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RP-HPLC同时测定沙那制剂不同剂型中没食子酸等5种活性成分含量
编辑人员丨6天前
目的:建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定沙那制剂中没食子酸、没食子酸甲酯、柯里拉京、番泻苷B和番泻苷A含量的方法。方法:2021年1-12月,采用Phenomenex Hydro-RP 80A色谱柱(4.60 mm × 250 mm,4 μm),流动相为甲醇(A)-0.2%甲酸(B),梯度洗脱:0~18 min,1%~3%A;18~19 min,3%~15%A;19~40 min,15%~17%A;40~45 min,17%~25%A;45~65 min,25%~35%A;65~95 min,35%~60%A;95~96 min,60%~90%A;96~97 min;90%~1%A,流速:1.0 mL/min,柱温:35 ℃,检测波长270 nm。结果:没食子酸、没食子酸甲酯、柯里拉京、番泻苷B和番泻苷A的线性范围分别为0.182~1.099 μg( r=0.999 9),0.046~0.278 μg( r=0.999 2),0.266~1.598 μg( r=0.999 4),0.172~1.036 μg( r=0.999 2),0.176~1.056 μg( r=0.999 9);平均加样回收率分别为100.02%、99.14%、99.38%、101.77%、100.92%。 结论:该方法准确、灵敏、可靠、重复性好,可用于沙那制剂的质量控制研究。
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编辑人员丨6天前
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番泻苷B通过Wnt/β-catenin通路抑制视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞增殖、凋亡和侵袭
编辑人员丨2周前
目的 探究番泻苷B对视网膜母细胞瘤HXO-Rb44 细胞增殖、凋亡、侵袭及Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法 通过采用不同剂量(0、5、10、20 μmol/L)番泻苷B处理HXO-Rb44 细胞,将细胞随机分为4 组:Control组,番泻苷B 5、10、20 μmol/L组.MTT法检测细胞活力;克隆形成实验检测克隆形成率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Transwell检测侵袭细胞数;细胞成球实验检测细胞成球直径和细胞成球数目;蛋白质印迹检测 cleaved caspase-3、caspase-3、MMP-2、MMP-9、SOX2、OCT4、CD44、Wnt1、β-catenin蛋白表达.结果 与Control组比较,番泻苷B 10、20 μmol/L组细胞活力、克隆形成率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率和cleaved caspase-3/caspase-3 表达显著升高(P<0.05),侵袭细胞数和 MMP-2、MMP-9 蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞成球直径、细胞成球数目和SOX2、OCT4、CD44 蛋白表达显著降低(P<0.05),Wnt1、β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05).结论 番泻苷B可抑制视网膜母细胞瘤HXO-Rb44 细胞增殖、侵袭和干细胞样特性,诱导细胞凋亡,抑制Wnt/β-catenin信号通路的活化.
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编辑人员丨2周前
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基于"辨状论质"理论对唐古特大黄外观性状与内在质量的相关性研究
编辑人员丨2023/12/9
目的:探索唐古特大黄外观性状与内在成分含量之间的关联性,为唐古特大黄的"辨状论质"提供理论依据.方法:采用质构仪、分光测色仪和电子舌、高效液相色谱法测定唐古特大黄根和根状茎的 4 项外观性状指标,以及 15 个药效成分指标,并将外观性状指标与药效成分含量进行相关性分析和聚类分析.结果:外观性状与药效成分含量相关性趋势在根和根状茎中基本一致.整体来看,根和根状茎的粗度和硬度越大、颜色偏橙色且暗[明度值(L*)小,红色值(a*)、黄色值(b*)大]、苦味越小,药材中的没食子酸、番泻苷A、番泻苷B、大黄酸、大黄素及总蒽醌含量越高.不同的是,大黄酚、大黄素甲醚均在颜色偏橙色(a*、b*大)的根中含量较高,大黄酚在颜色偏黄色(a*小、b*大)的根状茎中含量较高,大黄素甲醚在颜色偏褐色(a*、b*小)的根状茎中有较高含量.结论:唐古特大黄外观性状指标(粗度、硬度、颜色、苦味大小)可作为"辨状论质"判断大黄质量的依据,且传统认为的根茎粗大、质坚实、颜色棕红或黄色为佳可以在根和根状茎的内在质量中得到体现,但传统认为的"味苦为佳"未在本研究中得到证实.
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编辑人员丨2023/12/9
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基于网络药理学与分子对接技术探讨中风醒脑液改善脑出血微循环障碍的作用机制
编辑人员丨2023/12/9
通过网络药理学与分子对接技术探讨中风醒脑液干预脑出血微循环障碍的作用机制.中风醒脑液组分化学成分信息通过中药系统药理数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TC-MSP),其化学成分预测的靶点分别通过PubChem和SwissTargetPrediction获得,脑出血和微循环障碍的相关靶点收集源于GeneCards数据库,成分与疾病共同靶点经过DAVID数据库进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,使用Cytoscape软件将相关网络关系可视化,进一步筛选重要化学成分与疾病靶点进行分子对接预测.动物实验验证采用改良神经功能评分(modified neurological severity score,mNSS)、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、免疫荧光和蛋白质印迹法(Western blot)检测中风醒脑液干预脑出血模型小鼠的作用情况.结果显示,中风醒脑液 4 个组分共有 31 个化学成分和 856 个靶点,脑出血微循环障碍靶点共有 173 个,疾病与成分共同靶点 57 个;富集分析显示共同靶点主要参与细胞增殖、凋亡等生物过程,肿瘤通路、病毒感染、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶 B(phos-phoinositide-3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路等信号通路.分子对接结果发现大黄、三七、红参的共同成分β-谷甾醇与原癌基因酪氨酸蛋白激酶(proto-oncogene tyro-sine-protein kinase,SRC)、信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α基因(phosphoinositide-3-kinase catalytic alpha polypeptide gene,PIK3CA)、非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶 11(recom-binant protein tyrosine phosphatase non receptor type 11,PTPN11)、AKT1、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EG-FR)、钙黏连相关蛋白β1(calcium adhesion-associated protein beta 1,CTNNB1)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)和肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53),大黄的成分番泻苷E与MAPK1 的靶点对接情况良好.实验结果发现中风醒脑液可减缓脑出血模型小鼠的神经损伤,降低S100 钙结合蛋白B(S100 calcium-binding protein B,S100β)、神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)、基质金属蛋白酶 9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、肿瘤坏死因子α(tumor necrsis factor α,TNF-α)、白细胞介素 1β(interlenkin 1β,IL-1β)、SRC、EGFR、CTNNB1、VEGFA、TP53、胶质纤维酸性蛋白(glial fi-brillary acidic protein,GFAP)和白细胞分化抗原 86(leukocyte differentiation antigen 86,CD86)的表达,增加p-PI3K、p-AKT和闭锁小带蛋白1(zona occludens 1,ZO-1)的表达.结果表明,中风醒脑液可能是通过PI3K/AKT/p53 通路抑制神经元凋亡和炎症反应,保护血脑屏障从而减缓脑出血微循环障碍.
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编辑人员丨2023/12/9
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高效液相色谱法同时测定大黄中14种成分的含量
编辑人员丨2023/8/6
建立高效液相色谱法同时测定大黄中大黄素、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素、大黄素甲醚、番泻苷A、番泻苷B、没食子酸、儿茶素、(-)-表儿茶素-3-没食子酸酯、异莲花掌苷、44’-羟基苯基-2-丁酮、莲花掌苷、4'-羟基苯基-2-丁酮4’-O-β-D-(2″-O-桂皮酰基-6″-O-没食子酰基)-葡萄糖苷14个成分含量的方法.采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×150mm,5μm),采用0.05%的磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-,柱温40℃,检测波长268 nm.结果表明在线性范围内14个成分线性良好(r >0.999 9);日内精密度和日间精密度均小于3.1%;平均回收率在91.80%~104.1%.同时,对收集到的10个掌叶大黄和10个唐古特大黄合格样品进行定量测定,发现掌叶大黄中含量比较高的成分是芦荟大黄素,唐古特大黄中含量比较高的是4-4'-羟基苯基-2-丁酮,各样品中所有化合物的含量差异都比较大.所建立的含量测定方法能同时测定大黄中14个成分的含量,为大黄药材多成分含量测定和质量控制提供一种简便的方法.
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编辑人员丨2023/8/6
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大黄、枳实、厚朴不同炮制品对小承气汤中药效组分的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究大黄、枳实、厚朴饮片变化对小承气汤药效组分的影响,以期为临床的合理应用和饮片的质量标准提供参考.方法 采用HPLC法分别测定各类成分.大黄游离蒽醌类(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚):Syncronis C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇–0.1%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.8 mL/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长254 nm.大黄结合蒽醌类(番泻苷B、番泻苷A):Syncronis C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;柱温30℃;进样量10μL;检测波长340 nm.枳实黄酮苷类(芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷):Syncronis C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–水;梯度洗脱;体积流量0.7 mL/min;柱温40℃;进样量10μL;检测波长283 nm.厚朴木脂素类成分(和厚朴酚、厚朴酚):Syncronis C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.05%磷酸;梯度洗脱;体积流量0.7 mL/min;柱温30℃;进样量10μL;检测波长294 nm.结果 小承气汤配伍剂量(大黄12 g–炒枳实9 g–姜厚朴6 g)不变,大黄、枳实、厚朴饮片改变时,小承气汤药效组分总量变化规律为:大黄–枳实–姜厚朴>酒大黄–炒枳实–姜厚朴>熟大黄–炒枳实–姜厚朴>大黄炭–炒枳实–姜厚朴≈小承气汤>大黄–炒枳实–厚朴,变化率分别为酒大黄组(6.561%)、熟大黄组(4.222%)、大黄炭组(0.118%)、枳实组(30.186%)、厚朴组(-11.218%).除大黄炭组外,其余组的药效组分总量皆明显变化,其中枳实组变化最明显.结论 同一味药材的不同炮制品在小承气汤处方中药效组分不同,对其他药味的影响亦不同,在小承气汤处方配伍中不可随意替代.
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编辑人员丨2023/8/6
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多指标正交试验优化大黄的湿纸煨制工艺
编辑人员丨2023/8/6
目的:优化大黄的湿纸煨制工艺.方法:以煨制后大黄的外观性状、浸出物含量、总蒽醌含量、游离蒽醌含量、结合蒽醌含量、番泻苷A+番泻苷B含量等多个指标的加权综合评分值为考察指标,采用L9(34)正交试验对用纸量、煨制时间、煨制温度3个因素进行考察,优化大黄的湿纸煨制工艺,并进行验证试验.结果:优化的大黄煨制工艺为每100 g大黄用纸12 g包裹、120℃炮制2 h.验证试验及中试试验结果显示,煨制后大黄的综合评分均值分别为84.99(RSD<2.0%,n=3)、85.06(RSD<2.5%,n=3).结论:优化后的大黄煨制工艺简便易行,重复性和可操作性好,本研究为煨大黄的规范化制备奠定了技术基础.
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编辑人员丨2023/8/6
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番泻叶中番泻苷A和B的提取工艺探究
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究番泻叶中番泻苷A和B的最佳提取条件.方法:建立同时测定番泻苷A和番泻苷B含量的标准,以番泻总苷的含量为指标,采用单因素实验考察提取溶剂、药材粒度和提取次数对番泻苷提取率的影响.在此基础上,采用正交实验法,对影响提取的各种因素进行研究.结果:番泻叶中番泻苷的最佳提取工艺为10倍剂量50%乙醇加热浸泡2次,每次浸提20 min.结论:优化后的工艺合理且稳定可行,可为番泻叶颗粒的研究和实际生产提供依据.
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编辑人员丨2023/8/6
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桃仁-大黄药对活血化瘀最佳配比的古代文献数据挖掘及其对寒凝血瘀大鼠模型的影响分析
编辑人员丨2023/8/6
目的:挖掘古代文献数据中桃仁-大黄药对活血化瘀最佳配比和分析其对寒凝血瘀大鼠模型的影响.方法:①采用挖掘中医古今应用桃仁-大黄药对活血化瘀处方中的配比数据;②皮下注射肾上腺素加冰水浴法复制急性寒凝血瘀大鼠模型,设置桃仁-大黄药对(0∶1、1∶5、2∶5、2∶3、1∶1、3∶2、5∶2、5∶1、1∶0)9种不同配比给药,测定各组血液流变学:全血黏度(WBV);血沉(ESR)、红细胞聚集指数(HCT);凝血指标:血浆凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白酶含量(Fbg)、凝血酶时间 (TT);③设置相应的桃仁-大黄药对(0∶1、1∶5、2∶5、2∶3、1∶1、3∶2、5∶2、5∶1、1∶0)9种不同配比给药,采用HPLC测定不同配比药对中没食子酸、(+)儿茶素、番泻苷B、蒽醌类中化学成分提取量的变化.结合桃仁-大黄药对的活血化瘀作用,以筛选其最佳配比.结果:①共整理桃仁-大黄药对活血化瘀方剂54首,桃仁-大黄配比在1∶7至3∶1间,但在1∶3至2∶1间出现的频率最高,达81.5%,其中1∶1出现的频次为17次,所有配比中最高,占31.5%;②桃仁-大黄药对(2∶3、1∶1、3∶2)均能改善大鼠的WBV、ESR、HCT、PT、APTT、 TT、Fbg相关指标(P<0.05,P<0.01).其中桃仁-大黄(1∶1)组对各个指标的改善更优;③与大黄对照组比较,1∶5、2∶5、2∶3桃仁-大黄不同配比样品中的没食子酸、(+)儿茶素、番泻苷B、蒽醌类提取量逐渐减少;1∶1样品中大黄的蒽醌类、鞣质类化学成分总提取量到达最低值.3∶2、5∶2、5∶1桃仁-大黄不同配比样品中的没食子酸、(+)儿茶素、番泻苷B、蒽醌类提取量升高,各类化学成分提取量(大黄酚-1-O-葡萄糖苷、大黄酸除外)高于大黄对照组.结论:古代文献数据显示桃仁-大黄药对活血化瘀最佳范围为2∶3至3∶2之间,配比1∶1较为集中.不同桃仁-大黄配比对寒凝血瘀大鼠模型的影响,其中2∶3、3∶2配比显著,1∶1配比更优.
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编辑人员丨2023/8/6
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基于多波长检测和替代对照品法用于通滞苏润江制剂的综合质量控制
编辑人员丨2023/8/6
目的 提出一种中成药综合质量控制的策略,并遵循该策略建立通滞苏润江制剂的HPLC分析方法.方法 该策略包括3个步骤,步骤1采用多波长进行色谱数据检测,步骤2为多元统计分析进行鉴别和定量,步骤3建立多种技术的替代对照品法.制剂使用甲醇超声提取.使用乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,270、350、410和440 nm 4个波长检测.并使用雷达图分析、聚类热图分析、主成分分析和夹角余弦相似度分析方法对数据进行统计.最后使用双标线性校正法、相对保留时间法和PDA光谱法进行色谱峰的定性;采用相对校正因子法进行定量.结果 同时测定没食子酸、诃子酸、秋水仙碱、番泻苷B、番泻苷A、西红花苷I和西红花苷Ⅱ的多指标含量测定方法和评价18个特征峰的指纹图谱方法符合方法学验证的要求.数据分析表明,各企业的样品存在差异,区分各类样品的强特征峰为没食子酸、诃子酸、诃子肉、番泻叶、番泻叶和西红花苷Ⅰ.结论 该策略建立的方法全面、专属、成本较低,能有效地对通滞苏润江制剂进行质量控制.
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编辑人员丨2023/8/6