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结直肠腺癌组织中tiRNA-1_33-Gly-GCC-1的表达及临床意义
编辑人员丨3天前
目的:研究结直肠腺癌(colorectal adenocarcinoma,CAC)组织中tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的表达及对细胞增殖的影响.方法:通过tRF&tiRNA芯片分析5 对CAC组织中tRFs&tiRNAs差异性表达谱并用qRT-PCR实验在82 对CAC组织中对tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的表达水平进行验证.采用RNA原位杂交技术(RISH)检测CAC组织中tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的阳性表达,并分析与患者临床特征和患者预后的关系.CCK-8 实验检测tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 对细胞增殖活性的影响.生物信息学预测并应用双荧光素酶报告实验验证tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 如何调控 TP53 I11.回复实验验证tiRNA-1_33-Gly-GCC-1/TP53I11 信号轴对CAC细胞增殖的影响.裸鼠荷瘤实验验证tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 对移植瘤生长和增殖的影响.结果:tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 在结直肠腺癌组织中表达水平升高并呈阳性表达,阳性例数54/82(65.85%)明显高于邻近正常组织 11/82(13.41%),两组间有统计学差异(χ2 =5.475,P =0.019<0.05).tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的阳性表达与CAC患者肿瘤直径(χ2 =11.699)、分化程度(χ2 =13.081)和患者生存预后(χ2 =15.621)密切相关(均P<0.05).CCK-8 实验结果显示tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 促进CAC细胞的增殖活性(P<0.05).生物信息学预测TP53I11是tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验提示tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 与TP53I11 3'UTR结合从而抑制其蛋白质合成.Rescue回复实验进一步验证了tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 抑制TP53I11 mRNA和蛋白的表达及对大肠癌细胞增殖的促进作用.裸鼠皮下移植瘤实验也提示tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 促进了生长和增殖.结论:tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 在结直肠腺癌组织中表达水平上调,可能是一个新的促癌基因;机制上tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 能抑制TP53I11 的表达而促进CAC细胞的增殖生长.本研究为今后结直肠腺癌诊治和预后判断提供新的理论基础.
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编辑人员丨3天前
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败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭
编辑人员丨3天前
目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制.方法:收集2019 年2月至2020 年1 月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31 例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665 的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936 和miR-665 表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229 细胞,si-NC、si-circ_0000936 分别转染至 LN229 细胞,pcDNA-circ_0000936 转染至LN229 细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936 与miR-665 的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2 蛋白表达量.结果:胶质瘤组织中circ_0000936 的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665 的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936 和miR-665 呈负相关(r =-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2 蛋白水平和circ_0000936 的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665 的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936 后miR-665 的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2 蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936 能够逆转败酱草对LN229 细胞生物学行为的作用.结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665 诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭.
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编辑人员丨3天前
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幽门螺杆菌感染所致人脐静脉内皮细胞功能异常及炎性反应的作用机制研究
编辑人员丨3天前
目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)通过激活转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖、迁移、凋亡及炎性反应的影响.方法 将HUVEC分为对照组(未感染Hp)和Hp感染组(Hp感染复数=25),通过倒置显微镜观察感染Hp的HUVEC形态变化;细胞计数试剂盒8细胞增殖实验和平板克隆实验检测2组HUVEC增殖能力,Transwell实验和划痕愈合实验检测HUVEC的迁移能力,流式细胞术检测HUVEC的凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应检测2组HUVEC中Hp细胞毒素相关基因A、白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)信使核糖核酸表达情况;Western blot检测HUVEC细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、原癌基因(C-Myc)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、B 淋巴细胞瘤 2 基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、STAT3/NF-κB信号通路蛋白表达情况.结果 与对照组比较,Hp组细胞增殖、纵向、横向迁移能力明显降低,CyclinD1、PCNA、C-Myc、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax、磷酸化STAT3/STAT3、磷酸化NF-κB P65/NF-κB-P65蛋白表达量和HUVEC凋亡率升高(P<0.05,P<0.01),炎性因子 IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α mRNA 水平升高(2.71±0.05 vs 1.06±0.41,1.42±0.02 vs 0.92± 0.11,2.50±0.29 vs 1.00±0.10,5.34±0.57 vs 1.00±0.16,P<0.01).结论 Hp 通过激活 STAT3/NF-κB 通路抑制HUVEC增殖、迁移,并诱导其凋亡和炎性反应的发生.
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编辑人员丨3天前
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中药固本散结汤组方成分抗胃癌的研究进展
编辑人员丨3天前
胃癌是常见的消化道恶性肿瘤.口服中药通过扶正祛邪、调节免疫系统,在防治肿瘤复发转移方面具有很好的临床效果.为进一步提高中药的应用价值,本研究围绕以"固本散结汤"为代表的中药成分对抑制肿瘤细胞增殖转移、诱导肿瘤细胞凋亡、调节免疫功能、增强化疗药物的敏感性、抗肿瘤血管生成等方面的作用进行归纳阐述,探索中药在治疗胃癌脱落细胞种植转移方面的作用,提供中药治疗肿瘤的新思路.
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编辑人员丨3天前
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木犀草素通过Nrf2/HO-1通路诱导耐多柔比星K562/ADR细胞发生铁死亡
编辑人员丨3天前
目的:研究木犀草素(luteolin,Lut)对人耐多柔比星(adriamycin,ADR)慢性髓系 白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)细胞K562/ADR增殖及铁死亡的影响,并探讨可能的作用机制.方法:用不同浓度的ADR处理K562细胞和K562/ADR细胞,采用CCK-8法检测K562细胞和K562/ADR细胞对ADR的敏感性;采用CCK-8法检测不同浓度Lut对K562/ADR细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)筛选出后续实验的药物浓度.不同浓度的Lut处理后,在倒置光学显微镜下观察细胞形态的变化;CCK-8法检测Lut对ADR的增敏作用,FCM法检测Lut对K562/ADR细胞凋亡的影响;随后再用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(reactive oxygen specie,ROS)的含量,谷胱甘肽(glutathione,GSH)试剂盒检测各组细胞内GSH的含量;Fe2+比色法检测各组细胞内Fe2+的含量,蛋白质印迹法检测各组细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、核因子 E2 相关因子 2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素加氧-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白的表达量.CCK-8法检测铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)干预后Lut对K562/ADR细胞增殖、ROS含量、GSH含量、Fe2+含量及GPX4表达量的影响.结果:与Lut(0pmol/L)组相比,Lut可显著抑制K562/ADR细胞增殖(P<0.001),提高K562/ADR细胞对ADR的敏感性(P<0.05);Lut可明显提高K562/ADR细胞的凋亡率(P<0.001)以及细胞中ROS的含量(P<0.05),同时降低K562/ADR细胞内GSH并提高Fe2+的含量(P<0.001和P<0.01);与 Lut(0 μmol/L)组相比,细胞内 GPX4、Nrf2 和 HO-1蛋白的表达量随Lut浓度的升高而降低(P均<0.05);与Lut单药组相比,Fer-1干预后可部分逆转Lut对K562/ADR细胞增殖的抑制作用(P<0.05),K562/ADR细胞内ROS的含量降低(P<0.001),GSH的水平升高(P<0.001),Fe2+的含量降低(P<0.001),GPX4蛋白的表达水平显著升高(P<0.01).结论:Lut可通过铁死亡途径抑制K562/ADR细胞增殖,提高对ADR的敏感性,其机制可能与Nrf2/HO-1信号通路有关,这将为Lut通过铁死亡方式治疗白血病提供实验依据.
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编辑人员丨3天前
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HMGN5基因与子宫内膜癌临床病理特征及生物学行为的关系
编辑人员丨3天前
目的 研究高迁移率族核小体结合域(HMGN)5与子宫内膜癌患者临床病理特征相关性及对人子宫内膜癌细胞HEC-1A细胞增殖、侵袭和转移的影响.方法 连续纳入2020年1月至2021年6月柳州市人民医院实施根治性切除术的子宫内膜癌病例79例.应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法对子宫内膜癌肿瘤组织和癌旁正常组织的HMGN5 mRNA表达量进行检测.HEC-1A细胞复苏后培养,取对数期细胞随机将其分为HMGN5促进组(转染NMGN5干扰序列)、HMGN5正常组(转染HMGN5干扰对照序列)和空白对照组(不做处理),进行转染48 h并进行后期实验.应用RT-PCR法对HEC-1A细胞中HMGN5 mRNA表达进行检测;检测3组细胞HEC-1A细胞增殖活力;应用划痕实验对HEC-1A细胞迁移能力进行检测;应用Transwell小室检测细胞侵袭能力.结果 子宫内膜癌组HMGN5 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.05);有淋巴结转移、中低分化及FIGO分期Ⅱ~Ⅳ期患者的HMGN5的相对表达量要明显低于无淋巴结转移、高分化及FIGO分期Ⅰ期患者(P<0.05);转染后,与空白对照组和HMGN5正常表达组相比,HMGN5促进组HMGN5 mRNA的表达量、增殖活力OD值、划痕愈合率和侵袭细胞数量均显著较高(P<0.05).结论 HMGN5在人子宫内膜癌组织中存在高表达,而且HMGN5高表达对人子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭有着明显相关性.
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编辑人员丨3天前
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白藜芦醇减轻大鼠胰岛β细胞瘤细胞低氧损伤
编辑人员丨3天前
目的 研究白藜芦醇减轻大鼠胰岛β细胞瘤细胞(INS-1)低氧损伤的作用.方法 将INS-1 细胞分为三组,即常氧对照组(control)、低氧组(hypoxia)、低氧及白藜芦醇组(hypoxia+RSV);采用正常培养方法培养常氧对照组,用CCK8 检测不同低氧时间(6、12、24、48 h)的细胞增殖情况,选择合适的时间条件构建低氧模型并用于下一步研究;再以不同浓度的白藜芦醇(8、10、12、15 μmol/L)提前干预 12 h,并进行前期设定的低氧条件处理,用CCK8 检测合适的浓度条件,构建白藜芦醇干预模型并用于下一步研究.以组织活性氧试剂盒及线粒体超氧化物试剂盒检测氧化应激水平;线粒体膜电位及ATP水平检测线粒体功能;流式细胞仪分析检测凋亡;胰岛素定量检测试剂盒检测胰岛素分泌量;实时定量反转录检测Sirt1、Pdx1、Glut2的表达水平;蛋白免疫印迹检测相应蛋白水平.结果 与常氧对照组相比,低氧组细胞增殖降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.01),线粒体功能降低(P<0.05),胰岛素分泌减少(P<0.05),Sirt1、Pdx1、Glut2基因及其相应蛋白表达水平降低(P<0.05).而白藜芦醇干预可以明显减轻低氧应激损伤(P<0.05),促进增殖(P<0.05),逆转凋亡(P<0.01),改善线粒体功能(P<0.05),促进胰岛素分泌(P<0.05),促进Sirt1、Pdx1、Glut2基因及其相应蛋白表达水平(P<0.05).结论 白藜芦醇可以保护低氧造成的INS-1 细胞氧化应激损伤,改善线粒体功能,抗凋亡,并促进胰岛素功能性基因表达,促进胰岛素分泌.[营养学报,2024,46(1):69-74]
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编辑人员丨3天前
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山奈酚靶向B细胞淋巴瘤2相关蛋白A1抑制肾透明细胞癌细胞生物行为
编辑人员丨3天前
目的 探讨山奈酚(Kaempferol)靶向B淋巴细胞瘤2相关蛋白(BCL2)A 1抑制肾透明细胞癌(ccRCC)细胞的作用机制.方法 将ccRCC细胞(ACHN和769-P)分成Vector组(转染空载质粒)或Control组(正常培养)、Kaempferol组(Kaempferol处理细胞)和Kaempferol+BCL2A1组(转染BCL2A1并用Kaempferol处理).生物信息学预测Kaempferol靶点并分析其与临床不良表型之间关系.噻唑蓝(MTT)检测不同浓度Kaempferol处理细胞的活力.CCK-8试剂盒和克隆形成检测细胞增殖能力.Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力.裸鼠移植瘤实验检测Kaempferol体内抑制细胞增殖能力.免疫组化检测增殖细胞抗原Ki67.Western印迹检测BCL2A1及上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白表达.结果 生物信息学数据库和软件分析显示,Kaempferol靶向BCL2A1,BCL2A1在ccRCC组织中表达上调且与临床不良表型有关.Kaempferol浓度和时间依赖性明显抑制ccRCC细胞BCL2A1蛋白表达(P<0.05).以120或150 μmol/L浓度分别作用ACHN、769-P细胞后,细胞活力明显下降(P<0.05).以相应浓度Kaempferol作用细胞后,ccRCC细胞增殖、迁移和侵袭能力明显下降(P<0.05).Kaempfero l组移植瘤体积、重量、Ki67相对表达量和BCL2A1蛋白表达明显小于Control组(P<0.05).与Vector组相比,BCL2A1组中BCL2A1蛋白表达明显增加(P<0.05).与Control组相比,Kaempferol组中BCL2A1蛋白表达、增殖细胞、克隆细胞、迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.05);与Kaempferol组相比,Kaempferol+BCL2A1组上述指标明显增多(P<0.05).细胞经Kaempferol干预后,E-cadherin蛋白表达明显增加,N-cadherin和Vimentin蛋白表达明显减少,而BCL2A1可明显逆转Kaempferol对EMT相关蛋白表达的影响(P<0.05).结论 Kaempferol可抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力,其可能是通过靶向调节BCL2A1蛋白表达,影响EMT相关蛋白表达实现的.
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编辑人员丨3天前
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薯蓣皂苷对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响
编辑人员丨3天前
目的:探讨薯蓣皂苷对人口腔鳞癌细胞SCC-4和SCC-25增殖和凋亡的影响.方法:不同浓度(0、0.1、0.3、1、3、10、30 μmol/L)薯蓣皂苷处理SCC-4和SCC-25细胞24、48、72 h后,CCK-8法检测薯蓣皂苷对SCC-4和SCC-25细胞存活的影响,根据IC50值筛选出后续实验浓度(0、1、2、4 μmol/L);EdU检测薯蓣皂苷对SCC-4和SCC-25细胞增殖的影响;流式细胞术检测薯蓣皂苷对SCC-4和SCC-25细胞凋亡的影响;Western Blot检测薯蓣皂苷处理48 h后,细胞中Noxa、Cleaved-Caspase 3蛋白的表达水平;qRT-PCR检测细胞中Noxa mRNA表达情况.结果:在一定浓度范围内,薯蓣皂苷可抑制口腔鳞癌细胞SCC-4和SCC-25的增殖,呈时间依赖性和剂量依赖性(P<0.05).同时,实验组(1、2、4 μmol/L)薯蓣皂苷干预48 h后可促进SCC-4和SCC-25细胞的凋亡(P<0.05),并上调细胞中Noxa、Cleaved-Caspase 3的表达水平,且SCC-4和SCC-25细胞中Noxa mRNA表达随浓度呈上升趋势(P<0.05).结论:一定浓度薯蓣皂苷可有效抑制口腔鳞癌细胞增殖,诱导口腔鳞癌细胞凋亡,其作用机制可能与薯蓣皂苷上调促凋亡蛋白Noxa的表达有关.
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编辑人员丨3天前
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灵芝提取物通过miR-143-3p对Aβ25~35诱导的神经细胞损伤的影响
编辑人员丨3天前
目的 探讨灵芝提取物对β淀粉样蛋白(Aβ)25~35诱导的神经细胞损伤的影响及其可能的作用机制.方法 采用Aβ25~35诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,不同浓度的灵芝提取物处理PC12细胞,an-ti-miR-NC、anti-miR-143-3p 分别转染至 PC12 细胞后进行Aβ25~35处理 24 h,miR-NC、miR-143-3p mimics 分别转染至 PC12 细胞后加入10 mg/L灵芝提取物与Aβ25~35处理24 h;采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;采用试剂盒检测丙二醛(MDA)的水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-143-3p表达量.结果 Aβ25~35作用条件下,灵芝提取物可明显降低细胞凋亡率、MDA水平、miR-143-3p表达量(P<0.05),明显升高细胞活力和SOD、CAT的活性,且呈剂量依赖性(P<0.05);转染anti-miR-143-3p后Aβ25~35诱导的PC12细胞活力和SOD、CAT活性明显升高,细胞凋亡率及MDA水平明显降低(P<0.05);转染miR-143-3p mimics可明显逆转灵芝提取物对Aβ25~35诱导的PC12细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用.结论 灵芝提取物可通过抑制miR-143-3p表达减轻Aβ25~35诱导的PC12细胞损伤.
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编辑人员丨3天前