.320,P<0.05;r=-0.273,P<0.05)呈负相关,与血清 SOD 水平呈正相关(r=-0.465,P<0.05).结论 ACI溶栓患者miR-379-5p表达水平与缺血再灌注损伤的相关性,上调miR-379-5p水平有助于减轻ACI静脉溶栓后缺血再灌注损伤.
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编辑人员丨2024/3/2
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软骨细胞SHOX基因过/低表达的差异miRNA筛选与验证
编辑人员丨2023/8/6
目的 建立软骨细胞(HC-α)SHOX基因过/低表达模型,筛选与未处理组差异表达miRNA,并予以验证.方法 通过慢病毒过/低表达SHOX基因,用miRNA芯片筛选差异表达的miRNA.结果 SHOX过表达组与对照组有425条差异表达的miRNA;SHOX低表达组与对照组有379条差异表达的miRNA;按照表达水平差异相反的标准筛选差异miRNA,其中6条miRNA在处理组中表达水平差异相反.实时荧光定量PCR对6条miRNA(miR-126、miR-192、miR-370、miR-432、miR-3162、miR-4745)进行验证,miR-126在过表达组明显上调(P<0.05),在低表达组明显下调(P<0.05).结论 miR-126参与SHOX介导的软骨细胞凋亡过程.
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编辑人员丨2023/8/6
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miR-379-5p对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨微小核糖核酸-379-5p(miR-379-5p)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法检测膀胱癌组织细胞与正常组织细胞中miR-379-5p表达水平,分别将miR-379-5p mimics序列和miR-NC序列转染至人膀胱移行细胞癌细胞系um-uc-3,作为miR-379-5p mimics组和miR-NC组,通过Western blot实验检测转染效率,采用MMT实验和Transwell实验比较两组um-uc-3细胞增殖、迁移以及侵袭能力.结果 qRT-PCR检测结果显示,膀胱癌组织中miR-379-5p mRNA相对表达量为(0.52 ±0.38),显著低于正常组织中miR-379-5p mRNA相对表达量(1.00±0.51,P<0.05),um-uc-3中miR-379-5p mRNA相对表达量为(0.45±0.23),显著低于人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1中miR-379-5p mRNA相对表达量(1.00±0.14,P<0.05);Western blot结果显示,miR-379-5p mimics组miR-379-5p表达量升高,转染有效;MTI实验显示,miR-379-5pmimics组细胞在不同时间点OD值均小于miRNC组;Transwell实验显示,miR-379-5p mimics组细胞迁移和侵袭数量均显著少于miR-NC组(P<0.05).结论 miR-379-5p在膀胱癌组织细胞中表达均下调,体外上调miR-379-5p表达可有效抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力.
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编辑人员丨2023/8/6
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玉屏风散对支气管哮喘小鼠微小 RNA 表达的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的:探讨玉屏风散对支气管哮喘(哮喘)小鼠5种与 Th 细胞相关的微小 RNA(miRNA)表达调节的影响。方法40只 Balb /c 小鼠按随机数字表法随机分为正常对照组、哮喘模型组、玉屏风散治疗组和地塞米松治疗组,每组10只。用卵清蛋白(OVA)诱导激发系统性呼吸道炎性反应模型,分别予玉屏风散和地塞米松治疗。ELISA 法测定肺组织匀浆中白细胞介素(IL)-13和 IL-17水平以及肺组织 HE 染色观察病理变化。取小鼠脾组织,采用实时定量 PCR 法检测各组 miR-146a、miR-146b、miR-210、miR-126和 miR-21 a 的表达变化。结果玉屏风散治疗组 IL-13水平[(6.382±1.690)μg/L]和 IL-17水平[(24.212±1.250)μg/L]低于哮喘模型组[(20.154±7.960)μg/L、(50.312±5.770)μg/L],差异均有统计学意义(t =3.785,P =0.005;t =9.891, P =0.000)。地塞米松治疗组 IL-13水平[(9.366±3.460)μg/L]和 IL-17水平[(29.132±4.960)μg/L]也低于哮喘模型组,差异均有统计学意义(t =2.779,P =0.024;t =6.225,P =0.000)。玉屏风散治疗组 miR-210表达(2.052±0.871)高于哮喘模型组(4.034±1.379)(3.95倍,t =2.718,P =0.026)。玉屏风散和地塞米松治疗组 miR-126表达(分别为4.920±0.924、3.862±1.510)均高于哮喘模型组(6.024±0.447),差异具有统计学意义(分别为2.15倍,t =2.405,P =0.043和4.48倍,t =-3.069,P =0.015)。结论Th2和 Th17细胞均参与哮喘的发病机制,且能被玉屏风散所抑制。玉屏风散通过对 miR-210和 miR-126表达的影响,调节 Th 细胞而治疗哮喘。
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编辑人员丨2023/8/6
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microRNA-379在胚胎心脏发育及P19细胞分化过程中的表达规律
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察microRNA (miR)-379在正常小鼠胚胎心脏发育过程中表达水平的变化,结合其在P19细胞向心肌细胞分化过程中的表达情况,探讨其在心脏发育中可能存在的作用.方法 取孕第8.5、11.5、14.5、18.5天小鼠胚胎的心脏组织,采用实时荧光定量PCR (RT-PCR)技术检测基因miR-379的表达变化.应用10 mL/L二甲基亚砜诱导P19细胞向心肌细胞方向分化,细菌培养皿中悬浮诱导至第4天,形成细胞聚集体后转移至6孑板培养,采用RT-PCR技术分别检测诱导第0、4、6、10天P19细胞中miR-379基因的表达水平.结果 miR-379在小鼠胚胎心脏发育过程中表达量逐渐减低,各时间点之间比较差异有统计学意义(F=21.13,P<0.05).另一方面,在P19细胞诱导分化过程中心肌标志物肌钙蛋白T呈递增趋势,证明P19细胞被成功诱导为心肌样细胞.在P19细胞向心肌细胞分化的第0天表达量较低,第4天表达量最高,随后表达量又逐渐减低.结论 miR-379参与心脏发育过程,且可能与先天性心脏病的发生发展有关,但是具体机制还需要进一步的研究.
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编辑人员丨2023/8/6
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miR-187靶向作用FGF9抑制宫颈癌细胞增殖作用及机制研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究microRNA-187在宫颈癌细胞株HeLa中的表达水平,并探讨其对HeLa细胞增殖的影响及作用机制.方法 常规培养宫颈癌细胞株HeLa,经脂质体分别转染miR-187模拟物(mimics)和对照48 h后,观察miR-187高表达对HeLa细胞增殖的影响;利用Targetscan 7.2软件及荧光素酶报告基因试验,分析miR-187对成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)基因的靶向性作用;构建FGF9 siRNA,观察干扰FGF9基因表达对HeLa细胞增殖的影响.结果 qRT-PCR结果显示miR-187在人宫颈上皮永生化细胞H8和宫颈癌细胞系HeLa中相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-187 mimics后,HeLa细胞增殖抑制、G1期细胞增多、cyclinD1和FGF9蛋白的表达减少(P<0.05);miR-187与FGF9基因的3'UTR(373~379)结合,抑制FGF9的mRNA及蛋白质表达(P<0.01);干扰FGF9基因表达后,HeLa细胞增殖抑制、G1期细胞增多、cyclinD1蛋白的表达减少(P<0.05).结论 miR-187可能靶向下调FGF9抑制细胞周期的进程,进而抑制宫颈癌细胞的增殖.
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编辑人员丨2023/8/6