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去泛素连接酶USP9X通过调控FOXM1介导糖酵解影响鼻咽癌细胞增殖的机制研究
编辑人员丨2周前
目的:探讨去泛素连接酶USP9X(deubiquitin ligase 9X)是否通过调控叉头框蛋白M1(forkhead box M1,FOXM1)介导糖酵解从而影响鼻咽癌细胞的增殖能力.方法:采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测鼻咽癌组织和正常鼻黏膜组织以及鼻咽癌细胞中USP9X mRNA和蛋白的表达情况.通过病毒感染的方法将携带有特异性针对USP9X基因的shRNA(shUSP9X)和携带有USP9X全基因的重组质粒Flag-USP9X(过表达USP9X)分别转入鼻咽癌CNE2和HNE2细胞,采用CCK-8法检测沉默或过表达USP9X基因对鼻咽癌细胞增殖的影响,通过对细胞能量代谢和细胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR)的检测分析对鼻咽癌细胞糖酵解能力的影响.通过ubibrowser_v3/数据库、免疫共沉淀和ZDOCK软件分析USP9X与FOXM1蛋白的结合情况,并通过泛素化实验观察沉默USP9X对FOXM1蛋白泛素化水平的影响;随后进一步通过实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测对FOXM1 mRNA和蛋白表达的影响.最后,采用慢病毒感染的方法在沉默USP9X表达的CNE2细胞中同时转入重组载体Flag-FOXM1恢复FOXM1的表达,再通过CCK-8法、细胞能量代谢和ECAR检测分析上调FOXM1对CNE2细胞增殖和糖酵解能力的影响.结果:与正常鼻黏膜组织相比,鼻咽癌组织中USP9X mRNA和蛋白的表达水平均显著提高(P均<0.05).下调鼻咽癌CNE2细胞中USP9X的表达水平后,CCK-8法、细胞能量代谢检测和ECAR实验检测发现,CNE2细胞的增殖和糖酵解能力均被明显抑制(P均<0.05).相反,上调HNE2细胞中USP9X的表达水平后,HNE2细胞的增殖和糖酵解能力均被明显提高(P均<0.05).通过ubibrowser_v3/数据库、免疫共沉淀和ZDOCK软件证实,USP9X与FOXM1蛋白存在相互结合的关系,CNE2细胞中沉默USP9X表达水平可显著增加FOXM1的泛素化水平.在低表达USP9X的CNE2细胞中过表达FOXM1可恢复鼻咽癌细胞的增殖和糖酵解能力(P均<0.05).结论:去泛素连接酶USP9X通过抑制FOXM1泛素化降解进而提高鼻咽癌细胞的糖酵解能力,最终促进鼻咽癌细胞的增殖.USP9X可能是鼻咽癌治疗上一个潜在的新靶点.
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编辑人员丨2周前
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脑胶质瘤组织去泛素化酶USP9X表达水平与病人生存预后的关系
编辑人员丨2周前
目的 探讨脑胶质瘤组织去泛素化酶USP9X表达水平与病人生存预后的关系.方法 选取2016年6月至2018年6月手术切除的108例脑胶质瘤组织标本和25例颅内减压术中切除的正常脑组织为对照,免疫组织化学染色法检测组织USP9X蛋白表达水平,根据染色强度评分和阳性细胞比例评分≥4分定为高表达.随访截止2023年5月,计算总体生存时间.结果 108例胶质瘤中,WHO分级Ⅱ级38例,Ⅲ级46例,Ⅳ级24例.WHO分级Ⅳ级(79.17%)、Ⅲ级(58.69%)、Ⅱ级(39.47%)脑胶质瘤组织USP9X高表达率均明显高于正常脑组织(24.00%,P<0.05),并且WHO分级越高,USP9X高表达率越高(P<0.05).随访期间,失访8例,死亡68例(高表达组51例,低表达组17例).多因素Cox比例回归风险模型分析结果显示USP9X高表达是脑胶质瘤不良生存预后的独立危险因素(OR=2.173;95%CI 1.412~5.572;P<0.001),生存曲线分析显示USP9X高表达病人的中位总体生存期较低表达病人明显缩短(P<0.05).结论 脑胶质瘤组织USP9X呈高表达,与病人不良生存预后有关.
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编辑人员丨2周前
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去泛素化酶USP9X促进消化系统肿瘤进展的研究现状
编辑人员丨2023/8/6
去泛素化酶9X(USP9X)是去泛素化酶(DUBs)中的一员.USP9X是X染色体连锁的泛素特异性蛋白酶(USPs),可以通过稳定不同的底物,发挥相应的生物学效应.USP9X在信号通路转导、细胞生长及迁移、免疫应答、干细胞的自我更新及分化、神经系统功能以及肿瘤发生发展进程中均起着重要作用.因其在消化道肿瘤发生发展中的重要作用以及作为药物靶点的可行性,本文综述了USP9X在常见的消化系统恶性肿瘤发生发展中作用的研究进展.
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编辑人员丨2023/8/6
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去泛素化酶USP9X在结肠癌组织中的表达及意义
编辑人员丨2023/8/6
目的:探讨去泛素化酶USP9X在结肠癌组织中的表达特点及对结肠癌细胞增殖的影响.方法:收集解放军中部战区总医院病理科存档的结肠癌组织标本和癌旁正常结肠组织标本76例,免疫组化法检测USP9X在不同性别、年龄患者的结肠癌组织、癌旁正常结肠组织中的表达情况.siRNA抑制人结肠癌HCT116细胞株USP9X的表达,MTY法检测HCT116细胞增殖能力.结果:76例结肠癌患者中,USP9X阳性表达53例,占69.7%.癌旁正常大肠组织中,USP9X阳性表达率19.7%.USP9X的表达与结肠癌淋巴结转移和浸润深度相关.siRNA抑制结肠癌HCT116细胞USP9X表达后,与空白对照组和阴性对照组比较,干扰组细胞增殖能力显著下降.结论:去泛素化酶USP9X在结肠癌组织中的表达高于癌旁正常结肠组织,并与肿瘤侵袭转移相关.特异性抑制USP9X基因的表达可抑制结肠癌细胞的增殖能力.
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编辑人员丨2023/8/6