-
利多卡因调节Hippo-YAP信号通路对原位肝移植大鼠缺血再灌注损伤的影响
编辑人员丨6天前
目的 探究利多卡因(LID)对原位肝移植(OLT)大鼠缺血再灌注损伤的影响,并分析其作用机制.方法 随机将60只大鼠平均分为维替泊芬(Verteporfin)组、LID高剂量组、LID中剂量组、LID低剂量组、模型组和对照组,除对照组大鼠外的其余大鼠构建OLT模型.苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-1β和IL-10水平,荧光探针法检测活性氧(ROS),硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(MDA),氮蓝四唑显色法检测超氧化物歧化酶(SOD),分光光度计法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),原位末端标记法(TUNEL)检测肝组织细胞凋亡,蛋白印迹法(Western blot)检测Hippo-YAP信号通路相关蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶(MST1)、磷酸化(p)-MST1、大肿瘤抑制因子1(LATS1)、p-LATS1、Yes相关蛋白(YAP)、p-YAP以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠肝组织出现损伤,肝细胞坏死且大量炎性细胞浸润,细胞凋亡率、血清 AST、ALT、TBIL、LDH 活性、肝组织 TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax 水平显著升高,肝组织 IL-10、SOD、GSH-Px及 Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP 蛋白表达降低(P<0.05);与模型组相比,LID 低、中、高剂量组的肝组织损伤减轻,细胞凋亡率、血清AST、ALT、TBIL、LDH活性、肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax水平显著降低,肝组织 IL-10、SOD、GSH-Px 及 Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP 蛋白表达的水平显著升高(P<0.05);Hippo-YAP信号通路抑制剂Verteporfin逆转了 LID对OLT大鼠缺血再灌注损伤的改善作用(P<0.05).结论 LID可能通过激活Hippo-YAP通路,减少炎症反应、氧化应激和肝细胞凋亡,对OLT大鼠肝缺血再灌注损伤发挥改善作用.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
基于昼夜节律相关lncRNA预测上皮性卵巢癌预后风险模型的构建
编辑人员丨6天前
目的:筛选昼夜节律相关lncRNA,建立预测上皮性卵巢癌(EOC)预后的风险模型,探索其与EOC发生发展可能存在的关系.方法:获取癌症基因图谱(TCGA)数据库中EOC患者的转录组数据和临床病理资料,从GeneCards下载昼夜节律相关基因,通过生物信息学分析筛选昼夜节律相关lncRNA并建立EOC预后预测模型.利用Kaplan-Meier曲线、受试者操作特征性曲线(ROC)、C-index、校准曲线进行验证.基于R语言探索风险模型与化疗药物敏感性的关系,分析风险模型与免疫功能之间的相关性,构建列线图模型.实时荧光定量PCR检测EOC组织及正常卵巢组织中lncRNA相对表达.结果:构建了由AC004540.5、CTD-2013N24.2、FUT8-AS1、CTB-131K11.1、RP11-793H13.8 组成的昼夜节律相关lncRNA的预后模型,在训练组与验证组都显示出较好的预测性能.高风险组对紫杉醇、多西他赛及环磷酰胺更敏感,低风险组对伊立替康及拓扑替康更敏感.高、低风险组间的差异表达基因富集在免疫相关活动和通路中,高风险与抗原呈递细胞共抑制、T细胞共抑制显著相关.RT-qPCR结果显示,AC004540.5、CTD-2013N24.2、FUT8-AS1、CTB-131K11.1、RP11-793H13.8 表达差异趋势与大数据分析结果一致.结论:基于5 个昼夜节律相关的具有预后价值的lncRNA风险模型可能是EOC的预后预测工具,有望指导患者的个体化治疗.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
气道压力释放通气通过调控ITGB4相关通路减轻ARDS肺部炎症的机制研究
编辑人员丨6天前
目的 分析气道压力释放通气(APRV)和小潮气量通气(LTV)对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)炎症的影响,探讨不同机械通气模式对ARDS机械应力相关的作用及机制.方法 构建巴马小型成年猪重度ARDS模型,应用LTV与APRV通气模式,进行48 h机械通气治疗,分为空白对照组(control组,n=3)、疾病对照组(ARDS组,n=3)、LTV机械通气组(LTV组,n=4)以及APRV机械通气组(APRV组,n=4).观察两种通气模式对氧合指数、炎症因子的影响.对肺组织进行高通量测序,并在蛋白层面验证差异基因ITGB4对ARDS机械通气后炎症的影响.使用A549细胞系构建APRV样牵张模型及LTV样牵张模型,进行4 h体外牵张实验,探讨两种牵张模式通过ITGB4对细胞炎症因子分泌的影响.使用小干扰RNA(siRNA)沉默ITGB4表达,比较 LTV+siRNA 组与 APRV+siRNA 组 ITGB4-FAK-p38-MAPK-IL-8 通路表达差异.使用 p38 抑制剂(SB203580)对细胞进行干预,比较LTV+SB203580组和APRV+SB203580组IL-8表达水平的差异.结果 重度ARDS造模成功后,通气48 h,APRV组肺泡灌洗液及肺组织中IL-6、IL-8水平显著低于LTV组(P<0.05),而两组IL-1、TNF-α差异无统计学意义(P>0.05).转录组高通量测序结果显示,机械通气后细胞外基质受体交互通路及黏着斑信号通路显著富集.在肺组织中,APRV组ITGB4、p-FAK、p-p38蛋白表达水平显著低于LTV组(P<0.05).细胞牵张模型在体外细胞中复现LTV与APRV样牵张,周期性牵张4 h使细胞IL-8水平显著升高(P<0.05),IL-6水平无明显变化(P>0.05).APRV组的IL-8、ITGB4、p-FAK和p-p38表达水平显著低于LTV组(P<0.05).沉默ITGB4可以显著下调机械牵张后APRV组与LTV组p-FAK、p-p38的表达水平,APRV+siRNA组下调趋势明显,但相较LTV+siRNA组差异无统计学意义(P>0.05).使用p38抑制剂后,相较于LTV+SB203580组,APRV+SB203580组p-p38磷酸化水平显著下调(P=0.032).结论 APRV机械通气模式通过ITGB4-p38-MAPK通路显著改善重度ARDS后炎症因子IL-8的分泌,可能为ARDS治疗提供潜在的干预靶点.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
细胞焦亡及其相关因子caspase-1和IL-1β与非小细胞肺癌
编辑人员丨6天前
细胞焦亡是一种与炎症相关的程序性细胞死亡过程,其经半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)与促炎因子白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)介导后发生,从而发挥促进或抑制非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发生、发展的双重作用.一方面,焦亡相关因子通过构建促肿瘤微环境助力NSCLC进展;另一方面,caspase-1和IL-1β通过调控经典炎性细胞焦亡途径延缓NSCLC进展.在肺肿瘤治疗方面,尽管部分化学治疗、免疫治疗、靶向治疗及中草药治疗通过细胞焦亡分子调控机制增强了药物敏感性,使癌细胞的进展得到延缓,但同时周围正常组织也因细胞焦亡产生的不良反应而受到伤害.Caspase-1、IL-1β作为新的、独立的生物学标志物可通过诱导细胞焦亡的发生而参与NSCLC的发生,并能在NSCLC治疗中发挥作用,可为NSCLC靶向治疗提供新的理论依据和策略.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
血管软化丸调控Nrf2/xCT/GPX4通路抑制血管内皮细胞铁死亡改善动脉粥样硬化的作用机制
编辑人员丨6天前
目的 从核因子E2相关因子2(Nrf2)/胱氨酸谷氨酸反向转运蛋白(xCT)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路探讨血管软化丸对ApoE-/-动脉粥样硬化(AS)小鼠铁死亡的作用及分子机制.方法 10只普通饲料喂养C57BL/6J雄性小鼠为正常组.ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养12周构建AS动物模型,按随机数字表法将50只造模成功的小鼠分为模型组、血管软化丸低剂量(2.34 g/kg)组、血管软化丸高剂量(4.68 g/kg)组、血管软化丸高剂量+ML385(0.03 g/kg)组、铁死亡抑制剂(1 mg/kg)组,每组10只,连续干预6周.采用全自动血脂分析仪检测血脂水平[甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)],油红O染色观察主动脉脂质沉积情况,苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉窦组织形态学变化,比色法检测各组小鼠血清中Fe2+、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫荧光观察各组小鼠主动脉窦铁蛋白重链(FTH1)和铁蛋白轻链(FTL)蛋白表达,蛋白质印迹法检测小鼠主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白水平,透射电镜观察主动脉线粒体超微结构改变.结果 与正常组比较,模型组小鼠主动脉可见明显脂质斑块沉积、主动脉窦钙化病变严重,血清TC、TG、LDL-C、Fe2+、MDA水平均升高,HDL-C、SOD、GSH水平下降(P<0.01),主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL表达下降(P<0.01),线粒体结构形态损伤严重;与模型组比较,血管软化丸低、高剂量组及铁死亡抑制剂组小鼠治疗后主动脉斑块面积占比下降、主动脉窦钙化病变减轻,血清TC、TG、LDL-C、Fe2+、MDA水平下降,HDL-C、SOD、GSH水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL阳性表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),线粒体结构趋近正常;与血管软化丸高剂量组比较,血管软化丸高剂量+ML385组小鼠血脂及脂质过氧化水平有所增加,主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL阳性表达下降(P<0.01),线粒体结构损伤,可逆转血管软化丸对AS小鼠的治疗作用.结论 血管软化丸可改善AS小鼠血脂水平、减少动脉斑块病变程度,其作用机制可能与激活Nrf2/xCT/GPX4通路、抑制铁死亡有关.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
SNHG10低表达与卵巢癌预后和耐药的相关性研究
编辑人员丨6天前
目的:探讨长链非编码小核仁RNA宿主基因10(SNHG10)与卵巢癌细胞增殖、耐药及预后的关系.方法:通过开放大数据(库)筛选88例正常卵巢组织和426例卵巢癌组织中差异表达SNHGs,分析其与卵巢癌患者预后的相关性,并通过受试者工作特征(ROC)曲线评估SNHGs预警卵巢癌紫杉醇和铂类药物耐药的价值.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测SN-HG10在卵巢癌紫杉醇/卡铂耐药细胞(SKOV3-R/SKOV3-CBP)及其亲本细胞(SKOV3)中的相对表达水平.通过慢病毒感染在卵巢癌亲本细胞SKOV3中构建过表达SNHG10的细胞株,分为对照组(S-eGFP组)和过表达组(S-SNHG10组).采用CCK-8、平板克隆形成实验评估细胞增殖能力;通过Cell Titer-Glo发光活细胞检测法评估细胞对紫杉醇的敏感性.结果:SNHG10在卵巢癌组织显著低表达(P<0.01),其低表达与卵巢癌患者不良预后显著相关(P<0.05),且能潜在预测紫杉醇和铂类化疗耐药(AUC>0.6,P<0.05).与S-eGFP组相比,S-SNHG10组细胞的增殖能力下降,对紫杉醇的敏感性增强(P<0.001).结论:过表达SNHG10显著抑制卵巢癌细胞增殖并提高卵巢癌细胞对紫杉醇的敏感性.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
甘草甜素调节TGF-β/Smad信号通路对肺癌荷瘤小鼠放射性肺损伤的影响
编辑人员丨6天前
目的 研究甘草甜素(GL)是否可以通过调节TGF-β/Smad信号通路对肺癌荷瘤小鼠放射性肺损伤(RILI)产生影响.方法 取48只小鼠,先随机选出12只小鼠作为NC组,其余小鼠构建肺癌荷瘤小鼠模型并采用X射线照射全胸建立RILI模型,再将小鼠随机分为照射+Model组、照射+GL组(10 mg/kg)、照射+GL+SRI-011381组(10 mg/kg+30 mg/kg TGF-β激动剂).使用酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;HE染色法检测小鼠肺组织病理损伤;试剂盒检测小鼠肺组织中羟脯氨酸(HYP)、髓过氧化物酶(MPO)含量;免疫组化法(IHC)检测肺组织中TGF-β、α-SMA表达;Western Blot检测小鼠肺组织中TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7蛋白表达.结果 与NC组比较,照射+Model 组小鼠血清中 IL-6、TNF-α 水平、HYP、MPO、TGF-β 和 α-SMA 表达、TGF-β1、p-Smad2/3 蛋白表达升高,肺组织病理损伤加重,Smad7蛋白表达降低(P<0.05);与照射+Model组比较,照射+GL组小鼠血清中IL-6、TNF-α水平、HYP、MPO、TGF-β和α-SMA表达、TGF-β1、p-Smad2/3蛋白表达减少,肺组织病理损伤减轻,Smad7蛋白表达增加(P<0.05);照射+GL+SRI-011381组中实验检测结果则与照射+GL组结果趋势相反,表明SRI-011381干预后减弱了 GL对肺癌荷瘤小鼠RILI的改善作用.结论 甘草甜素可以通过抑制TGF-β/Smad信号通路对肺癌荷瘤小鼠放射性肺损伤进行修护改善.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
山茱萸醇提物调节LSD1/PSD95对Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病小鼠神经损伤保护作用的研究
编辑人员丨6天前
目的 探究山茱萸醇提物通过调节组蛋白特异性去甲基化酶1(LSD1)/突触后致密蛋白-95(PSD95)影响神经元突触和神经炎症对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的阿尔茨海默病(AD)小鼠神经损伤的保护作用.方法 将40只C57BL/6N小鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、山茱萸醇提物低剂量组(0.1 mg/g)及山茱萸醇提物高剂量组(0.3 mg/g),每组10只.除假手术组外,其余各组双侧海马内注射Aβ25-35构建AD小鼠模型.造模前7 d开始灌胃,手术后5 d继续灌胃,共60 d.Morris水迷宫实验、Y迷宫实验及旷场实验检测小鼠学习记忆和空间探索能力;蛋白质印迹法检测小鼠海马LSD1、PSD95、突触素(SYN)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达及组蛋白H3第9位赖氨酸二甲基化(H3K9me2)修饰水平;染色质免疫共沉淀(CHIP)结合实时荧光PCR法检测PSD95基因启动子区H3K9me2修饰水平及PSD95 mRNA水平;组织免疫荧光法检测H3K9me2和PSD95表达的相关性及海马组织内离子钙结合衔接分子1(IBA1)的表达.结果 山茱萸醇提物能明显改善Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病小鼠学习及记忆能力.与模型组比较,山茱萸醇提物明显缩短小鼠的逃避潜伏期,增加其自主活动次数和时间,改善其自发交替准确率,增加小鼠海马LSD1表达(均P<0.05),进而降低PSD95基因启动子区H3K9me2修饰,因此,促进PSD95 mRNA转录和蛋白表达.组织免疫荧光结果表明,山茱萸醇提物降低海马中H3K9me2修饰水平会伴随着PSD95表达的增强.山茱萸醇提物亦能抑制小胶质细胞的活化,降低促炎因子IL-1β和TNF-α的表达.结论 山茱萸醇提物可能是通过上调LSD1表达,降低PSD95基因启动子区的H3K9me2修饰水平调节基因转录,增加突触可塑性调节的关键蛋白PSD95的表达,而缓解神经炎症反应、改善AD模型小鼠学习记忆功能障碍,从而对Aβ25-35诱导的神经损伤发挥保护作用.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
人脐带间充质干细胞尾静脉移植对围绝经期大鼠卵巢凋亡相关蛋白的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)移植对围绝经期大鼠卵巢功能改善情况.方法:选取13~15 月龄雌性大鼠30 只,构建围绝经期大鼠模型.将围绝经期鼠分为hUCMSCs移植组和空白组,每组 15 只,另选 15 只健康雌性大鼠为青年对照组.hUCMSCs移植前,检测大鼠血清E2、AMH、FSH水平;hUCMSCs移植后 2、3、4 周,每组随机选取5 只大鼠检测血清E2、AMH、FSH,并取卵巢组织检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表达水平.结果:hUCMSCs移植后,hUCMSCs组大鼠E2、AMH高于空白组,FSH低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);hUCMSCs组大鼠卵巢始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡、窦状卵泡数均多于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);移植后4 周hUCMSCs组大鼠卵巢组织中Bcl-2、Bcl-2/Bax高于空白组,Bax、Caspase-3 低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:hUCMSCs移植后大鼠E2、AMH升高,FSH降低;卵巢组织中Bcl-2、Bcl-2/Bax比率提高,Bax、Caspase-3 下降,进一步支持了hUCMSCs在调节卵巢细胞凋亡过程中可能发挥作用.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前
-
基于SEER数据库的育龄期女性Ⅰ期卵巢透明细胞癌不同治疗方式生存率分析和术后生存预测模型构建
编辑人员丨6天前
目的:探讨Ⅰ期卵巢透明细胞癌(OCCC)患者不同治疗方式之间的长期预后差异,构建列线图预测术后Ⅰ期OCCC患者的预后.方法:从SEER数据库中筛选2010年至2019 年组织学诊断为OCCC的患者.使用Kaplan-Meier评估根治性手术与保留子宫手术联合或不联合化疗对OCCC患者总生存期(OS)和癌症特异性生存期(CSS)的影响.Cox比例风险模型评估临床病理因素与OS和CSS的相关性.使用与OS和CSS显著相关的参数构建列线图,通过内部验证评估列线图的性能.结果:共纳入824 例OCCC患者,173 例单独接受子宫切除术(HRT),430 例子宫切除术后辅助化疗(HRT+CT),54例选择保留子宫的术式(NHRT),167 例选择NHRT+CT.与其余三者相比,接受NHRT患者拥有最好的 CSS 和 OS(P=0.0077,0.0078).单独接受 NHRT 治疗的患者比接受NHRT+CT治疗的患者具有更好的生存率(CSS:P=0.0052;OS:P=0.0062).多变量Cox回归分析表明,年龄、婚姻状态、肿瘤分期、治疗方案是CSS和OS的独立预后因素.根据结果建立了Ⅰ期OCCC患者术后预后列线图,CSS和OS列线图ROC曲线下面积(AUC)分别为0.7 和0.701,列线图的DCA结果表明预测模型在临床上是有益的,标准曲线与实际观测值具有良好一致性.结论:保留生育功能的手术可能是育龄期Ⅰ期OCCC女性患者的替代治疗选择.关于是否辅助化疗,仍需进一步研究确定其在Ⅰ期OCCC患者中的作用.构建的列线图对Ⅰ期OCCC术后患者具有良好的生存预测和临床应用价值.
...不再出现此类内容
编辑人员丨6天前