-
环状RNA锌指蛋白652靶向微小RNA-1278调控叉头盒P1蛋白表达对食管鳞状细胞癌细胞存活的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨环状RNA锌指蛋白652(circZNF652)/微小RNA(miR)-1278/叉头盒P1蛋白(FOXP1)轴对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞活性、增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测circZNF652、miR-1278以及FOXP1 mRNA表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞活性;EdU实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭;蛋白质印迹法(Western blot)实验检测FOXP1蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验和RNA免疫共沉淀(RIP)实验验证circZNF652与miR-1278之间的靶向关系,以及miR-1278与FOXP1之间的靶向关系。以 t检验或单因素方差分析进行统计分析。 结果:ESCC细胞系KYSE-510和TE-10中circZNF652、FOXP1 mRNA和蛋白表达高于正常食管上皮细胞HEEC(3.37±0.24比1.97±0.06、4.38±0.29比2.88±0.12、2.95±0.25比1.48±0.12),差异有统计学意义( F=209.4、267.3、75.5, P<0.05),而KYSE-510和TE-10中miR-1278表达低于HEEC(0.47±0.06比0.71±0.03),差异有统计学意义( F=152.5, P<0.05)。circZNF652小干扰RNA(si-circZNF652)组的细胞活性、增殖和侵袭能力低于阴性对照小干扰RNA(si-NC)组,差异有统计学意义(0.44±0.04比0.71±0.03、0.50±0.04比1.05±0.05、0.46±0.05比1.01±0.07),差异有统计学意义( F=1.5、1.3、2.1, P<0.05);而si-circZNF652组的细胞凋亡率高于si-NC组[(30.2±0.28)%比(5.20±1.27)%],差异有统计学意义( F=2.3, P<0.05)。miR-1278拮抗剂(抗miR-1278)组的细胞活性、增殖和侵袭能力高于阴性对照拮抗剂(抗NC)组(1.02±0.03比0.71±0.03、1.38±0.04比1.04±0.05、1.51±0.06比0.99±0.04),差异有统计学意义( F=484.1、306.1、190.6, P<0.05),而si-circZNF652+抗miR-1278组的细胞活性、增殖和侵袭能力高于si-circZNF652+抗NC组(0.57±0.02比0.35±0.02、0.89±0.04比0.49±0.02、0.88±0.04比0.52±0.06),差异有统计学意义( F=484.1、306.1、190.6, P<0.05)。miR-1278 mimic+FOXP1过表达(OE-FOXP1)组的细胞活性、增殖和侵袭能力高于miR-1278 mimic+FOXP1过表达阴性对照(OE-NC)组(0.52±0.07比0.23±0.04、0.92±0.03比0.46±0.05、0.91±0.05比0.53±0.04),差异有统计学意义( F=35.9、242.7、237.5, P<0.05),但miR-1278 mimic+OE-FOXP1组的细胞凋亡率低于miR-1278 mimic+OE-NC组(17.35±1.77比33.95±4.88),差异有统计学意义( F=66.1, P<0.05)。 结论:circZNF652通过抑制miR-1278提高FOXP1的表达,进而促进ESCC细胞增殖和侵袭能力,并降低细胞凋亡率。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
一例晚发X-连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征患儿的临床及遗传学研究
编辑人员丨6天前
目的:探讨1例晚发X-连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征(immune dysregulation,polyendocrinopathy,enteropathy,X-linked syndrome,IPEX)患儿的临床特点、基因变异情况。方法:分析1例IPEX综合征患儿的临床资料、实验室检查、基因变异位点及治疗情况。结果:患儿为男性,3岁因顽固性腹泻、反复感染、肝功能不全、生长发育迟缓就诊,不伴糖尿病和皮肤疾病。实验室检查显示肝酶和总IgE升高、白蛋白降低及电解质紊乱;胃肠镜检查发现十二指肠黏膜糜烂和细颗粒样改变,回肠末端和结肠黏膜水肿,活检示十二指肠和回肠末端绒毛萎缩。基因检测发现, FOXP3基因第10外显子编码区存在1个c.1087A>G错义变异,导致氨基酸p.I363V改变。 结论:IPEX综合征通常在婴儿期起病,但临床表现多样,不应仅根据年龄排除诊断。对于患有难治性腹泻、自身免疫性疾病和生长迟缓的男性患儿,需警惕IPEX综合征,基因检测分析有利于早期诊断及治疗。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
Notch1信号对儿童急性B前体淋巴细胞白血病Foxp3组蛋白乙酰化的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨Notch1信号对儿童急性B前体淋巴细胞白血病(BCP-ALL)Foxp3基因组蛋白乙酰化的影响及其在调节性T细胞(Treg)异常机制中的作用。方法:初诊治疗前的急性BCP-ALL患儿38例,同年龄健康对照儿童15例,分别取血备检。采用流式细胞术检测外周血CD4 +CD25 hiFoxp3 + Treg细胞比例及Foxp3、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4,CTLA4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(glucocorticoid-induced tumor necrosis factorreceptor,GITR)、CD39、Notch1蛋白表达水平;染色质免疫共沉淀技术检测CD4 +T细胞Foxp3基因启动子组蛋白H4乙酰化(H4Ac)及与Notch1受体胞内结合域(Notch1 intracellular domain,NICD1)、p300的结合水平;real-time PCR分析CD4 +T细胞Foxp3、早老素1(presenilin 1,PSEN1)、主导控制样蛋白1(mastermind-like transcriptional coactivator 1,MAML1)、SKI交互蛋白(SKI-interacting protein,SKIP)、F-Box和WD40蛋白7(F-box and WD40 domain protein 7,FBXW7)、糖原合成酶3β(glycogen synthase kinase-3 beta,GSK3β)、含锌指结构的转录因子(IKAROS)等mRNA表达水平;ELISA检测血浆中IL-10和TGF-β浓度。 结果:(1)与对照组比较,BCP-ALL患儿外周血CD4 +CD25 hiFoxp3 +Treg细胞比例、分化及功能相关分子(Foxp3、CTLA4、GITR、CD39)表达水平和血浆IL-10、TGF-β浓度显著增高( P<0.05)。(2)BCP-ALL患者Foxp3基因启动子H4Ac及与NICD1、p300的结合水平明显高于对照组( P<0.05),且与NICD1、p300的结合水平和Foxp3转录呈正相关( r=0.58和0.46, P<0.05)。经竞争性抑制后,BCP-ALL患儿前3项指标均低于未处理组( P<0.05);对照组Foxp3基因启动子与NICD1结合水平显著降低( P<0.05),而另2项指标与未处理对照组比较差异无统计学意义( P>0.05)。(3)与对照组比较,BCP-ALL患儿CD4 + T细胞Notch1、PSEN1、MAML1、SKIP表达水平显著升高( P<0.05),负性调节因子FBXW7表达明显降低( P<0.05),GSK3β、IKAROS表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:FBXW7表达低下所致Notch1信号过度活化可能是导致BCP-ALL患儿Foxp3基因启动子H4Ac及Treg异常的重要因素。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
轴突导向因子3A对脂多糖诱导的CD4 +CD25 +调节性T细胞稳定性的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨轴突导向因子3A(Sema3A)对脂多糖(LPS)诱导的CD4 +CD25 +调节性T细胞(Tregs)稳定性的作用及机制。 方法:采用体外免疫磁珠法分离和培养C57BL/6J小鼠脾脏CD4 +CD25 + Tregs,将分离的细胞按随机数字表法分为对照组(仅给予抗小鼠CD3e和CD28诱导细胞处于激活状态)、LPS组(在对照组的基础上给予LPS 100 μg/L)、LPS+核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)组(给予LPS 100 μg/L+PDTC 25 mg/L)、LPS+磷酸盐缓冲液(PBS)组(给予LPS 100 μg/L+PBS 10 μL)、LPS+PDTC+重组Sema3A(rSema3A)组(给予LPS 100 μg/L+PDTC 25 mg/L+rSema3A 300 μg/L)和LPS+PBS+rSema3A组(给予LPS 100 μg/L+PBS 10 μL+rSema3A 300 μg/L)。各组培养24 h后,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光法检测CD4 +CD25 + Tregs特异性标志物叉头翼状转录因子-3(Foxp-3)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)和膜相关转化型生长因子-β1(TGF-β1 m+)的基因及蛋白表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-10(IL-10)和分泌型转化生长因子-β1(sTGF-β1)的水平,采用免疫荧光法检测细胞凋亡,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测Foxp-3-Tregs特异性去甲基化区(Foxp-3-TSDR)的去甲基化程度,以反映CD4 +CD25 + Tregs的稳定性,采用电泳迁移率分析(EMSA)检测NF-κB信号通路的DNA结合活性,采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测NF-κB信号通路活性。 结果:与对照组比较,LPS能够增加细胞稳定性,表现为Foxp-3、CTLA-4和TGF-β1 m+的基因及蛋白表达上调,IL-10和sTGF-β1分泌增加,细胞凋亡减少,Foxp-3-TSDR去甲基化程度增加;同时LPS可增加细胞内NF-κB信号通路的DNA结合活性,以及主要分子NF-κB抑制蛋白激酶β(IKKβ)和p65的磷酸化水平,说明LPS增加细胞稳定性的机制与NF-κB信号通路有关。与LPS组比较,PBS并未对细胞稳定性和NF-κB信号通路产生影响;但添加rSema3A后能进一步增加细胞稳定性,并激活NF-κB信号通路。而PDTC能够抑制rSema3A增加细胞稳定性的功能,表现为:与LPS+PBS+rSema3A组比较,LPS+PDTC+rSema3A组Foxp-3、CTLA-4和TGF-β1 m+的基因及蛋白表达明显下调〔Foxp-3基因(2 -ΔΔCt):8.092±1.117比18.509±1.068,Foxp-3蛋白(相对荧光强度):1.224±0.033比1.826±0.181;CTLA-4基因(2 -ΔΔCt):3.254±0.760比11.840±0.827,CTLA-4蛋白(相对荧光强度):1.305±0.058比1.842±0.111;TGF-β1 m+基因(2 -ΔΔCt):3.589±1.180比8.509±0.472,TGF-β1 m+蛋白(相对荧光强度):1.319±0.033比1.822±0.063,均 P<0.01〕,IL-10和sTGF-β1分泌减少〔IL-10(ng/L):445.33±54.08比992.67±83.10,sTGF-β1(ng/L):1 116.67±65.25比1 494.67±94.45,均 P<0.01〕,细胞凋亡明显增加(荧光强度:0.398±0.031比0.268±0.046, P<0.01),Foxp-3-TSDR去甲基化程度明显降低(灰度值:0.467±0.048比1.780±0.119, P<0.01),NF-κB信号通路的DNA结合活性被明显抑制(灰度值:1.23±0.02比3.95±0.06, P<0.01),IKKβ和p65的磷酸化水平降低〔p-IKKβ表达(p-IKKβ/IKKβ):0.97±0.07比1.97±0.04,p-p65(p-p65/p65):0.95±0.08比1.93±0.06,均 P<0.01〕。 结论:LPS能通过NF-κB信号通路增加CD4 +CD25 + Tregs稳定性;Sema3A能够进一步增加CD4 +CD25 + Tregs稳定性,并且与NF-κB信号通路有关。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
叉头盒蛋白P3基因调控人结肠癌细胞生物学行为及其机制
编辑人员丨6天前
目的:探讨叉头盒蛋白P3(FOXP3)基因沉默后对人结肠癌细胞增殖、凋亡和侵袭等生物学行为的影响及其机制。方法:人结肠癌细胞(SW480细胞)购自美国典型培养物保藏中心。将SW480细胞分为FOXP3-小发夹核糖核酸(shRNA)组(转染FOXP3-shRNA)、NC-shRNA组(转染shRNA空载的慢病毒)及Control组(仅加入培养基处理)。噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测FOXP3基因信使核糖核酸(mRNA)表达;蛋白质印迹法检测Wingless及int-1家族成员3A(Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)基因蛋白表达。两组间对比行 t检验,多组间比较采用单因素方差分析(组间比较采用SNK检验)。 结果:FOXP3-shRNA组人结肠癌细胞中FOXP3基因mRNA表达、24、48、72、96 h后吸光度值、侵袭率、Wnt3a和β-catenin蛋白表达显著低于NC-shRNA组和Control组细胞[FOXP3基因mRNA表达分别为0.11±0.04比0.98±0.05、1.05±0.07,24 h吸光度值分别为0.59±0.04比0.65±0.05、0.73±0.06,48 h吸光度值分别为0.67±0.05比0.86±0.06、0.95±0.07,72 h吸光度值分别为0.76±0.06比1.15±0.07、1.26±0.08,96 h吸光度值分别为0.87±0.06比1.34±0.08、1.45±0.09,侵袭率分别为(23.49±1.99)%比(10.38±2.56)%、(10.38±2.56)%,Wnt3a分别为0.22±0.04比0.76±0.05、0.78±0.06,β-catenin分别为0.31±0.03、0.84±0.06、0.87±0.07],凋亡率显著高于NC-shRNA组和Control组细胞[分别为(23.49±1.99)%比(10.38±2.56)%、(10.38±2.56)%],差异有统计学意义( F=20.042、17.233、11.145、13.427、16.538、16.135、54.182、19.341、26.177、16.135, P<0.05)。 结论:FOXP3基因沉默后可显著抑制人结肠癌细胞增殖和侵袭并促进细胞凋亡,其机制可能与调控Wnt/β-catenin信号通路基因表达有关。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
miRNA-5193对子宫颈癌Caski细胞顺铂敏感性的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨miRNA-5193(miR-5193)对子宫颈癌Caski细胞顺铂敏感性的影响和机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定子宫颈癌细胞株C33A、SiHa、Caski和正常子宫颈细胞株Ect1/E6E7中miR-5193的表达水平。将Caski细胞分成对照组(不转染,正常培养)、miR-5193阴性对照(miR-NC)组(转染miR-NC模拟物)、miR-5193组(转染miR-5193模拟物)、miR-NC+顺铂组(10 μg/ml顺铂处理转染miR-NC模拟物的细胞)、miR-5193+顺铂组(10 μg/ml顺铂处理转染miR-5193模拟物的细胞)、miR-5193+顺铂+NC组(10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3阴性对照载体、miR-5193模拟物的细胞)、miR-5193+顺铂+Foxp3组(10 μg/ml顺铂处理共转染Foxp3过表达载体和miR-5193模拟物的细胞)。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况;流式细胞术PI单染法检测细胞周期,Annexin V- FITC/PI双染法检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测细胞CDK2、p27、C-caspase-3蛋白表达。应用生物信息学软件预测miR-5193靶基因,采用荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。结果:子宫颈癌C33A、SiHa、Caski细胞中miR-5193相对表达量均低于正常子宫颈Ect1/E6E7细胞(0.56±0.06、0.41±0.03、0.23±0.02比1.00±0.10,均 P<0.05)。与对照组、miR-NC组比较,miR-5193组、miR-NC+顺铂组、miR-5193+顺铂组细胞增殖活性(吸光度值)降低(0.58±0.06、0.59±0.07比0.38±0.04、0.40±0.05、0.23±0.02,均 P<0.05),细胞凋亡率升高[(2.5±0.2)%、(2.7±0.3)%比(12.6±1.2)%、(11.9±1.5)%、(18.9±1.7)%,均 P<0.05],G 0/G 1期细胞比例升高[(50.4±4.2)%、(51.3±6.3)%比(62.3±3.2)%、(61.9±5.8)%、(71.4±5.4)%,均 P<0.05],p27、C-caspase-3蛋白表达水平升高,CDK2蛋白表达水平下降。软件预测miR-5193靶基因为Foxp3,并由荧光素酶报告系统确认。与miR-5193+顺铂+NC组相比,miR-5193+顺铂+Foxp3组细胞增殖活性(吸光度值)升高(0.24±0.03比0.65±0.05, t=21.094, P<0.01),G 0/G 1期细胞比例降低[(71.0±6.4)%比(60.3±4.1)%, t=4.196, P<0.01],细胞凋亡率降低[(19.6±1.6)%比(11.5±1.2)%, t=11.880, P<0.01],细胞中p27、C-caspase-3蛋白表达水平下降,CDK2、Foxp3蛋白表达水平升高。 结论:体外miR-5193可能通过靶向抑制Foxp3基因提高子宫颈癌Caski细胞对顺铂的敏感性。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
Notch1信号调控调节性T细胞在川崎病中的作用
编辑人员丨6天前
目的:探讨Notch1信号对川崎病患儿调节性T细胞(Treg)的影响及在血管损伤机制中的作用。方法:以2019年3月至2021年6月收治的42例川崎病患儿为研究对象,分别于急性期及输注丙种球蛋白(IVIG)治疗后取样送检,对照组为32名同年龄健康儿童。采用流式细胞术检测外周静脉血CD4 +CD25 hiFoxp3 + Treg数量及叉头螺旋翼状转录因子(Foxp3)、细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)、Notch1蛋白表达水平;免疫共沉淀-定量PCR技术鉴定CD4 + T细胞Foxp3基因启动子组蛋白H4乙酰化(H4Ac)及Notch1受体胞内结合域1(NICD1)、重组信号结合蛋白J(RBP-J)、p300结合水平;荧光定量PCR分析早老素1(PSEN1)、主导控制样蛋白1(MAML1)、RBP-J和Foxp3 mRNA表达;ELISA检测血浆中IL-10、TGF-β蛋白浓度。采用 t检验、Pearson相关分析法进行统计分析。 结果:①与健康对照组相比,急性期川崎病患儿CD4 +CD25 hiFoxp3 + Treg比例显著降低[(4.3±1.5)%和(7.9±2.9)%; t=6.41, P<0.001],分化及功能相关分子(Foxp3、CTLA4、GITR)表达水平和血浆IL-10、TGF-β蛋白浓度明显下降( t=6.87, P<0.001; t=4.26, P<0.001; t=7.88, P<0.001; t=8.42, P<0.001; t=13.01, P<0.001),其中合并冠状动脉损伤组(CAL)前述6项指标低于无冠状动脉损伤组(NCAL)[ t=5.83, P<0.001; t=3.83, P<0.001; t=3.28, P=0.002; t=5.05, P<0.001; t=5.96, P<0.001; t=5.17, P<0.001],治疗后显著上调[ t=7.13, P<0.001; t=6.10, P<0.001; t=4.31, P<0.001; t=6.55, P<0.001; t=7.40, P<0.001; t=7.84, P<0.001]。②急性期川崎病患儿Foxp3基因启动子H4Ac修饰及NICD1、p300结合水平明显低于同年龄对照组( t=10.25, P<0.001; t=6.93, P<0.001; t=6.75, P<0.001),其中CAL组Foxp3基因启动子H4Ac及NICD1、p300结合水平低于NCAL组( t=6.08, P<0.001; t=2.66, P=0.011; t=6.02, P<0.001),治疗后明显上调( t=7.72, P<0.001; t=4.16, P<0.001; t=5.76, P<0.001)。Pearson相关分析显示Foxp3基因启动子H4Ac与其mRNA水平呈正相关( r=0.47, P<0.001)。各组间Foxp3/RBP-J结合水平略有改变,但差异无统计学意义( t=0.57, P>0.005; t=0.61, P>0.05; t=1.20, P>0.05)。③急性期川崎病患儿CD4 + T细胞表面Notch1受体蛋白及下游信号分子PSEN1、MAML1及RBP-J表达水平显著下调[ t=5.28, P<0.001; t=6.31, P<0.001; t=11.78, P<0.001; t=8.06, P<0.001],且CAL组前4项指标均低于NCAL组[ t=3.16, P=0.003; t=4.13, P<0.001; t=5.42, P<0.001; t=4.05, P<0.001],治疗后呈不同程度回调( t=4.77, P<0.001; t=6.43, P<0.001; t=11.95, P<0.001; t=7.79, P<0.001)。经体外重组人Jagged1蛋白刺激48 h后,川崎病患儿及对照组CD4 + T细胞Foxp3基因H4Ac及NICD1、p300结合水平明显高于未处理组[(川崎病: t=15.36, P<0.001; t=7.25, P<0.001; t=14.29, P<0.001),(对照组: t=7.87, P<0.001; t=5.71, P<0.001; t=8.74, P<0.001)],RBP-J结合水平差异无统计学意义(川崎病: t=1.11, P>0.05;对照组: t=1.37, P>0.05),但川崎病患儿Foxp3基因H4Ac及NICD1、p300结合水平仍低于对照组( t=3.86, P<0.001; t=3.42, P=0.001; t=2.85, P=0.006)。④经川崎病血清刺激健康儿童外周血PBMCs建立炎症细胞模型,IVIG干预组Treg比例、Foxp3表达水平及CD4 + T细胞Notch1、RBP-J表达水平明显高于未处理组( t=7.10, P<0.001; t=10.16, P<0.001; t=8.06, P<0.001; t=9.77, P<0.001),Foxp3基因启动子H4Ac及NICD1结合水平亦高于后者( t=7.24, P<0.001; t=8.24, P<0.001)。 结论:Notch1信号低下所致Treg数量不足及功能障碍可能是导致川崎病患儿免疫功能异常活化及血管损伤的重要因素之一。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
三例 FOXP1基因新发变异导致智力发育迟缓、语言障碍和自闭特征患儿的临床特征与遗传学分析
编辑人员丨6天前
目的:探讨3例 FOXP1基因新发变异导致智力发育迟缓、语言障碍和自闭特征患儿临床特点及遗传学基础。 方法:对患儿进行全面的临床资料收集,应用全外显子家系检测对患儿及父母行基因检测,并通过相关生物信息学预测分析变异的致病性。结果:3例患儿均有不同程度的智力障碍伴语言障碍、全面发育迟缓、行为异常及特殊面容等,其中2例出现自闭症谱系障碍症状。基因检测结果显示3例患儿 FOXP1基因均发生新发变异c.613_c.614delCTinsTA、c.1248delC及c.1393A>G,2例为移码变异及1例错义变异,经ACMG指南均评级为致病性。经查询数据库,c.613_c.614delCTinsTA及c.1248delC变异既往未见报道。 结论:在3个无关家庭中发现3例智力障碍伴语言障碍、全面发育迟缓、行为异常及特殊面容等症状患儿, FOXP1基因c.613_c.614delCTinsTA、c.1248delC及c.1393A>G可能是3例患儿的致病因素。本组病例进一步拓展了FOXP1缺陷综合征基因型-表型谱。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
胸腺增龄性萎缩与胸腺TECs内基因信使RNA表达相关性研究
编辑人员丨6天前
目的:探讨胸腺增龄性萎缩与胸腺上皮细胞(thymus epithelial cells,TECs)内参与胸腺发育KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6等基因表达的相关性。方法:将18只无特定病原体( specific pathogen free,SPF)小鼠按月龄分组,每组6只。无菌取胸腺,应用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,RT-PCR)检测TECs细胞中KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6等基因的表达。结果:小鼠TECs细胞中KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6基因表达在随着年龄增加而变化,3、10、16月龄的小鼠KGF表达量分别为(0.90±0.06), (0.58±0.07)和(0.18±0.07),差异具有统计学意义( P值分别为0.030,0.020,<0.001);Foxp3表达量分别为(0.93±0.10),(0.60±0.08)和(0.20±0.06),差异具有统计学意义( P值分别为0.020,0.020,<0.001);Foxn1表达量分别为(0.92±0.09), (0.63±0.09)和(0.16±0.08),差异具有统计学意义( P值分别为0.020,0.010,<0.001);IL-6表达量分别为(0.33±0.11), (0.46±0.06),(0.88±0.09),差异具有统计学意义( P值分别为0.052,0.001,<0.001)。同时,胸腺质量的增龄性减少与TECs细胞KGF、Foxp3、Foxn1和IL-6等表达相关性结果显示,小鼠TECs细胞KGF、Foxp3和Foxn1在mRNA水平表达与胸腺增龄性萎缩(胸腺质量)情况呈正相关(KGF: r=0.941, R2=0.886, P<0.001。Foxp3: r=0.939, R2=0.881, P<0.001。Foxn1: r=0.918, R2=0.842, P<0.001),而IL-6的mRNA表达与胸腺增龄性萎缩(胸腺质量)情况呈负相关( r=-0.866, R2=0.749, P<0.001)。 结论:胸腺基质微环境增龄性变化和胸腺发育关键基因表达增龄性改变是导致小鼠胸腺增龄性萎缩的主要原因,提示KGF、Foxp3和Foxn1等基因的时序性表达调节胸腺增龄性萎缩的进程。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
造血干细胞移植治疗以新生儿糖尿病起病的IPEX综合征:临床随访及文献复习
编辑人员丨6天前
收集并总结1例以糖尿病酮症酸中毒起病,遗传学检测明确为FOXP3突变的男性患儿的临床资料,分析经造血干细胞移植后18个月的随访结果和临床特点。患者男性,3岁5个月龄。5个月龄时因精神萎靡、呕吐症状就诊被诊断为糖尿病酮症酸中毒,继而出现严重腹泻、反复湿疹及肾病综合征,经遗传学检测明确为FOXP3基因突变引起的IPEX综合征。2018年8月于本院血液科行造血干细胞移植,术后随访18个月中,患者自身免疫受损状态得到改善,未再出现新的自身免疫性疾病,其血糖控制情况较移植前明显好转,胰岛素用量明显减少。
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前