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管氏肿腿蜂寄生和注射其毒液对黄粉虫过氧化氢酶基因表达的影响
编辑人员丨6天前
为了探究管氏肿腿蜂Scleroderma guani寄生和注射其毒液对寄主黄粉虫Tenebrio molitor蛹中过氧化氢酶表达的影响,采用RT-PCR克隆黄粉虫过氧化氢酶基因,利用生物信息学软件分析基因序列结构特性,采用实时荧光定量PCR技术分析该基因的表达特征,使用试剂盒测定过氧化氢酶活性.克隆获得的黄粉虫过氧化氢酶基因编码阅读框序列长1 620 bp,编码539个氨基酸.该基因编码的氨基酸序列中含有催化氨基酸位点(His-71、Asn-183和Tyr-393)以及过氧化氢酶家族的3个保守基序:近端活性位点序列(FDRERIPERVVHAKGXG)、NADPH结合位点(XXHQXXXXFXD)和血红素配体结合位点(RXFXYXDXH).被管氏肿腿蜂寄生和注射其毒液后,黄粉虫蛹中的过氧化氢酶基因的表达量显著上调,其血淋巴和脂肪体中的过氧化氢酶活性显著升高.研究结果表明,管氏肿腿蜂毒液能调控黄粉虫过氧化氢酶基因的表达.
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编辑人员丨6天前
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磁共振质子密度脂肪分数(MRI-PDFF)在肝脂肪定量中的应用
编辑人员丨6天前
不同病因的慢性肝病均可出现肝脂肪变性.引起肝脂肪性病变的主要诱因包括慢性病毒性肝炎、胆汁淤积性肝病、酒精和非酒精性脂肪性肝病等.肝脂肪变性初期表现为单纯性脂肪性肝病,继而出现脂肪性肝炎、肝纤维化、肝硬化,甚至肝细胞癌.随着医学影像技术的发展,磁共振质子密度脂肪分数(MRI-PDFF)已在临床广泛应用于脂肪性肝病(FLD)的诊断.MRI-PDFF因具有精确性高及可重复性好的优点,逐步成为FLD无创诊断的"金标准".本文对MRI-PDFF在肝脂肪定量中的临床应用及研究进展进行综述.
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编辑人员丨6天前
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MAGiC联合IDEAL IQ技术在皮肌炎/多发性肌炎定量诊断中应用
编辑人员丨6天前
目的:探讨MR集成(Magnetic resonance image compilation,MAGiC)序列联合非对称采集技术和迭代最小二乘估算法迭代水脂分离算法(IDEAL-IQ)在皮肌炎(Dermatomyositis,DM)/多发性肌炎(Polymyositis,PM)患者大腿肌肉定量诊断中的价值.资料与方法:回顾性收集宁夏医科大学总医院经临床及病理证实为PM/DM的患者67例(病例组),年龄、性别、体质量指数(BMI)相匹配志愿者23例(对照组),采用SIGNA Architect 3.0T扫描仪行双大腿MAGiC序列、IDEAL IQ序列及常规T1WI、T2WI、T2Flex序列扫描.由两名放射科医生以独立双盲法于各序列上测量 12块肌肉(阔筋膜张肌,缝匠肌,股四头肌,大收肌,长收肌,股薄肌,半膜肌,半腱肌,股二头肌)的T2值、T1值、PD值、FF值及R2*值.通过单因素方差分析比较不同组T2值、T,值、PD值、FF值及R2*值.通过受试者工作特征(ROC)曲线,分析T2值、PD值、FF值及R2*值、T2值与FF值两者联合及EMG对DM/PM的诊断效能.结果:①DM/PM病例组T2值高于对照组(Z=-19.818,P<0.05);病例组FF值高于对照组(Z=-14.586,P<0.05);病例组PD值低于对照组(Z=-6.803,P<0.05);病例组R2*值低于对照组(Z=-5.475,P<0.05);病例组T,值与对照组差异无统计学意义(Z=-0.936,P=0.349).②T2 值的 AUC 为 0.902(0.880~0.925),FF 值的 AUC 为 0.817(0.786~0.848),PD 值的 AUC为 0.653(0.613~0.694),R2*值的 AUC 为 0.712(0.674~0.750);P<0.05;③T2 值联合 FF 值的 AUC 为 0.934(0.917~0.951),P<0.05.结论:MAGiC定量图谱技术可定量DM/PM患者大腿肌肉水肿程度,IDEAL IQ序列能定量大腿脂肪浸润情况,两者联合应用明显提高了DM/PM的诊断效能.
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编辑人员丨6天前
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二陈汤对蛋氨酸-胆碱缺乏饲料诱导的非酒精性脂肪性肝炎小鼠的干预作用研究
编辑人员丨6天前
探讨二陈汤预防非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠的作用效果,并初步探究其可能机制,为二陈汤在临床上用于预防NASH提供科学数据.将C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤低剂量组(ECD_L,6 g·kg-1)、二陈汤中剂量组(ECD_M,12 g·kg-1)、二陈汤高剂量组(ECD_H,24 g·kg-1),每组8只.正常组以蛋氨酸-胆碱补充(methionine and choline supplement,MCS)饲料饲养,其余各组均以蛋氨酸-胆碱缺乏(methionine and choline deficient,MCD)饲料饲养.各组动物均给予相应的饮食喂养,但药物干预组在MCD饲料喂养的基础上,分别给予低、中、高剂量的二陈汤(10 mL·kg-1·d-1)灌胃,连续6周,整个实验过程中小鼠可自由进食、饮水.给药结束后对其禁食不禁水12 h,使用20%乌拉坦腹腔注射麻醉小鼠,收集小鼠心脏血液和肝组织.血清用于检测谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransaminase,AST)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)及肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)的水平;肝脏组织分别用于苏木素-伊红(hematoxy-lin-eosin,HE)染色检测肝脏病理变化,实时定量反转录 PCR(real-time quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)分别用于检测核因子 E2 相关因子 2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)通路相关基因和蛋白的表达水平.结果显示,与正常组比较,模型组小鼠血清ALT、AST水平均显著升高;小鼠肝组织存在大量的脂肪空泡和明显的炎症细胞浸润;血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高,IL-10水平显著降低;肝组织脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-1β mRNA 表达均显著上调,GPX4、Nrf2、NAD(P)H 醌氧化还原酶[NAD(P)H:quinine oxidoreductase,NQO1]mRNA表达均显著下调.与模型组比较,ECD_M组和ECD_H组小鼠血清ALT、AST水平显著降低,ECD_L组AST水平显著降低;肝组织脂肪空泡数量及炎性细胞浸润程度均有不同程度改善;血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著降低,IL-10水平仅ECD_H组显著升高;肝组织FASN、MCP-1、IL-1β mRNA表达均显著下调,GPX4、NQO1 mRNA表达均显著上调,ECD_M组、ECD_H组Nrf2 mRNA表达显著上调.Western blot结果显示,与模型组相比,各给药组Nrf2、GPX4蛋白表达水平显著升高,FASN蛋白表达水平显著降低;ECD_M组和ECD_H组NQO1蛋白表达水平显著升高.综上所述,二陈汤可减少NASH小鼠肝脏脂质堆积和氧化应激,肝脏炎症和肝损伤,其机制可能与激活Nrf2/GPX4通路有关.
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编辑人员丨6天前
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基于AMPK调控ACC/CPT1信号通路介导脂肪酸代谢探究化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响
编辑人员丨6天前
目的 观察化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响,并探究其作用机制.方法 采用1 mmol/L油酸棕榈酸混合液诱导HepG2细胞24 h构建脂质沉积模型,分别给予化瘀祛痰方含药血清、AMP依赖的蛋白激酶[Aden-osine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]抑制剂及抑制剂+中药联合干预,油红O染色观察脂质沉积情况,试剂盒检测细胞中甘油三酯(triglyceride,TG)含量,蛋白印迹法检测AMPK、p-AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(A-cetyl CoA Carboxylase,ACC)、p-ACC、肉碱棕榈酰基转移酶-1(Carnitine Palmitoyltransferase-1,CPT1)蛋白相对表达量,以及实时荧光定量法检测细胞中AMPK、ACC、CPT1 mRNA相对表达水平.结果 与模型组相比,化瘀祛痰方含药血清组细胞中脂滴数目减少、TG水平降低,细胞中p-AMPK、CPT1蛋白及CPT1 mRNA相对表达量升高,ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量显著降低(P<0.01),AMPK蛋白及基因相对表达水平无明显差别(P>0.05);AMPK抑制剂组细胞中脂滴及TG含量升高,AMPK、CPT1蛋白及mRNA相对表达量降低,ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量升高(P<0.05或P<0.01);与AMPK抑制剂相比,抑制剂+中药含药血清组细胞中脂滴数目减少、TG水平降低,AMPK、p-AMPK蛋白及AMPK mRNA相对表达水平无显著差异(P>0.05),ACC、p-ACC蛋白及ACC mRNA相对表达量降低、CPT1则相对表达升高(P<0.05或P<0.01).结论 化瘀祛痰方含药血清可能通过激活AMPK使其磷酸化,并调控ACC/CPT1信号通路,抑制脂肪酸合成,促进脂肪酸氧化,从而降低HepG2细胞内的甘油三酯水平及脂质沉积.
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编辑人员丨6天前
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转录组学数据挖掘结合"临床-动物"研究验证识别激素性股骨头坏死全病程的证素标志基因
编辑人员丨6天前
采用转录组数据挖掘与实验验证相结合的研究策略,识别表征激素性股骨头坏死(SONFH)痰、瘀、虚证素的标志基因.首先,利用项目组前期临床转录组学检测所得SONFH痰瘀阻络证、经脉痹阻证、肝肾亏虚证共性差异表达基因集,整合差异表达趋势分析与功能挖掘,分别预测出表征痰、瘀、虚证素的候选标志基因集.再利用来源于临床SONFH患者的全血样本、SONFH大鼠的全血和受累股骨头组织样本,采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测上述候选标志基因的表达量;进一步,采用受试者工作特征曲线(ROC)法,客观评价上述候选标志基因的辨证效能.转录组数据分析结果显示,痰证素候选标志基因为超长链脂肪酸延伸酶6(ELOVL6),瘀证素候选标志基因为锚蛋白1(ANK1)、血型糖蛋白A/B(GYPA/B)、Rh相关糖蛋白(RHAG),虚证素候选标志基因为溶质载体家族2(促进葡萄糖转运体)成员1(SLC2A1)、胃口素(STOM).qPCR验证结果显示,与非SONFH组比较,ELOVL6在痰瘀阻络证患者外周血中的表达量最低(P<0.05);与正常对照组比较,其在SONFH大鼠造模4周外周血和受累股骨头组织中的表达量最低(P<0.01),且对大鼠造模4周的辨证效能(AUC=0.850,P=0.006)优于其他造模时间点(8、12、16、21 周 AUC 分别为 0.689、0.766、0.588、0.662).与非 SONFH 组比较,ANK1、GYPA、RHAG 均在经脉痹阻证患者外周血中表达最低(P<0.05);与正常对照组比较,其在SONFH大鼠造模12周外周血和受累股骨头组织中的表达量最低(P<0.05,P<0.01),且对大鼠造模 12 周的辨证效能(ANK1:AUC=0.855,P=0.006;GYPA:AUC=0.861,P=0.012;RHAG:AUC=0.854,P=0.009)优于其他造模时间点(4、8、16、21 周,ANK1 的 AUC 分别为 0.630、0.658、0.657、0.585;GYPA 的 AUC 分别为 0.646、0.573、0.691、0.617;RHAG 的 AUC 分别为 0.592、0.511、0.515、0.536).与非 SONFH 组比较,SLC2A1和STOM均在肝肾亏虚证患者外周血中表达量最低(P<0.05);与正常对照组比较,其在SONFH大鼠造模21周外周血和受累股骨头组织中的表达量最低(P<0.05,STOM在大鼠外周血中表达量与正常对照组间的差异无统计学意义除外),且SLC2A1对大鼠造模21周的辨证效能(AUC=0.806,P=0.009)优于其他造模时间点(4、8、12、16周AUC分别为0.520、0.580、0.741、0.774),STOM的辨证效能无意义.综上,SONFH中痰证素的标志基因为ELOVL6,瘀证素的标志基因为ANK1、GYPA和RHAG,虚证素的标志基因为SLC2A1,有助于从基因水平揭示SONFH痰、瘀、虚证素的生物学内涵.
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编辑人员丨6天前
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AZGP1通过FASN/Wnt/β-catenin通路对食管鳞癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响
编辑人员丨6天前
目的 探究锌-α2-糖蛋白1(AZGP1)对食管鳞癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的调控作用,并探讨其可能的作用机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting检测AZGP1在人正常食管上皮细胞(Het-1A)和人食管鳞癌细胞(TE11、EC9706、HCE7、EC109、KYSE150)中的表达.构建AZGP1过表达质粒并转染至EC9706细胞,分为对照组、过表达对照组(Ov-NC组)、AZGP1过表达组(Ov-AZGP1组);将AZGP1过表达质粒与脂肪酸合酶(FASN)过表达质粒共转染至EC9706细胞或将AZGP1过表达质粒单独转染至经Wnt通路激活剂Wnt agonist 1处理的EC9706细胞,分为对照组、Ov-AZGP1组、Ov-AZGP1+Ov-FASN组、Ov-AZGP1+Wnt agonist 1组..CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖;TUNEL实验检测细胞凋亡;CCK-8法和TUNEL实验检测顺铂和5-氟尿嘧啶化疗敏感性;Western blotting检测凋亡及FASN/Wnt/β-catenin通路相关蛋白的表达.结果 AZGP1在食管鳞癌细胞中表达降低(P<0.05),AZGP1过表达可抑制细胞增殖(P<0.05)、促进细胞凋亡(P<0.05)并增加顺铂和5-氟尿嘧啶化疗敏感性(P<0.05).AZGP1过表达可抑制FASN/Wnt/β-catenin信号通路(P<0.05),FASN过表达或Wnt agonist 1可逆转AZGP1对EC9706细胞增殖(P<0.05)、凋亡(P<0.05)及化疗敏感性的作用(P<0.05).结论 AZGP1可通过抑制FASN/Wnt/β-catenin通路进而抑制食管鳞癌细胞增殖、诱导细胞凋亡并增加化疗敏感性.
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编辑人员丨6天前
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脓毒症合并心肌损伤患者TLR4/NF-κB信号通路及其与心肌损伤标志物的相关性
编辑人员丨6天前
目的 探讨脓毒症合并心肌损伤患者Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路与心肌损伤标志物的相关性.方法 回顾性选取2020年6月至2022年6月应急管理部应急总医院收治的脓毒症患者84例作为研究对象,根据患者有无心肌损伤分为无心肌损伤组(n=59)和心肌损伤组(n=25).以酶联免疫吸附试验法检测血清脑钠肽(BNP)、N末端B型脑钠肽(NT-proBNP)、人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肌酸激酶同工酶(CK-MB);以实时荧光定量PCR法检测外周血单个核细胞(PBMC)中TLR4、NF-KB、MyD88 mRNA相对表达量.比较两组血清 BNP、NT-proBNP、h-FABP、cTn Ⅰ、CK-MB 水平,以及 PBMC 中 TLR4、NF-KB、MyD88 mR-NA 相对表达量.以Pearson相关系数分析血清BNP、NT-proBNP、h-FABP、cTn Ⅰ、CK-MB水平与TLR4、NF-κB、MyD88相对表达量的相关性.结果 心肌损伤组血清BNP、NT-proBNP、h-FABP、cTnⅠ、CK-MB水平分别为(442.17 ±85.06)ng/L、(2 306.94±417.39)pg/mL、(16.09±3.17)μg/L、(0.43±0.11)μg/L、(11.47±3.75)μg/mL,均高于无心肌损伤组[(374.39±51.82)ng/L、(418.52±112.64)pg/mL、(13.27±3.84)μg/L、(0.24±0.07)μg/L、(2.16± 0.41)μg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05).心肌损伤组TLR4、NF-KB、MyD88 mRNA相对表达量分别为2.73± 0.42、2.33±0.38、1.94±0.47,均高于无心肌损伤组(1.68±0.35、1.49±0.24、1.22±0.29),差异均有统计学意义(P<0.05).经相关性分析,血清 BNP、NT-proBNP、h-FABP、cTn Ⅰ、CK-MB 水平与 TLR4、NF-κB、MyD88 mRNA 相对表达量呈正相关(P<0.05).结论 脓毒症合并心肌损伤患者血清BNP、NT-proBNP、h-FABP、cTn Ⅰ、CK-MB等标志物水平出现明显升高,其机制可能与TLR4/NF-κB信号通路的激活有关.
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编辑人员丨6天前
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定量CT评估肌肉减少症和脂肪组织含量与肝癌TACE联合PD-1单抗治疗预后的相关性
编辑人员丨6天前
目的:探讨定量CT评估的肌肉减少症和脂肪组织含量与接受经导管动脉化疗栓塞术(TACE)联合程序性死亡受体1(PD-1)单抗治疗的肝细胞癌(HCC)患者预后的关系.方法:回顾性收集2019年1月-2022年1月接受TACE联合PD-1单抗治疗的HCC患者77例.所有患者在首次联合治疗前1个月内接受定量CT扫描,并测量L3椎体水平骨骼肌横截面积、总脂肪面积、皮下脂肪面积和内脏脂肪面积,计算骨骼肌指数(SMI)、总脂肪指数(TATI)、皮下脂肪指数(SATI)和内脏脂肪指数(VATI).通过绘制受试者操作特征(ROC)曲线计算TATI、SATI和VATI最佳截断点.通过SMI评估肌肉减少症.结果:ROC曲线显示TATI、SATI和VATI的截断点分别为61.75 cm2/m2、30.52 cm2/m2和61.52 cm2/m2.男性的SMI平均值为(48.03±7.34)cm2/m2,女性的SMI为(40.96±4.76)cm2/m2,肌肉减少症发生率为51.9%(40/77).多因素分析结果显示,肌肉减少症、SATI和肿瘤直径是HCC患者TACE联合PD-1单抗治疗后无进展生存期的独立影响因素(P<0.05).在总生存期中,无肌肉减少症和高SATI的患者生存时间明显长于患有肌肉减少症和低SATI,差异具有统计学意义(19.5月vs.10.4月;19.5月vs.13.0月,P<0.05).结论:肌肉减少症、SATI和肿瘤直径是HCC患者TACE联合PD-1单抗治疗独立预后因素,定量CT评估的肌肉减少症和低皮下脂肪含量与TA-CE联合PD-1单抗治疗的HCC患者较短的生存期相关.
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编辑人员丨6天前
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CT定量评估肌肉含量与非酒精性脂肪性肝病严重程度的相关性研究
编辑人员丨6天前
目的:通过CT探讨肌肉含量与不同程度非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的关系.方法:选取69 例腹部CT检查的受试者,通过肝脾比(CTL/S)分为正常组、轻度NAFLD组、中度NAFLD组和重度NAFLD组,每组人数分别为 16、21、17、14 例.测量CTL/S、腹围周长、腹围长径、腰大肌面积、竖脊肌面积、腹直肌面积、腹斜肌与腹横肌面积、腹腔体积、腹腔脂肪体积.分析组间差异、各指标与CTL/S相关性,绘制受试者工作特征曲线(ROC)探讨肌肉脂肪含量与不同程度NAFLD的关系.结果:竖脊肌、腹直肌、腹斜肌与腹横肌、腹腔体积和腹腔脂肪体积均低于正常组、中度NAFLD组和重度NAFLD组,差异有统计学意义(P<0.05).腹围周长、腹围长径、竖脊肌、腹直肌、腹斜肌与腹横肌、腹腔体积呈负相关(P<0.05),竖脊肌、腹直肌、腹斜肌与腹横肌和腹腔体积在诊断轻度NAFLD中具有敏感度和特异度(AUC≥0.78).结论:在早期NAFLD病程进展中肌肉含量减少比脂肪累积发生的更早;CT测量肌肉含量诊断轻度NAFLD具有较高的诊断价值.
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编辑人员丨6天前