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基于PKCβⅡ/NOX2/ROS信号通路探讨柴胡三参胶囊对心肌缺血再灌注损伤大鼠的保护作用
编辑人员丨2周前
基于氧化应激介导的程序性细胞死亡探讨心肌缺血再灌注损伤的发病机制,及基于PKCβⅡ/NOX2/ROS信号通路探讨柴胡三参胶囊调节心肌缺血再灌注损伤的机制及作用靶点.结扎左前降支建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型,随机分为6组:假手术组,模型组,柴胡三参胶囊临床等效、高剂量组,N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine)组,蛋白激酶C抑制剂(CGP53353)组.柴胡三参胶囊各剂量组连续给药7 d后,检测各组大鼠心肌梗死面积;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠心肌组织病理形态;TUNEL染色观察大鼠心脏组织凋亡情况;酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠心肌损伤指标和氧化应激相关指标;流式细胞仪检测心脏组织中活性氧(ROS)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测大鼠心脏组织相关蛋白及mRNA相对表达水平.结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠心肌梗死面积明显,心肌结构紊乱、间质水肿及出血,可见大量空泡,心肌损伤标志物及心肌凋亡水平明显升高,ROS及丙二醛(MDA)水平明显升高,超氧化物歧化酶(SOD)水平明显下降,心肌组织中蛋白激酶C(PKCβⅡ)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX2)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)蛋白及mRNA表达水平明显升高.与模型组比较,柴胡三参胶囊可改善大鼠心肌梗死面积和心脏组织病理形态,改善心肌损伤标志物和氧化应激相关指标,减少心肌组织凋亡水平,降低心肌组织中PKCβⅡ、NOX2、caspase-3、ACSL4蛋白及mRNA的表达.结果表明,柴胡三参胶囊可通过调控PKβⅡ/NOX2/ROS信号通路,抑制氧化应激和程序性细胞死亡(凋亡、铁死亡),从而减轻心肌缺血再灌注损伤.
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编辑人员丨2周前
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柴胡三参胶囊对p38MAPK通路介导BMSCs向心肌细胞分化的干预研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究柴胡三参胶囊含药血清干预骨髓间充质干细胞在p38MAPK通路向心肌细胞分化的作用,探讨其抗心律失常机制与p38MAPK信号转导通路的相关性.方法 根据不同处理因素将骨髓间充质干细胞分为4组:空白对照组、BMP-2诱导剂组、柴胡三参含药血清+BMP-2诱导剂组、柴胡三参含药血清组,分别加入空白血清、BMP-2、柴胡三参含药血清+BMP-2及柴胡三参含药血清,用WB法检测各组内p38MAPK mRNA表达水平,RT-PCR法检测干预后各组中MEF2C、CTnT蛋白表达.结果 WB法结果显示:与其他各组对照,柴胡三参+BMP-2组p38MAPK mRNA表达均上调(P<0.01);以最佳浓度即20%的含药血清给予柴胡三参+BMP-2组、柴胡三参组干预后,空白组、BMP-2组、柴胡三参组p38MAPK mRNA表达较柴胡三参+BMP-2组均见下调(P<0.05或P<0.01),而空白组表达与其他组比较均无统计学意义.RT-PCR结果显示:诱导后BMP-2组、BMP-2+柴胡三参组、柴胡三参组MEF2C及CTnT表达水平均高于空白血清组,差异有统计学意义(P< 0.01);BMP-2+柴胡三参组表达水平高于BMP-2组、柴胡三参组(P< 0.05);BMP-2组与柴胡三参组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 柴胡三参胶囊含药血清在一定条件下能促进骨髓间充质干细胞的增殖,对P38MAPK通路介导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化具有一定的促进作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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柴胡三参胶囊含药血清对骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞过程中PI3-K/Akt信号通路干预
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究柴胡三参胶囊含药血清对骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞过程中PI3-K/Akt信号通路的影响, 探讨其抗心律失常机制与PI3-K/Akt信号转导通路的相关性.方法:将P3代骨髓间充质干细胞随机分为4组, 分别为BMP-2组、BMP-2+含药血清组、含药血清组及空白血清组, 以MTT法测BMSCs增殖情况, 确定最佳浓度及最佳时间;加入相应浓度的诱导剂及血清, 诱导至最佳时间, Western blotting法检测各组细胞内Akt蛋白表达水平;RT-PCR法检测各组细胞内GATA-4、β-MHC m RNA表达情况.结果:与空白血清组相比, BMP-2组、BMP-2+含药血清组、含药血清组Akt、GATA-4、β-MHC表达水平均明显升高, 统计学具有明显差异 (P<0.01);与BMP-2组相比, BMP-2+含药血清组表达水平升高 (P<0.05), 与含药血清组相比, BMP-2+含药血清组表达水平升高 (P<0.05);BMP-2组与含药血清组比较, 差异无统计学意义 (P>0.05) .结论:柴胡三参胶囊能够通过作用于PI3-K/Akt信号通路诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化.
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编辑人员丨2023/8/6
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柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌组织CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡ-mRNA表达的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨柴胡三参胶囊抗缺血性心律失常的作用及分子学作用机制.方法 将60只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组、假手术组、模型组和空白组,每组10只.柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组预防性给予相应药物灌胃,假手术组、模型组和空白组灌胃等量的生理盐水,连续灌胃2周后,柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组大鼠均复制缺血性心律失常模型,假手术组大鼠只穿线不结扎,观察各组大鼠ECG变化,Western blot法检测心肌组织中CaMKⅡ蛋白表达水平,定量PCR法检测心肌组织中CaMKⅡmRNA表达水平.结果 模型组大鼠房性早搏、室早、室速、室颤发生率及心律失常积分、心肌组织中CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡmRNA表达水平均显著高于空白组(P均<0.05);柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组室速、室颤发生率及心律失常积分、心肌组织中CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡmRNA表达水平均显著低于模型组(P均<0.05);柴胡三参胶囊组及参松养心胶囊组室速、室颤发生率心律失常积分、心肌组织CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡmRNA表达水平均显著低于维拉帕米组(P均<0.05).结论 柴胡三参胶囊能有效降低室速、室颤发生率,并可减轻心肌缺血性心律失常造成的心肌组织损伤,其可能通过抑制CaMKⅡ蛋白和CaMKⅡmRNA的表达而发挥心肌保护作用.
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编辑人员丨2023/8/5
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柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞Bcl-2及Fas表达的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 观察柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞Bcl-2及Fas蛋白的表达影响,进一步明确柴胡三参胶囊治疗缺血性心律失常的作用及机制.方法 将实验大鼠随机分为假手术组、模型组、柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组、空白组,每组各10只.给予相应药物干预2周后观察各组的心律失常积分和Bcl-2、Fas表达的变化.结果 柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组与模型组进行比较,心律失常评分下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01),Fas蛋白表达有一定程度降低(P<0.05).结论 柴胡三参胶囊能上调抑制凋亡因子Bcl-2表达,下调促进凋亡因子Fas表达,说明其可减轻细胞凋亡,缓解心肌损伤,为柴胡三参胶囊改善缺血性心律失常提供了实验依据.
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编辑人员丨2023/8/5
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柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞RyR2mRNA表达的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的:探讨柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞兰尼碱受体(ryanodine receptors,RyR)2 mRNA表达的影响,为柴胡三参胶囊的临床应用提供实验依据.方法:60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、空白组、柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组,每组10只.相应干预10d后,空白组不作任何处理,假手术组只开胸不结扎,其余各组采取大鼠左冠状动脉前降支高位结扎法制作心肌缺血性心律失常模型,再用PCR法检测RyR2 mRNA在各组大鼠心肌中的表达水平情况.结果:柴胡三参胶囊组大鼠心律失常评分低于模型组(P<0.05);柴胡三参胶囊组大鼠死亡率低于模型组;柴胡三参胶囊组大鼠RyR2 mRNA CT值的相对表达量低于模型组(P<0.05).结论:柴胡三参胶囊可通过抑制RyR2 mRNA的过度表达,减少缺血性心律失常的发生,从而降低大鼠的死亡率.
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编辑人员丨2023/8/5
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中医药防治非酒精性脂肪性肝病现状分析与思考
编辑人员丨2023/8/5
通过中医理论体系分析非酒精性脂肪性肝病的病因病机、临床症状及治疗方案,发现临床使用的防治非酒精性脂肪性肝病主要是中医古方(参苓白术散、六味地黄丸、茵陈蒿汤、小柴胡汤、桃核承气汤)、中成药(胆宁片、血脂康胶囊、护肝片、三七脂肝丸)、临床经方验方(苓桂术甘汤、三子养亲汤、养肝解郁颗粒、鹧鸪降脂颗粒)以及常见"药食同源"中药材,其主要通过抗炎、抑制氧化应激等生物机制达到调控肝脏脂质代谢、改善缺氧保护肝细胞完整性从而达到改善NAFLD的效果.
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编辑人员丨2023/8/5
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柴胡三参胶囊通过调控PI3K/Akt和p38MAPK通路抑制阿霉素诱导的心脏毒性
编辑人员丨2023/8/5
目的 研究柴胡三参胶囊对新生大鼠心肌细胞损伤和小鼠心力衰竭模型中磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide3-ki-nase,PI3K)/Akt和丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路相关蛋白表达的影响,探讨其拮抗阿霉素诱导的心脏毒性的作用机制.方法 用阿霉素诱导生成新生大鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular myocyte,NRVM)损伤模型和小鼠心力衰竭模型,随机分为对照(no treatment,NT)组、模型(Model)组、柴胡三参胶囊预处理(CHSSC)组.末次给药后次日处死小鼠,处死前进行超声心动图检测,采用CCK-8法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡,试剂盒检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(c-Caspase 3)和磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(p-p38MAPK)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达情况.结果 与NT组比较,Model组以阿霉素剂量依赖性方式降低NRVM细胞活力,诱发细胞凋亡(P<0.01);氧化应激指标CK、LDH、MDA明显增加(P<0.01);左室EF值下降(P<0.01),LVIDS、LVIDd、LVESV、LVEDV水平增加(P<0.05);p-p38MAPK、c-Caspase 3和p-PI3K蛋白表达水平升高(P<0.01).与Model组比较,CHSSC组增加细胞活力、减轻细胞凋亡,差异有明显统计学意义(P<0.01);氧化应激指标CK、LDH、MDA降低(P<0.01);EF增加(P<0.05),LVIDS、LVIDd、LVESV、LVEDV下降(P<0.05);p-p38MAPK、c-Caspase 3和p-PI3K蛋白表达水平降低(P<0.01).结论 柴胡三参胶囊可改善阿霉素诱导的心脏毒性,可能与其通过调控PI3K/Akt和p38MAPK通路抑制氧化应激和细胞凋亡相关.
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编辑人员丨2023/8/5
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柴胡三参胶囊对心肌缺血再灌注损伤大鼠心脏的保护作用及铁死亡机制研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 研究柴胡三参胶囊对心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)大鼠心脏的保护作用.方法 取84只SPF级大鼠随机分为假手术组、模型组、地尔硫艹卓组和柴胡三参胶囊低、中、高剂量组,每组14只.术前对大鼠进行灌胃,假手术组及模型组大鼠灌胃等溶剂生理盐水.假手术组只穿线不结扎,其余各组均用无菌缝合线结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min并松线90 min构建心肌缺血再灌注模型,再灌注结束后立即取血,剥离心脏.比较各组心律失常积分,运用TTC染色法计算心肌梗死面积,运用HE染色法镜下观察心肌组织病理改变,Western blot法检测心肌组织中铁死亡相关蛋白表达水平.结果 与假手术组相比,模型组大鼠心律失常积分升高(P<0.05),心肌细胞排列紊乱,细胞核大小参差不齐,大量细胞肥大、水肿、变性,心肌梗死区域显著增加(P<0.05),铁死亡相关蛋白混合谱系激酶3(mixed lineage kinase 3,MLK3)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、肿瘤抑制蛋白p53(tumor suppressor protein p53,p53)的表达显著升高(P<0.01).与模型组相比,柴胡三参胶囊低剂量组大鼠在心律失常积分、心肌细胞损伤改善、心肌梗死面积和铁死亡相关蛋白MLK3、JNK、p53的表达上差异无统计学意义(P>0.05);柴胡三参胶囊中、高剂量组和地尔硫艹卓组大鼠心律失常积分明显降低(P<0.05),心肌细胞损伤改善,细胞排列较整齐,水肿程度减轻,心肌梗死面积减少(P<0.05),铁死亡相关蛋白MLK3、JNK、p53的表达显著降低(P<0.01).结论 柴胡三参胶囊中、高剂量可减轻MIRI大鼠心律失常,减少心肌梗死面积,减轻心肌病理损伤,降低铁死亡相关蛋白表达水平,其机制可能与抑制心肌铁死亡有关.
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编辑人员丨2023/8/5
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柴胡三参胶囊对缺血性大鼠心肌细胞钠通道的影响
编辑人员丨2023/8/5
目的 观察柴胡三参胶囊对缺血性大鼠心肌细胞钠通道影响,探讨柴胡三参胶囊作用靶点及其防治心律失常作用机制,为缺血性心律失常中医药治疗提供新的实验依据.方法 40只SD雄性大鼠随机分为柴胡三参胶囊组30只与空白对照组10只,分别予以等量柴胡三参胶囊及生理盐水灌胃以制备含药血清及空白血清.5%、10%、20%含药及空白血清作用于大鼠心肌细胞,用MTT法筛选柴胡三参胶囊最佳给药浓度.大鼠心肌细胞复苏、换液、传代后分为5组:空白组、模型组、空白血清组、普罗帕酮组、柴胡三参胶囊组.第一组以普通培养基培养,不做特殊处理.后4组分别加入普通培养基、空白血清、普罗帕酮、柴胡三参胶囊含药血清,培育1h后均建立缺血模型,运用Western Blot法检测各组钠通道Nav1.5蛋白表达水平.结果 缺血处理后,模型组、空白血清组、普罗帕酮组、柴胡三参胶囊组钠通道Nav1.5蛋白表达均高于空白对照组(P<0.05);与空白血清组对比,普罗帕酮组及柴胡三参胶囊组钠通道Nav1.5蛋白表达均下降(P<0.05);柴胡三参胶囊组钠通道Nav1.5蛋白表达下降程度低于普罗帕酮组(P<0.05).结论 钠通道是柴胡三参胶囊的作用靶点,柴胡三参胶囊能通过钠通道Nav1.5蛋白影响钠离子电流,具有改善心肌缺血症状,防治心律失常发生的作用.
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编辑人员丨2023/8/5