-
原发性干燥综合征外分泌腺体评估新技术
编辑人员丨5天前
原发性干燥综合征(primary Sj?gren's syndrome,pSS)是一种慢性、全身性、炎症性、系统性的自身免疫性疾病,其病理学特征为淋巴细胞浸润引起的外分泌腺进行性损害.其外分泌腺损害主要表现为唾液腺和泪腺的功能受损,临床表现为口干和眼干,以及腺体外多系统受累表现,如周围神经病变、关节炎、肺部疾病等.正是因为pSS的临床表现多样,体征不特异,导致pSS的诊断困难.侵袭性小、特异性高的唇腺活检,作为目前最常用的评估腺体受累的方法.通过评估唇腺的组织病理学特征,不仅可以辅助诊断,也可用来评估生物制剂治疗效果.最近,外分泌腺评估的新技术逐渐兴起,本文将综述唇腺的组织病理学特征、潜在生物标志物,以及评估外分泌腺的新技术.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
浸润性乳腺癌中EphA2基因启动子区DNA低甲基化及与细胞焦亡的相关性
编辑人员丨5天前
目的:探讨浸润性乳腺癌中肝配蛋白A型受体2(ephrin A receptor 2,EphA2)表达及其启动子区DNA低甲基化与细胞焦亡发生的相关性.方法:应用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测42例乳腺癌患者正常乳腺组织、癌旁组织和癌组织中EphA2的表达情况;采用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检验细胞焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 1和炎性细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平;应用巢氏甲基化特异性 PCR(nested methylation-specific PCR,nMS-PCR)检验EphA2基因启动子区DNA甲基化水平;采用蛋白质印迹法测验DNA甲基转移酶 1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和 DNA 甲基转移酶 3a(DNA methyltransferase 3a,DNMT3a)蛋白表达水平;应用Pearson相关系数分别对患者癌组织中EphA2的蛋白表达和甲基化水平与NLRP3、Caspase 1、IL-1β、DNMT1和DNMT3a进行相关性分析.结果:与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组中EphA2蛋白表达水平明显升高(P均<0.01),NLRP3、Caspase 1和IL-1β的蛋白表达水平明显降低(P均<0.05);同时与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组织中EphA2基因启动子区DNA甲基化水平明显降低(P均<0.05),DNMT3a蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05),而DNMT1蛋白表达的差异未有统计学意义;Pearson相关性分析结果显示,EphA2蛋白与NLRP3 蛋白(r=-0.651 2,P<0.05)、Caspase 1 蛋白(r=-0.571 2,P<0.05)、IL-1 蛋白(r=-0.654 6,P<0.05)和 DNMT3a 蛋白(r=-0.537 4,P<0.05)的表达水平均呈负相关性;而EphA2基因的甲基化水平与 NLRP3 蛋白(r=0.634 1,P=0.026 8)、Caspase 1 蛋白(r=0.672 8,P=0.016 5)、IL-1β 蛋白(r=0.694 0,P=0.012 3)和 DNMT3a 蛋白(r=0.687 1,P=0.013 6)的表达水平呈正相关性.结论:乳腺癌组织中EphA2蛋白的表达水平上调并与细胞焦亡呈负相关性;DNMT3a可能参与了 EphA2基因启动子区发生DNA低甲基化的过程.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
胆管癌和胆总管结石患者胆汁中钙卫蛋白检测的临床意义
编辑人员丨5天前
目的 探讨胆管癌和胆总管结石患者胆汁中钙卫蛋白水平的差异.方法 收集2021年5月—2022年9月安徽医科大学第一附属医院行ERCP诊治的胆管癌(n=34)和胆总管结石(n=78)患者的临床资料和胆汁标本.采用荧光免疫层析法检测胆汁中钙卫蛋白、血红蛋白和乳铁蛋白水平.计量资料两组间比较采用Mann-Whitney U检验;计数资料两组间比较采用χ2检验;相关分析采用Spearman相关性检验;DeLong检验比较不同受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积(AUC)的差异.结果 与胆总管结石组比较,胆管癌患者胆汁中钙卫蛋白水平升高[4795.50(2286.79~20179.73)ng/mL vs 411.16(67.03~1991.88)ng/mL,Z=5.572,P<0.001],同时氯化物水平升高[115.70(109.10~125.50)mmol/L vs 106.60(98.60~114.40)mmol/L,Z=2.702,P=0.007].进一步将胆管癌分为高位胆管癌和低位胆管癌,两组钙卫蛋白比较差异无统计学意义[3867.71(2235.66~26407.40)ng/mL vs 4795.50(2361.15~13070.53)ng/mL,Z=0.129,P>0.05].胆汁钙卫蛋白水平与胆汁白细胞计数、血红蛋白、乳铁蛋白水平具有相关性(r值分别为0.316、0.353、0.464,P值均<0.05).ROC曲线结果示胆汁钙卫蛋白(敏感度79.4%,特异度75.6%)、血CA19-9水平(敏感度82.4%,特异度78.2%)以及两者联合(敏感度88.2%,特异度73.1%)对诊断胆管癌具有良好的敏感性和特异性.结论 胆管癌患者胆汁中钙卫蛋白水平升高,可能成为胆管癌诊断的生物标志物.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
自身炎症和PLCγ2相关的抗体缺乏和免疫失调
编辑人员丨5天前
自身炎症和磷脂酶Cγ2(PLCγ2)相关的抗体缺乏和免疫失调(APLAID)是一种由PL-CG2基因突变引起的罕见自身炎症性疾病(AIDs),其临床特点复杂多样,多不具有特异性,发病机制尚未达成统一共识,临床工作中难以鉴别,明确诊断往往需要综合病史、临床表现和基因检测等多方面分析.本文就APLAID的发病机制与临床表型进行综述,以期为APLAID的诊断和治疗提供参考.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
全身免疫炎症指数联合外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值、D-二聚体/纤维蛋原比值检测对急性胰腺炎患者预后评估价值
编辑人员丨5天前
目的 探讨全身免疫炎症指数(SII)联合外周血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、D-二聚体/纤维蛋白原比值(DFR)检测对急性胰腺炎(AP)患者预后的评估价值.方法 选取重庆松山医院自2020 年3 月至2023 年3 月收治的99 例AP患者为研究对象.根据病情严重程度将患者分为轻症组(n =42)、中重症组(n =31)、重症组(n =26).根据预后情况将患者分为存活组(n =92)与死亡组(n =7).比较不同病情严重程度与不同预后AP患者的SII、NLR、DFR.使用Spearman相关性分析评估SII、NLR、DFR与病情严重程度的相关性.采用受试者工作特征曲线(ROC)评估SII、NLR、DFR对AP预后的预测效能.采用Pearson相关性分析检验SII、NLR、DFR与血糖、血钙的相关性.结果 中重症组、重症组患者SII、NLR、DFR均高于轻症组,差异均有统计学意义(P<0.05);重症组患者 SII、NLR、DFR均高于中重症组,差异均有统计学意义(P<0.05).Spearman相关性分析结果显示,SII、NLR、DFR均与病情严重程度呈正相关关系(r =0.473、0.467、0.480,P<0.05).存活组患者SII、NLR、DFR均低于死亡组,差异均有统计学意义(P<0.05).SII、NLR、DFR三者联合对AP预后的预测效能最高,ROC曲线下面积为0.916、敏感性为85.71%、特异性为89.13%.Pearson相关性分析结果显示,SII、NLR、DFR与血糖呈正相关关系(r =0.437、0.390、0.435,P<0.05),与血钙呈负相关关系(r =-0.445、-0.388、-0.450,P<0.05).结论SII联合外周血NLR、DFR对AP预后具有较高的预测价值.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
泛素特异性蛋白酶13(USP13)敲除对对乙酰氨基酚诱导的肝脏炎性应激反应的影响
编辑人员丨5天前
目的 研究泛素特异性蛋白酶 13(ubiquitin-specific protease 13,USP13)在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的肝脏炎性应激反应中的作用.方法 将Usp13+/+小鼠和Usp13-/-小鼠均设置为对照组(CON,APAP 0 h)和 3个实验组(APAP 2 h、APAP 4 h和APAP 12 h),每组 6 对小鼠;饥饿 18 h后实验组小鼠腹腔注射 300 mg/kg APAP建立肝脏炎性应激反应模型,分别于 2、4、12 h 收集小鼠肝脏组织和血清;对照组在 0 h收集小鼠肝脏组织和血清.HE染色观察肝脏组织病理变化;免疫组化观察肝脏组织中炎性细胞浸润情况;ELISA检测血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;Western blot检测肝脏细胞色素P450 2E1(cytochrome p450 2E1,CYP2E1)蛋白表达和谷胱甘肽(glutathione,GSH)试剂盒检测肝脏GSH变化水平;Western blot检测c-Jun N端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路的激活情况;qPCR检测炎性因子相关基因的转录水平表达.结果 与对照组相比,APAP 2 h和 4 h组小鼠肝脏CYP2E1 蛋白表达无明显变化、GSH显著下降(P<0.0001)、JNK通路激活和炎症因子表达升高(P<0.001).与对照组相比,APAP 12 h组小鼠肝脏发生明显坏死,F4/80+细胞数量增加(P<0.001)、Ly6G+细胞数量增加(P<0.01)以及血清ALT、AST水平升高(P<0.01).但与Usp13+/+小鼠相比,Usp13敲除对APAP诱导肝脏炎性应激反应的病理生理过程并无明显影响.结论 USP13 缺失不影响 APAP 诱导的肝脏炎性应激反应过程中的各种病理生理过程,这不同于USP13 参与多种肝脏疾病发生发展的报道,提示USP13 在肝脏疾病作用的复杂性.[营养学报,2024,46(1):56-61]
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
系统性免疫炎症指数与肾癌患者临床特征及预后相关性
编辑人员丨5天前
目的 探讨系统性免疫炎症指数(SII)与肾癌患者临床特征及预后的相关性.方法 回顾性分析自2008 年9 月至2013 年12 月四川大学华西医院收治的 1 030 例肾癌患者的临床资料.根据中位SII,将患者分为高SII组(n =515,SII≥381.17)与低SII组(n =515,SII<381.17).比较两组患者主要临床特征.采用Peason线性相关性分析SII与肿瘤大小的相关性.采用受试者工作特征(ROC)曲线评价SII对肾癌患者淋巴结转移的预测价值.采用Kaplan-Meier检验分析两组患者无病生存期、肿瘤特异性生存率、总生存率.结果 两组患者手术切除范围、肿瘤大小、T分期、淋巴结转移、Fuhrman分级、血红蛋白、白细胞、单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、血小板、SII比较,差异均有统计学意义(P<0.05).Peason线性相关性分析显示,SII与肿瘤大小呈正相关(r =0.204,P<0.001).SII预测肾癌患者淋巴结转移的ROC曲线下面积为 0.739(95%可信区间0.658~0.820,P<0.001).与低SII组比较,高SII组患者无病生存期、肿瘤特异性生存率、总生存率均显著降低,差异有统计学意义(P<0.001).结论 肾癌患者术前SII水平增高与肿瘤大小、T分期、淋巴结转移、Fuhrman分级等有关,是预后不良的独立预测指标.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
去泛素连接酶USP9X通过调控FOXM1介导糖酵解影响鼻咽癌细胞增殖的机制研究
编辑人员丨5天前
目的:探讨去泛素连接酶USP9X(deubiquitin ligase 9X)是否通过调控叉头框蛋白M1(forkhead box M1,FOXM1)介导糖酵解从而影响鼻咽癌细胞的增殖能力.方法:采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测鼻咽癌组织和正常鼻黏膜组织以及鼻咽癌细胞中USP9X mRNA和蛋白的表达情况.通过病毒感染的方法将携带有特异性针对USP9X基因的shRNA(shUSP9X)和携带有USP9X全基因的重组质粒Flag-USP9X(过表达USP9X)分别转入鼻咽癌CNE2和HNE2细胞,采用CCK-8法检测沉默或过表达USP9X基因对鼻咽癌细胞增殖的影响,通过对细胞能量代谢和细胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR)的检测分析对鼻咽癌细胞糖酵解能力的影响.通过ubibrowser_v3/数据库、免疫共沉淀和ZDOCK软件分析USP9X与FOXM1蛋白的结合情况,并通过泛素化实验观察沉默USP9X对FOXM1蛋白泛素化水平的影响;随后进一步通过实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测对FOXM1 mRNA和蛋白表达的影响.最后,采用慢病毒感染的方法在沉默USP9X表达的CNE2细胞中同时转入重组载体Flag-FOXM1恢复FOXM1的表达,再通过CCK-8法、细胞能量代谢和ECAR检测分析上调FOXM1对CNE2细胞增殖和糖酵解能力的影响.结果:与正常鼻黏膜组织相比,鼻咽癌组织中USP9X mRNA和蛋白的表达水平均显著提高(P均<0.05).下调鼻咽癌CNE2细胞中USP9X的表达水平后,CCK-8法、细胞能量代谢检测和ECAR实验检测发现,CNE2细胞的增殖和糖酵解能力均被明显抑制(P均<0.05).相反,上调HNE2细胞中USP9X的表达水平后,HNE2细胞的增殖和糖酵解能力均被明显提高(P均<0.05).通过ubibrowser_v3/数据库、免疫共沉淀和ZDOCK软件证实,USP9X与FOXM1蛋白存在相互结合的关系,CNE2细胞中沉默USP9X表达水平可显著增加FOXM1的泛素化水平.在低表达USP9X的CNE2细胞中过表达FOXM1可恢复鼻咽癌细胞的增殖和糖酵解能力(P均<0.05).结论:去泛素连接酶USP9X通过抑制FOXM1泛素化降解进而提高鼻咽癌细胞的糖酵解能力,最终促进鼻咽癌细胞的增殖.USP9X可能是鼻咽癌治疗上一个潜在的新靶点.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
去线性泛素化酶OTULIN促进胃癌细胞的有氧糖酵解及增殖
编辑人员丨5天前
目的:检测去泛素化酶卵巢肿瘤(ovarian tumor,OUT)结构域线性链接 特异性(OUT domain deubiquitinase with linear linkage specificity,OTULIN)在胃癌组织中的表达情况,并探讨敲除OTULIN基因表达对胃癌MKN45和AGS细胞增殖的影响,及可能的作用机制.方法:采用免疫组织化学法检测73例胃癌组织与24例正常胃黏膜组织中OTULIN的表达水平,分析OTULIN表达与胃癌临床病理特征和患者预后的相关性.收集并分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus database,GEO)中的胃癌数据验证上述结论.采用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建敲除OTULIN表达的胃癌MKN45和AGS细胞并用蛋白质印迹法检测基因敲除效率;采用CCK-8法和软琼脂克隆检测敲除OTULIN表达对MKN45和AGS细胞增殖的影响.蛋白免疫沉淀-质谱技术筛选OTULIN和线性泛素分子(INT-Ub.7KR)的共同互作蛋白,发现线性泛素化修饰底物蛋白.利用丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性试剂盒检测敲除OTULIN表达后糖酵解限速酶的活性变化,乳酸定量试剂盒检测乳酸生成情况.最后采用免疫共沉淀及蛋白质印迹法验证OTULIN对底物蛋白线性泛素化作用.结果:免疫组织化学法检测结果显示,OTULIN在胃癌组织中的表达水平明显高于正常胃黏膜组织(P=0.004 1),肿瘤组织中OTULIN高表达者生存期较短(P=0.007 7).TCGA和GEO数据库数据分析也显示胃癌组织OTULIN表达水平升高(P<0.05),且OTULIN高表达与患者不良预后相关(P=0.011).统计结果显示,OTULIN高表达与TNM分期晚密切相关(P=0.027 3),预测患者较短生存期(P=0.04).敲除OTULIN基因可显著抑制胃癌细胞的增殖能力(P均<0.001),降低胃癌细胞中PK活性和乳酸生成水平(P均<0.01).OTULIN可结合糖酵解途径的多个限速酶并下调它们的线性泛素化水平,包括丙酮酸激酶M1(pyruvate kinase M1,PKM1)和 PKM2 以及乳酸脱氢酶 A(lactate dehydrogenase A,LDHA)和 LDHB.结论:胃癌中OTULIN高表达可能是评估患者预后的一个新的生物标志物,OTULIN可能通过下调糖酵解限速酶的线性泛素化修饰,激活胃癌糖酵解途径,促进胃癌发展.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前
-
CRISPR/Cas系统在核酸检测中的应用和挑战
编辑人员丨5天前
成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)/CRISPR相关基因(Cas)系统是古菌和细菌适应性免疫系统,最初被发现用来进行基因编辑,近年其特异识别和切割特性以及可编程性使其在核酸和非核酸靶标检测中崭露头角.目前基于CRISPR/Cas系统的核酸检测系统主要与核酸扩增技术如PCR、链置换扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)和EXPAR等恒温扩增技术结合,以提高灵敏度;多项研究也在尝试开发基于CRISPR/Cas的无预扩增核酸检测系统;另外也有研究尝试通过生物祖体(包括适体、DNAzymes和抗原-抗体反应)特异性识别靶物质实现非核酸信号转换为核酸信号,实现基于CRISPR/Cas的蛋白质、小分子、细胞等非核酸物质的检测.但仍存在一些挑战,其中目标中痕量原始浓度的信号转换和放大是分析系统的关键挑战;其他挑战包括CRISPR/Cas存在一定背景活性,CRISPR RNA和单链DNA/单链RNA信号报告序列有降解风险等.随着技术的逐渐成熟,CRISPR/Cas系统将在生物靶标检测中发挥更大作用.本文就CRISPR/Cas系统在核酸检测这一领域的最新发展方向作一述评.
...不再出现此类内容
编辑人员丨5天前