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犀角地黄汤对脓毒症小鼠肝组织microRNA表达的影响
编辑人员丨6天前
目的:基于转录组学探讨犀角地黄汤抗脓毒症性肝损伤的机制。方法:将60只C57BL/6小鼠按随机数字表法等分为对照组、脓毒症组和脓毒症犀角地黄汤治疗组。采用脂多糖腹腔注射复制脓毒症小鼠模型;对照组予等量生理盐水腹腔注射。脓毒症犀角地黄汤组于建模前2 d犀角地黄汤(生药187.5 mg)灌胃,2次/d,建模后继续胃饲(2次/d),对照组及脓毒症组予等量生理盐水胃饲。LPS干预后72 h每组随机取9只,麻醉后取部分肝脏做Small RNA及RNA-seq测序分析,部分肝脏做病理检查。结果:犀角地黄汤有改善脓毒症小鼠肝组织病理学改变。缓解部分异常表达的microRNA(mmu-miR-292a-5p、mmu-miR-871-3p、mmu-miR-653-5p、mmu-miR-293-5p、mmu-miR-155-3p,mmu-miR-346-5p、mmu-miR-187-5p、mmu-miR-3090-3p)及其靶基因。结论:犀角地黄汤可减少脓毒症小鼠肝组织病理学改变,其机制可能与犀角地黄汤调节mmu-miR-187-5p及其靶基因Adam8、Irak3、Pfkfb3等关键基因的表达有关。
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编辑人员丨6天前
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miR-187-5p通过RANKL/NFκB信号通路抑制骨质疏松症中的破骨细胞活性
编辑人员丨6天前
目的:探讨miR-187-5p通过RANKL/NFκB信号通路对骨质疏松症中破骨细胞活性的影响及机制分析。方法:使用小鼠巨噬细胞264.7细胞株(RAW246.7),设置正常组(con)、核因子κB配体的受体激活子(receptor activator of nuclear factor-κBligand,RANKL)诱导的骨质疏松症组(RANKL-induced OP)、阴性对照(mimic negative control,mimic NC)、OP+miR-187-5p模拟物(OP+miR-187-5p mimic),通过细胞计数试剂盒(the cell counting kit 8,CCK8)检测破骨细胞的增殖水平,RT-qPCR检测TRAPmRNA、miR-187-5p表达水平,免疫印迹检测p65和TNF α蛋白表达。最后,通过双荧光素酶报告基因(dual luciferase reporter assays)检测miR-187-5p和p65间的相互作用。 结果:RAW264.7细胞转染miR-187-5p后,OP组的细胞增殖水平和TRAP mRNA水平显著高于con组( P=0.008、0.017),OP+miR-187-5p mimic组细胞增殖水平和TRAP mRNA水平显著低于OP+miR-187-5p NC组( P=0.023、0.037)。而miR-187-5p在OP组显著低于con组( P=0.031),转染miR-187-5p mimic后升高其表达水平( P=0.041)。此外,OP组的p65和TNFα蛋白水平明显高于con组( P=0.034; P=0.024),OP+miR-187-5p mimic组的p65和TNF α蛋白水平显著低于OP+miR-187-5p NC组( P=0.028; P=0.036)。同时OP组的p65显著高于con组( P=0.039),OP+miR-187-5p mimic组的p65基因水平明显高于OP+miR-187-5p NC( P=0.025)。双荧光素酶报告分析,miR-187-5p与p65间存在靶向关系。 结论:miR-187-5p通过抑制NFκB信号通路抑制破骨细胞的活性。
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编辑人员丨6天前
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circERBB2在卵巢癌中的表达及作用机制研究
编辑人员丨2023/10/21
目的 探讨circERBB2在卵巢癌中的表达及作用机制.方法 基于GEO数据库筛选卵巢癌差异表达环状RNA(circRNA),并查找circRNA相关靶基因,绘制韦恩图得到GSE79572数据集中差异表达基因与Targetscan 7.1预测所得微小RNA-187-3p(miR-187-3p)靶基因的交叉基因.收集20例卵巢癌患者的卵巢癌组织和癌旁正常组织,培养人正常卵巢细胞系HOSEpiC和人卵巢癌细胞系OVCAR-3、SKOV-3、3AO、OV90,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测circERBB2、miR-187-3p、BCL6表达水平.通过双荧光素酶报告基因实验和RNA下拉实验验证circERBB2、miR-187-3p、BCL6三者间的相互作用.通过多项细胞实验分析circERBB2、miR-187-3p、BCL6对卵巢癌细胞侵袭、迁移、增殖及细胞周期的影响.结果 数据库分析结果显示,卵巢癌中差异表达circRNA为circERBB2,circERBB2靶向的miRNA为miR-187-3p,绘制韦恩图取交集后得到BCL6等7个交叉基因,circERBB2与miR-187-3p、miR-187-3p与BCL6存在潜在结合位点.卵巢癌组织中circERBB2、BCL6表达水平高于癌旁组织,miR-187-3p表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢癌细胞系OVCAR-3、SKOV-3、3AO、OV90中circERBB2表达水平均高于正常卵巢细胞系HOSEpiC,差异有统计学意义(P<0.05).双荧光素酶报告基因实验及RNA下拉实验证实,circERBB2、miR-187-3p、BCL6之间存在相互作用关系.多项细胞实验结果显示,抑制circERBB2表达能够抑制卵巢癌细胞增殖和迁移,这种抑制作用可在过表达miR-187-3p后被逆转;抑制miR-187-3p表达能够有效促进卵巢癌细胞增殖和迁移,这种促进作用可在抑制BCL6表达后被逆转.结论 circERBB2能够通过靶向吸附miR-187-3p促进原癌基因BCL6表达,从而调节卵巢癌发生过程.
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编辑人员丨2023/10/21
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微小RNA-187在原发性肝癌组织的表达和其调控机制
编辑人员丨2023/8/6
目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-187在原发性肝癌患者癌组织和癌旁组织中的表达,使用miR-187 mimics转染后观察其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖和迁移侵袭的影响.方法 收集74例原发性肝癌患者的癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-187的相对表达.使用噻唑蓝(MTT)法、划痕实验和Transwell小室侵袭实验观察miR-187mimics转染后其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖、迁移和侵袭的影响.结果 在癌组织与癌旁组织的比较中,癌组织[1.61(1.55,1.68)] miR-187表达水平明显高于癌旁组织[0.47(0.41,0.49)],差异有统计学有意义(P =0.028).肝癌细胞系Hep3B (4.1±0.6)和HepG2(2.5±0.4)的miR-187相对表达水平,明显高于肝正常细胞系THLE-2(1.0±0.1),差异有统计学意义(P =0.003,P=0.013).转染miR-187 mimic后36h和48h,HepG2和Hep3B均表现出明显的增殖能力(0.75±0.16和0.56±0.22)、迁移能力[(64.6±8.3)%和(58.4±6.2)%]和侵袭能力[(37.5±7.8)%和(71.2±5.0)%]的增强,且差异有统计学意义(P=0.011和P=0.020;P=0.009和P=0.016;P=0.004和P=0.008).结论 癌组织中的miR-187表达水平升高,通过机制研究结果显示,miR-187与肿瘤细胞株的增殖和迁移侵袭有关,miR-187的过表达能够明显增加HepG2和Hep3B细胞株的增殖和迁移侵袭能力.
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编辑人员丨2023/8/6
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胶质瘤组织中MicroRNA-187的表达及其临床意义
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究胶质瘤组织中MicroRNA-187的表达及其临床意义,为临床胶质瘤的诊断、治疗及预后提供参考依据.方法 选取2014年2月至2016年2月于我院接受治疗的胶质瘤患者100例(胶质瘤组),另选同期因脑外伤需手术治疗的患者100例(正常对照组);肿瘤组患者组织标本为手术切除的胶质瘤标本,对照组患者组织标本为颅脑外份手术切除的正常脑组织标本,采用荧光定量PCR法检测样本中的MicroRNA-187表达水平;同时分析MicroRNA-187表达水平与胶质瘤组患者年龄、性别、肿瘤大小、WHO分级、KPS评分、Ki67水平以及肿瘤部位等临床病理参考的关系.并比较胶质瘤患者随访1年后存活与死亡组者胶质瘤组织中MicroRNA-187表达水平.结果 胶质瘤组的组织标本中MicroRNA-187表达水平为(0.840±0.602),低于正常对照组(2.411±0.937)(P<0.05).胶质瘤组患者KPS评分≥70分、Ki67<10%患者胶质瘤组织中MicroRNA-187表达水平分别为(1.213±0.606)、(1.276±0.618),均高于胶质瘤KPS评分<70分、Ki67≥10%患者的(0.605±0.584)、(0.634±0.587)(P均<0.05).胶质瘤患者随访1年的存活组患者胶质瘤组织中MicroRNA-187表达水平为(1.278±0.624),高于死亡组(0.598±0.577)(P<0.05).结论 胶质瘤组织中MicroRNA-187表达水平与患者的KPS评分以及Ki-67均存在密切相关,可作为临床上诊断胶质瘤病情严重程度的指标之一,且可能成为胶质瘤预后的分子靶标.
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编辑人员丨2023/8/6
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miR-187靶向作用FGF9抑制宫颈癌细胞增殖作用及机制研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究microRNA-187在宫颈癌细胞株HeLa中的表达水平,并探讨其对HeLa细胞增殖的影响及作用机制.方法 常规培养宫颈癌细胞株HeLa,经脂质体分别转染miR-187模拟物(mimics)和对照48 h后,观察miR-187高表达对HeLa细胞增殖的影响;利用Targetscan 7.2软件及荧光素酶报告基因试验,分析miR-187对成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)基因的靶向性作用;构建FGF9 siRNA,观察干扰FGF9基因表达对HeLa细胞增殖的影响.结果 qRT-PCR结果显示miR-187在人宫颈上皮永生化细胞H8和宫颈癌细胞系HeLa中相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);转染miR-187 mimics后,HeLa细胞增殖抑制、G1期细胞增多、cyclinD1和FGF9蛋白的表达减少(P<0.05);miR-187与FGF9基因的3'UTR(373~379)结合,抑制FGF9的mRNA及蛋白质表达(P<0.01);干扰FGF9基因表达后,HeLa细胞增殖抑制、G1期细胞增多、cyclinD1蛋白的表达减少(P<0.05).结论 miR-187可能靶向下调FGF9抑制细胞周期的进程,进而抑制宫颈癌细胞的增殖.
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编辑人员丨2023/8/6
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血清中microRNA-127对鼻咽癌患者化疗抗性的预测价值
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨血清微小RNA(micro RNA)在预测鼻咽癌患者化疗有效性方面的临床价值.方法 纳入2010年1月—2016年12月我院收治的187例接受顺铂联合化疗的鼻咽癌患者,其中化疗敏感患者123例,化疗抵抗患者64例.检测所有初次化疗前血清中miRNA的表达水平,并以健康体检人群为对照,评估血清miRNA与鼻咽癌患者化疗有效性的关系及其预测价值.结果 鼻咽癌患者血清miR-127水平显著高于健康对照组(4. 3 ± 1. 6 vs. 1. 4 ± 0. 5) (P<0. 001),化疗抵抗患者的血清miR-127水平显著高于化疗敏感患者(4. 5 ± 1. 3 vs. 3. 8 ± 1. 7) (P<0. 001). ROC曲线显示血清miR-127对鼻咽癌患者化疗抵抗的预测价值较好(AUC=0. 702,P<0. 001),最佳阈值为4. 2,灵敏度82. 3% ,特异度76. 3% .与化疗敏感组相比,化疗抵抗组患者的T3-4期、N3 期和TNM Ⅲ~Ⅳ期患者比例均明显升高(P<0. 01),且miR-127≥4. 2的比例也升高(P<0. 001).多因素Logistics回归分析显示TNM分期(OR=1. 655,95% CI:1. 142~2. 584,P=0. 016)和血清miR-127≥4. 2(OR=2. 231,95% CI:1. 762~4. 503,P=0. 001)是影响鼻咽癌患者化疗抵抗的独立危险因素.结论 血清miR-127水平的升高可能是预测鼻咽癌患者化疗抵抗的重要危险因素.
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编辑人员丨2023/8/6
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MicroRNA-187表达对肝细胞癌术后复发的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的:探讨mcroRNA-187的表达对肝细胞癌(HCC)术后复发的影响.方法:收集2012年1月-2013年10月接受手术切除治疗的HCC患者328例,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测microRNA-187在HCC组织中的表达,并随访其复发状况.绘制受试者工作特征(ROC)曲线并评价microRNA-187对HCC复发的预测价值.采用Kaplan-Meier并Log-rank检验进行单因素分析,将单因素有意义的因素引入Cox回归模型.结果:328例患者microRNA-187表达水平为2.84±0.73.截至2018年12月,失访30例,随访率90.9%.在随访到的298例患者中,复发146例.ROC曲线显示,microRNA-187预测HCC复发的最佳临界点为2.5.当microRNA-187为2.5时,microRNA-187预测HCC复发的敏感度为63.0%,特异度为79.5%;曲线下面积为0.70.Kaplan-Meier并Log-rank分析显示,较大年龄(HR: 1.07,95% CI:1.05~1.35)、Child-Pugh B级(HR:1.17,95% CI:1.06~1.23)、较大肿瘤直径(HR: 1.07,95% CI:1.03~2.11)、肿瘤多发(HR: 1.13,95%CI: 1.07~1.89)、门静脉癌栓(HR:1.13,95% CI:1.07~1.74)、较高TN M分期(HR: 1.24,95% CI:1.13 ~3.21)、较高AFP(HR:2.43,95% CI:1.17 ~4.67)、microRNA-187 低表达(HR:2.37,95% CI:2.11~ 2.64)可增加HCC患者复发风险.多因素Cox回归分析显示:Child-Pugh B级(HR: 1.16,95%CI: 1.05~1.21)、肿瘤多发(HR: 1.11,95% CI:1.08~1.77)、较高TNM分期(HR: 1.17,95% CI:1.11~2.83)、较高AFP (HR:2.28,95% CI:1.67~3.14)、microRNA-187 低表达(HR:2.37,95% CI:2.15~2.64)可增加HCC患者复发风险,是HCC患者复发的独立危险因素.结论:microRNA-187表达是HCC患者复发的独立危险因素,microRNA-187表达下调患者复发风险更大.
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编辑人员丨2023/8/5