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苦参碱调节RhoA-ROCK信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响
编辑人员丨5天前
目的 探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞 17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响.方法 建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg-1)组、苦参碱高剂量(200 mg·kg-1)组及苦参碱高剂量(200 mg·kg-1)+LPA组(10 mg·kg-1).超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素 17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素 1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心肌梗死情况;TUNEL染色进行心肌组织中细胞凋亡情况检测;试剂盒检测RhoA活性;Western Blot法进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子 2(Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1、ROCK2 蛋白表达水平检测.结果 与对照组比较,模型组心肌组织有大量蓝色胶原纤维沉积,左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2 表达水平明显升高,左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室缩短分数(left ventricular shortening fraction,LVFS)、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2 表达水平明显降低(P<0.05).与模型组比较,Matrine-L组、苦参碱高剂量组心肌组织蓝色胶原纤维逐渐减少,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL 阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA 活性、RhoA、ROCK1、ROCK2 表达水平依次明显降低,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2 表达水平依次明显升高(P<0.05).与苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+LPA组心肌组织蓝色胶原纤维增多,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL 阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA 活性、RhoA、ROCK1、ROCK2 表达水平明显升高,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2 表达水平明显降低(P<0.05).结论 苦参碱通过抑制 RhoA-ROCK信号通路调节Th17/Treg细胞平衡,改善冠心病大鼠心肌损伤.
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编辑人员丨5天前
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耐药结核病实验室诊断技术研究进展
编辑人员丨5天前
结核病(TB)是严重危害公众健康的全球性公共卫生问题.耐药结核病(DR-TB)是TB防治的重点和难点.目前,常用的体外药物敏感性试验方法包括表型药物敏感性检测技术和分子药物敏感性检测技术.表型药物敏感性检测技术包括固体药物敏感性试验、液体药物敏感性试验、最低抑菌浓度法,分子药物敏感性检测技术包括GeneXpert MTB/RIF、线性探针技术、基因芯片技术、荧光聚合酶链反应(PCR)熔解曲线法、FluoroType MTBDR、Xpert MTB/XDR、核酸质谱分析、全基因组测序技术.文章就表型药物敏感性检测和分子药物敏感性检测对DR-TB实验室诊断技术的研究进展进行综述,旨在为DR-TB的早期诊断提供参考.
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编辑人员丨5天前
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结直肠腺癌组织中tiRNA-1_33-Gly-GCC-1的表达及临床意义
编辑人员丨5天前
目的:研究结直肠腺癌(colorectal adenocarcinoma,CAC)组织中tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的表达及对细胞增殖的影响.方法:通过tRF&tiRNA芯片分析5 对CAC组织中tRFs&tiRNAs差异性表达谱并用qRT-PCR实验在82 对CAC组织中对tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的表达水平进行验证.采用RNA原位杂交技术(RISH)检测CAC组织中tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的阳性表达,并分析与患者临床特征和患者预后的关系.CCK-8 实验检测tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 对细胞增殖活性的影响.生物信息学预测并应用双荧光素酶报告实验验证tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 如何调控 TP53 I11.回复实验验证tiRNA-1_33-Gly-GCC-1/TP53I11 信号轴对CAC细胞增殖的影响.裸鼠荷瘤实验验证tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 对移植瘤生长和增殖的影响.结果:tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 在结直肠腺癌组织中表达水平升高并呈阳性表达,阳性例数54/82(65.85%)明显高于邻近正常组织 11/82(13.41%),两组间有统计学差异(χ2 =5.475,P =0.019<0.05).tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的阳性表达与CAC患者肿瘤直径(χ2 =11.699)、分化程度(χ2 =13.081)和患者生存预后(χ2 =15.621)密切相关(均P<0.05).CCK-8 实验结果显示tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 促进CAC细胞的增殖活性(P<0.05).生物信息学预测TP53I11是tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 的下游靶基因,双荧光素酶报告基因实验提示tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 与TP53I11 3'UTR结合从而抑制其蛋白质合成.Rescue回复实验进一步验证了tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 抑制TP53I11 mRNA和蛋白的表达及对大肠癌细胞增殖的促进作用.裸鼠皮下移植瘤实验也提示tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 促进了生长和增殖.结论:tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 在结直肠腺癌组织中表达水平上调,可能是一个新的促癌基因;机制上tiRNA-1_33-Gly-GCC-1 能抑制TP53I11 的表达而促进CAC细胞的增殖生长.本研究为今后结直肠腺癌诊治和预后判断提供新的理论基础.
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编辑人员丨5天前
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组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A抗体监测在肾移植术后急性及慢性排斥反应中意义
编辑人员丨5天前
目的 探讨组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A(MICA)抗体监测对肾移植术后急性及慢性排斥反应的预测价值.方法 选取新疆医科大学第一附属医院自2019 年1 月至2022 年8 月收治的96 例肾移植患者为研究对象.分别于肾移植术前及术后第1、3、6、12 个月,采用酶联免疫吸附法检测患者血清中MICA抗体.记录患者术后急性及慢性排斥反应发生情况.比较不同术后急性及慢性排斥反应发生情况患者血清MICA抗体阳性率.结果 96 例肾移植患者中,术前血清MICA抗体阳性率为14.58%(14/96);术后第12 个月,血清MICA抗体阳性率为25.00%(24/96).根据是否发生急性排斥反应将患者分为发生急性排斥反应组(n =12)与未发生急性排斥反应组(n =84).发生急性排斥反应组患者血清MICA抗体阳性率高于未发生急性排斥反应组,差异有统计学意义(P<0.05).根据是否发生慢性排斥反应将患者分为发生慢性排斥反应组(n =16)与未发生慢性排斥反应组(n =80).发生慢性排斥反应组患者的血清MICA抗体阳性率高于未发生慢性排斥反应组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 血清MICA抗体阳性的肾移植患者更容易发生急性及慢性排斥反应,术前积极检测血清MICA抗体并于术后对其进行动态监测可为急性及慢性排斥反应的预测提供重要参考信息.
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编辑人员丨5天前
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高黏液表型肺炎克雷伯菌的临床分布特征及毒力分析
编辑人员丨5天前
目的 分析医院临床分离的肺炎克雷伯菌的临床分布特征及毒力基因,为临床治疗及医院感染防控提供参考依据.方法 收集2022年1至12月宁波市医疗中心李惠利医院临床分离的96株对常规抗菌药物全敏感肺炎克雷伯菌,分析菌株的临床特征并检测其毒力基因.结果 96株全敏感肺炎克雷伯菌中,K1、K2、K57为主要荚膜血清型,ST23为主要流行的多位点序列分型表型,其次为ST25、ST86型;高黏液表型肺炎克雷伯菌的铁载体基因ybtS、菌毛定值与黏附基因ycfM以及pLVPK-like毒力质粒pagO基因的携带率均为100.00%,常见的毒力基因如荚膜多糖生成调节基因(rmpA),铁载体基因(irp-1、fyuA、irp-2、aerobactin、repA),菌毛定值与黏附基因(mrkD),脂多糖形成相关基因(wabG)及pLVPK-like毒力质粒相关基因(rmpA2、iroB、icuA、terB、sills)的携带率均高于非高黏液表型肺炎克雷伯菌,差异均有统计学意义(均P<0.05);另外,分离出33株pLVPK-like毒力质粒阳性肺炎克雷伯菌.结论 宁波市医疗中心李惠利医院高黏液表型全敏感肺炎克雷伯菌的毒力基因携带率较高,毒力质粒传播较为严重,提示宁波地区亟需关注医院感染防控,谨防全敏感肺炎克雷伯菌同时获得毒力质粒和耐药质粒成为"超级细菌",给临床治疗带来严峻挑战.
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编辑人员丨5天前
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基于基因检测和血药浓度监测技术优化肝移植术后他克莫司个体化给药方案
编辑人员丨5天前
他克莫司是广泛应用于临床的钙调神经磷酸酶类抑制剂,被作为肝移植术后预防和治疗急性排斥反应的一线药物.然而,在临床应用中,他克莫司表现出治疗窗口窄、药动学个体差异大等特点,移植后早期低浓度的他克莫司可能会诱发排斥反应;而高浓度的他克莫司可能会导致肾毒性和/或神经毒性,因此对于他克莫司药动学的影响因素进行深入研究至关重要.本文通过检索中国知网(CNKI)、维普、万方以及PubMed数据库,综述了临床上对患者实行基因检测和血药浓度监测的必要性,得出根据基因多态性进行给药以及寻找替代药时曲线下面积的最佳采样点策略可能将有助于临床医生对他克莫司的最佳起始剂量进行预测,进而帮助调整维持方案,且有望减少不良反应的发生.
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编辑人员丨5天前
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miR-340-5p靶向调控ARID1A对甲状腺癌活性、迁移和侵袭的影响
编辑人员丨5天前
目的 探讨miR-340-5p靶向调控富含AT的相互作用结构域(ARID)1A对甲状腺癌活性、迁移和侵袭的影响.方法 通过实时荧光定-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western印迹检测miR-340-5p和ARID1A在甲状腺癌细胞中表达水平.通过噻唑蓝(MTT)和Transwell实验检测转染miR-340-5p抑制物后癌细胞活性、迁移和侵袭变化.双荧光素酶报告基因检测miR-340-5p和ARID1A的靶向结合关系.最后通过同时敲低miR-340-5p和ARID1A的回复实验验证miR-340-5p调控ARID1A影响癌症发展.结果 miR-340-5p在甲状腺癌细胞中明显高表达,ARID1A表达明显较低(P<0.05).通过抑制BC-PAP细胞中miR-340-5p表达明显减少了癌细胞活性、迁移和侵袭水平.miR-340-5p和ARID1A具有直接靶向结合关系.敲降ARID 1A能够明显逆转miR-340-5p抑制物对BCPAP细胞活性、迁移和侵袭的抑制作用.结论 miR-340-5p是甲状腺癌中的促癌基因,ARID1A为miR-340-5p的靶标下游,miR-340-5p通过靶向调控ARID 1A促进甲状腺癌细胞活性、迁移和侵袭.
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编辑人员丨5天前
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浸润性乳腺癌中EphA2基因启动子区DNA低甲基化及与细胞焦亡的相关性
编辑人员丨5天前
目的:探讨浸润性乳腺癌中肝配蛋白A型受体2(ephrin A receptor 2,EphA2)表达及其启动子区DNA低甲基化与细胞焦亡发生的相关性.方法:应用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检测42例乳腺癌患者正常乳腺组织、癌旁组织和癌组织中EphA2的表达情况;采用免疫荧光技术和蛋白质印迹法检验细胞焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)的表达水平;采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase 1和炎性细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达水平;应用巢氏甲基化特异性 PCR(nested methylation-specific PCR,nMS-PCR)检验EphA2基因启动子区DNA甲基化水平;采用蛋白质印迹法测验DNA甲基转移酶 1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)和 DNA 甲基转移酶 3a(DNA methyltransferase 3a,DNMT3a)蛋白表达水平;应用Pearson相关系数分别对患者癌组织中EphA2的蛋白表达和甲基化水平与NLRP3、Caspase 1、IL-1β、DNMT1和DNMT3a进行相关性分析.结果:与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组中EphA2蛋白表达水平明显升高(P均<0.01),NLRP3、Caspase 1和IL-1β的蛋白表达水平明显降低(P均<0.05);同时与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组织中EphA2基因启动子区DNA甲基化水平明显降低(P均<0.05),DNMT3a蛋白表达明显降低(P<0.01,P<0.05),而DNMT1蛋白表达的差异未有统计学意义;Pearson相关性分析结果显示,EphA2蛋白与NLRP3 蛋白(r=-0.651 2,P<0.05)、Caspase 1 蛋白(r=-0.571 2,P<0.05)、IL-1 蛋白(r=-0.654 6,P<0.05)和 DNMT3a 蛋白(r=-0.537 4,P<0.05)的表达水平均呈负相关性;而EphA2基因的甲基化水平与 NLRP3 蛋白(r=0.634 1,P=0.026 8)、Caspase 1 蛋白(r=0.672 8,P=0.016 5)、IL-1β 蛋白(r=0.694 0,P=0.012 3)和 DNMT3a 蛋白(r=0.687 1,P=0.013 6)的表达水平呈正相关性.结论:乳腺癌组织中EphA2蛋白的表达水平上调并与细胞焦亡呈负相关性;DNMT3a可能参与了 EphA2基因启动子区发生DNA低甲基化的过程.
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编辑人员丨5天前
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败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭
编辑人员丨5天前
目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制.方法:收集2019 年2月至2020 年1 月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31 例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665 的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936 和miR-665 表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229 细胞,si-NC、si-circ_0000936 分别转染至 LN229 细胞,pcDNA-circ_0000936 转染至LN229 细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936 与miR-665 的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2 蛋白表达量.结果:胶质瘤组织中circ_0000936 的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665 的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936 和miR-665 呈负相关(r =-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2 蛋白水平和circ_0000936 的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665 的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936 后miR-665 的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2 蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936 能够逆转败酱草对LN229 细胞生物学行为的作用.结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665 诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭.
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编辑人员丨5天前
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自身炎症和PLCγ2相关的抗体缺乏和免疫失调
编辑人员丨5天前
自身炎症和磷脂酶Cγ2(PLCγ2)相关的抗体缺乏和免疫失调(APLAID)是一种由PL-CG2基因突变引起的罕见自身炎症性疾病(AIDs),其临床特点复杂多样,多不具有特异性,发病机制尚未达成统一共识,临床工作中难以鉴别,明确诊断往往需要综合病史、临床表现和基因检测等多方面分析.本文就APLAID的发病机制与临床表型进行综述,以期为APLAID的诊断和治疗提供参考.
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编辑人员丨5天前