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注射用多西他赛胶束无菌检查方法验证
编辑人员丨1周前
目的 建立针对2种注射用多西他赛胶束的无菌检查方法.方法 参照2015年版《中国药典》(四部)通则1105无菌检查法,取注射用多西他赛胶束15瓶,用500 mL 0.9%氯化钠溶液溶解,作为供试液,平均分配至3个滤筒过滤.同法制备6个滤筒.每个滤筒用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗3次,每次100 mL,然后加入相应培养基,并分别接种<100 CFU/mL的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、生孢梭菌和黑曲霉,于适宜温度下观察培养.以等量无菌氯化钠溶液替代注射用多西他赛胶束供试液后采用相同的后续操作,作为对照组.采用薄膜过滤法,用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液冲洗滤膜,每个滤筒冲洗3次,每次100 mL,检测各菌株生长情况.结果 6种验证菌株均在48 h内生长良好,样品的抑菌活性被完全消除.结论 注射用多西他赛胶束可用上述方法进行无菌检查.
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皮肤组织常驻记忆T细胞与炎症性皮肤病复发的研究进展
编辑人员丨1周前
组织常驻记忆T细胞(tissue-resident memory T,TRM)是一种新发现的记忆T细胞亚群.在皮肤感染(如HSV、白色念珠菌、利什曼原虫感染)及皮肤肿瘤性疾病(如黑素瘤和鳞状细胞癌)中,皮肤TRM细胞发挥保护作用,在部分自身炎性皮肤病中皮肤TRM细胞起致病作用.本文对皮肤TRM细胞与炎症性皮肤病复发的研究进展进行综述,特别是银屑病、白癜风、特应性皮炎、固定性药疹、斑秃和额部纤维性脱发.
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编辑人员丨1周前
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二代基因测序技术联合半乳甘露聚糖检测对重症肺炎合并真菌感染的诊断价值
编辑人员丨1周前
目的 探究二代基因测序技术(NGS)联合半乳甘露聚糖(GM)检测对重症肺炎合并真菌感染的诊断价值.方法 选取2020年3月—2023年3月大庆龙南医院急诊重症监护室收治的重症肺炎患者148例.收集支气管肺泡灌洗液行病原微生物培养及肺泡灌洗液NGS检测,同期行血清GM检测.以病原微生物培养为金标准,分析血清GM及肺泡灌洗液NGS诊断重症肺炎合并真菌感染的敏感性、特异性,评估血清GM检测、肺泡灌洗液NGS检测单独及联合诊断重症肺炎合并真菌感染结果与病原微生物培养结果的一致性.结果 148例重症肺炎中合并真菌感染30例,其中肺孢子菌10例、白色念珠菌8例、曲霉菌7例、根霉菌1例、肺孢子菌感染合并白色念珠菌3例、肺孢子菌感染合并鲍曼不动杆菌1例.血清GM检测结果显示,阳性28例,阴性120例,与病原学培养诊断真菌感染的Kappa值为0.700.肺泡灌洗液NGS诊断结果显示,阳性34例,阴性114例,与病原学培养诊断真菌感染的Kappa值为0.841.血清GM联合肺泡灌洗液NGS诊断结果显示,阳性30例,阴性118例,病原学培养诊断真菌感染的Kappa值为0.916.血清GM、肺泡灌洗液NGS单独及联合诊断重症肺炎合并真菌感染的敏感性分别为73.3%(95%CI:0.538,0.870)、93.3%(95%CI:0.765,0.988)、93.3%(95%CI:0.765,0.988),特异性分别为94.9%(95%CI:0.888,0.979)、94.9%(95%CI:0.889,0.979)、98.3%(95%CI:0.934,0.997),曲线下面积分别为0.841、0.941和0.958.结论 血清GM联合肺泡灌洗液NGS诊断重症肺炎合并真菌感染,在肺孢子菌、白色念珠菌及曲霉菌等常见菌种中的诊断效能良好.
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重症患者导管相关性血流感染的病原菌分布与影响因素分析
编辑人员丨1周前
目的 探讨重症患者导管相关性血流感染(catheter-related bloodstream infection,CRBSI)的病原菌分布及影响因素.方法 回顾性分析 2019 年 7 月 1 日至2022年7月2日期间在简阳市人民医院重症医学科接受中心静脉置管患者的临床资料,依据患者是否发生中心静脉CRBSI分为CRBSI组与非CRBSI组.对CRBSI组患者行病原菌种类分析,同时比较两组临床资料信息,并将有统计学意义的变量纳入多因素Logistic回归分析,明确接受中心静脉置管患者发生CRBSI的危险因素,通过受试者工作特征曲线(ROC)构建重症患者发生CRBSI的预测模型.结果 共纳入接受中心静脉置管患者 293 例,其中CRBSI组 38 例、非CRBSI组 255 例.38 例CRBSI患者共检出病原菌52珠,其中革兰氏阳性菌占比50.00%(26/52),以金黄色葡萄球菌19.23%(10/52)、表皮葡萄球菌 7.69%(4/52)为主;革兰氏阴性菌占比 44.23%(23/52),以大肠埃希菌17.31%(9/52)、肺炎克雷伯杆菌 13.46%(7/52)为主;真菌占比 5.77%(3/52),均为白色念珠菌.CRBSI组年龄≥60 岁、合并糖尿病、置管部位为股静脉或颈内静脉、静脉营养液输液、置管前应用抗菌药物者占比显著高于非CRBSI组;CRBSI组BMI、入院时APACHE Ⅱ评分显著高于非CRBSI组,置管时间显著长于非CRBSI组,P值均<0.05.多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥60 岁、高BMI、合并糖尿病、入院时高APACHE Ⅱ评分、置管部位为股静脉或颈内静脉、置管时间长、输液类型为静脉营养液、置管前应用抗菌药物为重症患者发生CRBSI的危险因素.ROC分析表明,BMI、入院时APACHE Ⅱ评分、置管时间均能用于重症患者发生CRBSI的预测,曲线下面积分别为 0.778、0.919、0.975(P<0.05).结论 重症患者中心静脉置管后CRBSI的病原菌以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌较为多见,同时CRBSI的发生与年龄、BMI、置管天数、置管部位等因素关系密切,临床治疗过程中应当予以关注.
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编辑人员丨1周前
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细胞培养液中细菌、真菌多重荧光定量PCR检测方法的建立及验证
编辑人员丨1周前
目的 建立细胞培养液中常见细菌和真菌的多重荧光定量PCR检测方法,并进行验证.方法 选取金黄色葡萄球菌NUC基因、生孢梭菌COLA基因和白色念珠菌ITS-2区段基因,分别设计1组引物及探针,并以辣椒UBI3基因作为外标基因,建立金黄色葡萄球菌、生孢梭菌和外标基因的三重反应体系及白色念珠菌和外标基因的两重反应体系.验证方法的引物特异性、线性范围、检测限、专属性、抗干扰性和精密性.采用建立的方法对100份293T细胞培养液样本进行检测,同时与普通PCR法进行比较.结果 3对引物于不同退火温度(56、57、58、59 ℃)下均可扩增出对应3种菌约100 bp的特异性基因条带,大小与预期相符;3种菌标准品质粒在5.80 × 106~5.80 × 102 copies/μL范围内,与Ct均呈良好的线性关系,标准曲线方程分别为:Y=-3.373 X+37.48、Y=-3.557X+36.59、Y=-3.536 X+39.78,R2均>0.99,扩增效率均在90%~110%范围内;3种菌的检测限均为101 CFU/mL;3种菌的引物及探针在易发生交叉反应的6种细胞基因组DNA上无特异性扩增;293T细胞、酵母菌、大肠埃希菌、支原体的基因组DNA对检测无影响;重复性和中间精密性验证CV均<15%.100份细胞培养液样本中,检出14份阳性及86份阴性样本,随机挑选的3个阳性和2个阴性样本普通PCR法检测结果与建立的方法一致.结论 建立的用于检测细胞培养液中细菌、真菌的多重荧光定量PCR法具有良好的专属性、抗干扰性和精密性,且简便易操作、成本低、灵敏度高,可快速检测细胞培养过程中的污染情况.
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编辑人员丨1周前
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合并真菌感染的感染性胰腺坏死患者的临床特征
编辑人员丨1周前
目的 感染性胰腺坏死(infected pancreatic necrosis,IPN)是导致急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者死亡的主要原因之一.目前多数研究关注于细菌感染所致病例的特点,而合并真菌感染的IPN的临床特征尚不明确.本研究揭示了合并真菌感染的IPN患者的临床特征,并分析了可能影响患者死亡的风险因素.方法 分析2017年 1月1日至2021年12月31日首都医科大学宣武医院普通外科收治的IPN患者的临床资料.依据患者胰腺坏死组织及引流液培养是否有真菌感染,分为真菌感染组和无真菌感染组.比较两组患者的基线资料、临床特点与结局,并分析真菌感染组患者死亡的风险因素.结果 研究共纳入214个病例,其中真菌感染组49例.真菌感染组患者的坏死物累及区域更广、红细胞压积更低、入院时血糖更高;真菌感染组患者出现多重耐药菌感染(multidrug-resistant bacte-ria,MDRB)比例更高,总住院时间、入住重症监护病房(intensive care unit,ICU)时间及接受肠外营养时间也更长.与无真菌感染组相比,真菌感染组接受手术患者的比例及手术干预次数相近(P>0.05),但真菌感染组患者术前器官功能衰竭及术后新发器官功能衰竭患者的比例更高,死亡率也更高(P<0.05).真菌感染的菌种以白色念珠菌(44.8%)最为常见,其次是近平滑念珠菌(28.6%)和热带念珠菌(8.2%).单因素Logistic回归分析显示,合并MDRB感染(OR=1.37,95%CI:1.02 ~1.83)、出现真菌血症(OR=1.53,95%CI:1.06 ~2.23)、高血糖(OR=1.65,95%CI:1.28~2.10)、术后新发器官功能衰竭(OR=1.65,95%CI:1.19~2.29)及出血性并发症(OR=1.64,95%CI:1.28~2.10)是影响真菌感染组患者死亡的风险因素;多因素Logistic回归分析的结果与单因素分析结果一致.结论 真菌感染增加IPN患者的死亡率,也增加术后患者发生新发器官功能衰竭的发生率.关注真菌血症、MDRB感染、高血糖、器官功能衰竭及术后出血有助于降低患者死亡风险.
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编辑人员丨1周前
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STAT1基因功能获得性突变致慢性皮肤黏膜念珠菌病继发噬血细胞性淋巴组织细胞增多症1例
编辑人员丨1周前
慢性皮肤黏膜念珠菌病的疾病特征为指甲、皮肤、口腔和生殖道黏膜的反复或持续白色念珠菌感染,本病临床较少见.本病例患儿主要表现为反复口腔念珠菌病、低体重、生长迟缓,入院查体提示肝、脾、淋巴结肿大,化验提示血三系偏低、低纤维蛋白原血症、高甘油三酯血症、高铁蛋白、NK细胞活性低,骨髓涂片提示噬血性细胞可见,静脉血宏基因组二代测序、血培养、骨髓培养均提示白色念珠菌感染.患儿全外显子测序发现STAT1基因杂合错义变异c.1154C>T(p.Thr385Met),为自发变异.诊断为STAT1基因功能获得性突变致慢性皮肤黏膜念珠菌病继发噬血细胞性淋巴组织细胞增多症.先后予卡泊芬净、氟康唑抗感染治疗,住院治疗5周后出院,随访1年余未见复发及后遗症.
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编辑人员丨1周前
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中国25家三级医院新生儿重症监护病房早产儿真菌败血症发生现状
编辑人员丨1周前
目的:分析中国25家新生儿重症监护病房(NICU)中早产儿真菌败血症的发生现状和危险因素,为探讨真菌败血症预防策略提供依据。方法:对“基于证据的质量改进方法降低中国新生儿重症监护病房院内感染发生率的整群随机对照试验”建立的早产儿临床数据库资料进行二次分析,回顾性分析2015年5月至2018年4月生后7 d内收入中国25家三级医院NICU的24 731例早产儿的真菌败血症发生现况。根据早产儿是否发生真菌败血症分为真菌败血症组和未发生真菌败血症组,分析真菌败血症的发生率和病原。使用χ 2检验比较不同出生胎龄、不同出生体重和不同NICU早产儿真菌败血症发生率。使用多因素Logistic回归分析方法比较真菌败血症组和未发生真菌败血症组早产儿预后。通过倾向性评分匹配144例真菌败血症组早产儿和288例无真菌败血症组早产儿,使用单因素和多因素Logistic回归分析方法分析发生真菌败血症的危险因素。 结果:24 731例早产儿中166例(0.7%)发生真菌败血症,真菌败血症早产儿出生胎龄为(29.7±2.0)周,出生体重为(1 300±293)g,其中87.3%(145/166)为出生胎龄<32周的早产儿。出生胎龄和出生体重越低,真菌败血症的发生率越高(均 P<0.001)。极早产儿和超早产儿真菌败血症发生率分别为1.0%(117/11 438)和2.0%(28/1 401),极低出生体重儿和超低出生体重儿中分别为1.3%(103/8 060)和1.7%(21/1 211)。3家NICU无真菌败血症发生,其余22家NICU真菌败血症的发生率范围为0.7%(10/1 397)~2.9%(21/724),差异有统计学意义( P<0.001)。166例早产儿真菌败血症病原菌主要为念珠菌150例(90.4%),其中白色念珠菌有59例、非白念珠菌有91例,非白念珠菌以近平滑假丝酵母菌(41例)为主。真菌败血症早产儿发生中重度支气管肺发育不良(调整 OR=1.52,95% CI 1.04~2.22, P=0.030)和严重早产儿视网膜病(调整 OR=2.55,95% CI 1.12~5.80, P=0.025)风险增加。使用广谱抗菌药物(调整 OR=2.50,95% CI 1.50~4.17, P<0.001)、长时间中心静脉置管(调整 OR=1.05,95% CI 1.03~1.08, P<0.001)和长时间使用全肠外营养(TPN)(调整 OR=1.04,95% CI 1.02~1.06, P<0.001)均是发生真菌败血症的独立危险因素。 结论:中国NICU早产儿真菌败血症主要病原为白色念珠菌和近平滑假丝酵母菌。真菌败血症早产儿发生中重度支气管肺发育不良和严重早产儿视网膜病风险增加。使用广谱抗菌药物、长时间中心静脉置管和长时间使用TPN可增加早产儿发生真菌败血症的风险。后续需针对这些危险因素采取措施以降低NICU真菌败血症发生率。
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编辑人员丨1周前
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单纯内固定或假体翻修治疗全膝关节置换术后假体周围骨折
编辑人员丨1周前
目的:分析单纯内固定和假体翻修治疗全膝关节置换术后假体周围骨折的临床疗效。方法:回顾性分析2008年1月至2022年1月就诊于四川大学华西医院骨科的全膝关节置换术后发生假体周围骨折患者35例(35膝),男13例、女22例,年龄(71.4±4.1)岁(范围62~81岁)。左膝19例,右膝16例。RorabeckⅡ型20例、RorabeckⅢ型15例。初次置换均使用固定平台后稳定型膝关节假体,以骨水泥固定。RorabeckⅡ型患者接受单纯内固定治疗(内固定组),Rorabeck Ⅲ型患者接受更换假体翻修术(翻修组)。比较两组患者术后美国特种外科医院(Hospital for Special Surgery,HSS)评分、膝关节活动度范围(range of motion,ROM)、下肢力线矫正情况及术后并发症的发生率。结果:所有患者均顺利完成手术并获得随访,随访时间为(5.2±3.6)年(范围1~12年)。术中失血量为(680±102) ml(范围420~1 100ml)。内固定组手术时间为(105±17) min,小于翻修组的(140±21) min,差异有统计学意义( t=-5.450, P<0.001)。术中无一例出现神经、血管损伤等并发症。内固定组术后5例下肢力线不满意(与正常值偏差>3°),翻修组下肢力线均满意,两组下肢力线满意率的差异无统计学意义( P=0.057)。内固定组骨折愈合时间、末次随访时膝关节ROM及HSS评分分别为(5.1±1.3)个月、86°±5°、(84±5)分,翻修组为(4.8±1.5)个月、83°±6°、(82±4)分,差异均无统计学意义( P>0.05)。翻修组1例术后确诊为假体周围感染,病原菌培养提示为白色念珠菌,反复出现膝前窦道和髌骨外露,进而发展为骨髓炎,于翻修后1年行大腿中段截肢术。 结论:假体稳定性是决定全膝关节置换术后假体周围骨折治疗方案的重要参考,对假体未松动患者行坚强的内固定术、对假体松动的患者采取更换假体的翻修术,均可获得良好的膝关节功能。
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编辑人员丨1周前
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改性壳聚糖滴眼液对兔白念珠菌性角膜炎的治疗作用及安全性评价
编辑人员丨1周前
目的:评价改性壳聚糖滴眼液在白念珠菌性角膜炎动物模型中的治疗作用及安全性。方法:选取10只健康成年雌性新西兰白兔,以右眼为实验眼,采用角膜接触镜法建立浅层白念珠菌性角膜炎模型。经裂隙灯显微镜及角膜刮片显微镜检查结果初步判定造模成功的新西兰白兔,采用随机数字表法分为模型组和改性壳聚糖点眼组,根据真菌培养结果最终判定造模成功的模型兔,另选5只兔为正常对照组,不做处理。正常对照组和改性壳聚糖点眼组局部给予改性壳聚糖滴眼液点眼,每日6次,1周后改为每日4次,继续用药1周后停药;模型组不给予治疗。用药期间每天裂隙灯显微镜下观察各组角膜病灶及眼表变化,于造模后第1、7、14、21、28天行裂隙灯显微镜照相并进行眼部症状评分,并记录角膜愈合时间。停药后继续观察各组实验眼角膜情况2周。结果:8只模型兔实验眼角膜刮片显微镜检查结果为真菌菌丝和孢子阳性,培养分离的菌株与接种菌株一致,造模成功率为80%(8/10)。造模后第7、14、21天,模型组感染程度评分分别为(14.50±0.58)、(6.25±0.50)和(2.50±0.58)分,明显高于相应时间点改性壳聚糖点眼组的(7.25±1.26)、(2.75±0.50)和(1.25±0.50)分,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组于造模后7 d内,角膜水肿明显加重,中央白色溃疡范围增大,造模后7~28 d角膜溃疡逐渐愈合,平均愈合时间为(24.5±2.6)d,最终遗留角膜瘢痕及新生血管。改性壳聚糖点眼组造模后7 d内角膜浸润明显减轻,造模后14 d角膜刮片镜检及真菌培养结果均为阴性,平均愈合时间为(13.5±1.3)d,明显短于模型组,差异有统计学意义(t=7.47,P<0.01)。造模后28 d改性壳聚糖点眼组实验眼未见角膜炎复发,治愈率为100%。正常对照组局部用药期间未见眼睑结膜充血水肿及角膜损伤表现。结论:改性壳聚糖滴眼液治疗兔眼浅层白念珠菌性角膜炎模型安全、有效,眼表刺激性小。
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编辑人员丨1周前