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大黄酸对糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞间充质转分化中ILK/Snail信号通路的影响
编辑人员丨6天前
目的:探讨糖尿病肾病(DN)肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)进程中整合素连接激酶(ILK)/锌指转录因子(Snail)信号通路的表达情况及大黄酸对其的影响。方法:将8周龄的健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、糖尿病肾病组、大黄酸组及缬沙坦组,每组各12只。使用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病模型,大黄酸组及缬沙坦组分别给予大黄酸100 mg/(kg·d)、缬沙坦30 mg/(kg·d)灌胃。于第8、16周末,以上四组大鼠各处死6只,原位灌洗肾脏,取出大鼠的肾脏组织后固定于蜡块并切片,使用HE及Masson染色分别对肾小管间质损伤指数、间质胶原相对面积进行评价;免疫组织化学方法测定E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、ILK、Snail及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达并作半定量分析。结果:与正常组比较,糖尿病肾病组大鼠肾小管间质损伤指数升高、肾间质胶原相对面积增加,肾小管上皮细胞E-cadherin表达下调、α-SMA表达上调( P<0.05)。与糖尿病肾病组比较,大黄酸组、缬沙坦组肾小管间质损伤指数下降、肾间质胶原相对面积减少,肾小管上皮细胞E-cadherin表达上调、α-SMA表达下调( P<0.05),且大黄酸组、缬沙坦组两组间差异无统计学意义( P>0.05)。与正常组比较,糖尿病肾病大鼠肾小管上皮细胞ILK、Snail及MMP-2的表达均随病情发生进行性升高( P<0.05)。与糖尿病肾病组比较,大黄酸组、缬沙坦组ILK、Snail及MMP-2的表达均有所下降( P<0.05),且大黄酸组、缬沙坦组两组间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:大黄酸可通过下调DN大鼠肾小管上皮细胞ILK/Snail信号通路的表达阻抑EMT的进展。
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编辑人员丨6天前
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荷载精子相关抗原9基因短发卡RNA的溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9联合放疗对前列腺癌LNCaP细胞的治疗作用
编辑人员丨6天前
目的:观察荷载精子相关抗原9(SPAG9)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9联合放疗对前列腺癌LNCaP细胞的治疗作用并初步探讨其机制。方法:将前列腺癌LNCaP细胞分为4组,分别为磷酸盐对照组(PBS组)、放疗组(10 GY)、病毒组[ZD55-SPAG9,10感染复数(MOI)]、联合组(ZD55-SPAG9+放疗,5 MOI+5 GY);细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组LNCaP细胞增殖能力的变化;Hoechst-33258染色法检测各组细胞的凋亡;Transwell迁移及侵袭实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞SPAG9蛋白、凋亡相关蛋白及侵袭相关蛋白的表达。两组间差异的比较采用独立样本 t检验,多组间差异比较采用One-way ANOVA分析。 结果:CCK-8结果显示,联合组LNCaP细胞的存活率为(46.02±2.20)%、病毒组为(56.83±2.40)%( t=12.855, P<0.01)、放疗组为(64.12±2.23)%( t=22.389, P<0.01)、PBS组为(99.63±2.72)%( t=59.407, P<0.01),各治疗组的细胞存活率均低于PBS组,差异有统计学意义( F=1407.384, P<0.01),联合组与单一治疗组比较,LNCaP细胞的存活率更低。Hoechst-33258染色实验结果显示,联合组LNCaP细胞的凋亡率为(55.80±1.49)%、病毒组为(36.42±1.78)%( t=-32.295, P<0.01)、放疗组为(30.01±1.80)%( t=-42.814, P<0.01)、PBS组为(9.30±1.53)%( t=-84.343, P<0.01),各治疗组的细胞凋亡率均高于PBS组,差异有统计学意义( F=2 010.396, P<0.01),联合组与单一治疗组比较,LNCaP细胞的凋亡更加明显。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,(1)迁移实验:联合组迁移细胞数为(102.60±16.03)个、病毒组为(163.67±11.00)个( t=12.166, P<0.01)、放疗组为(206.47±17.05)个( t=17.192, P<0.01)、PBS组为(304.73±17.16)个( t=33.345, P<0.01),各治疗组迁移细胞数均少于PBS组,差异有统计学意义( F=450.498, P<0.01),联合组迁移细胞数明显少于单一治疗组;(2)侵袭实验:联合组侵袭细胞数为(90.93±13.91)个、病毒组为(145.33±15.31)个( t=10.184, P<0.01)、放疗组为(191.33±13.32)个( t=20.187, P<0.01)、PBS组为(295.47±19.00)个( t=33.645, P<0.01),各治疗组侵袭细胞数均少于PBS组,差异有统计学意义( F=467.586, P<0.01),联合组侵袭细胞数明显少于单一治疗组。Western blot实验结果显示,联合组、病毒组、放疗组、PBS组内,SPAG9蛋白相对表达量分别为0.41±0.07、0.81±0.13、1.41±0.17、1.98±0.10,各治疗组SPAG9的相对表达量均低于PBS组,差异有统计学意义( F=98.785, P<0.01),联合组内SPAG9表达明显低于单一治疗组,差异有统计学意义( t=4.868、9.603, P<0.01);凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为1.51±0.11、1.26±0.05、1.11±0.07、0.64±0.10,各治疗组内Caspase-8的表达高于PBS组,差异有统计学意义( F=56.728, P<0.01),与单一治疗组比较,联合组内Caspase-8的上调更加显著,差异有统计学意义( t=-3.713、-5.499, P<0.05);侵袭相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为(1.44±0.05、0.26±0.06)、(1.23±0.05、0.56±0.01)、(0.91±0.06、0.79±0.07)、(0.25±0.04、1.21±0.07),各治疗组内E-cadherin表达高于PBS组,Vimentin表达低于PBS组,差异有统计学意义( F=287.276、138.020, P<0.01),与单一治疗组比较,联合组内E-cadherin的上调和Vimentin的下调更加显著,差异有统计学意义( t=-5.017、8.386, P<0.01; t=-10.982、10.034, P<0.01)。 结论:ZD55-SPAG9联合放疗可以显著抑制LNCaP细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡,效果优于单一治疗;机制可能是上调Caspase-8诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的上皮-间充质转化进程有关。
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编辑人员丨6天前
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一个早期婴儿型癫痫性脑病9型家系的临床特征及遗传学分析
编辑人员丨6天前
目的:分析一个早期婴儿型癫痫性脑病9型家系临床特征及遗传学特点。方法:采用N048:癫痫全面版基因检测panel-V2、基因拷贝数变异分析进行外周血检测,抽取羊水进行单核苷酸多态性微阵列(single nucleoticle polymorphism array, SNP-array)检测。结果:基因检测显示女婴Xq21.31q22.1区域杂合缺失,其中 PCDH19基因外显子缺失,变异来源于母亲。SNP-array检测示女性胎儿,arr [hg19] Xq21.31q22.1(89 558 626-99 701 006) ×1。此家系母女及胎儿均为早期婴儿型癫痫性脑病9型。 结论:PCDH19基因变异为该家系患早期婴儿型癫痫性脑病9型的可能原因。
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编辑人员丨6天前
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微小RNA-150在胆囊癌上皮-间充质转化中的作用及其机制
编辑人员丨6天前
目的:探讨微小RNA(miRNA,miR)-150与胆囊癌肿瘤上皮-间充质转化(EMT)的关系及其作用机制。方法:实时定量聚合酶链反应(qPCR)法检测河北医科大学第二医院2018年1月至2019年5月手术切除的30例胆囊癌肿瘤组织中miR-150的表达,以30例慢性胆囊炎组织为对照;qPCR法同时检测组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-9的mRNA表达,分析miR-150与这些基因的关系。应用miR-150 mimics转染人胆囊癌细胞株GBC-SD,划痕实验及Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭的改变;qPCR及蛋白质印迹法(Western blot)技术检测各基因mRNA和蛋白的变化。两样本均数比较采用 t检验。多样本均数比较时采用方差分析,方差分析后续的两两比较采用最小显著差异法(LSD)。两样本之间相关性比较采用线性相关分析。 结果:胆囊癌组织中miR-150和E-cadherin的mRNA表达均低于慢性胆囊炎组织( t=-7.035、-14.146, P<0.01);PCNA、N-cadherin、MMP-9的mRNA与慢性胆囊炎组织比较均明显增强( t=3.813、9.339、5.616, P<0.01)。miR-150表达与患者的肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关( t=3.228、2.396、-2.604, P<0.05)。Pearson相关分析显示,miR-150与E-cadherin呈正相关( r=0.630, P<0.05),与PCNA、N-cadherin、MMP-9表达呈负相关( r=-0.769、-0.628、-0.616, P<0.05)。转染miR-150 mimics后GBC-SD细胞的迁移侵袭能力减弱( F=1 965.860、114.940, P<0.01);转染后PCNA、N-cadherin、MMP-9表达降低,而E-cadherin表达增高( P<0.05)。 结论:胆囊癌组织中miR-150表达降低是肿瘤进展的因素,其机制可能在于miR-150通过调节一些基因表达参与肿瘤EMT过程。
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编辑人员丨6天前
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色素上皮衍生因子抑制肺癌A549细胞上皮-间充质转化
编辑人员丨6天前
目的:探讨色素上皮衍生因子(PEDF)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺癌A549细胞上皮-间充质转化(EMT)进程的影响及其分子机制。方法:选取肺癌A459细胞(购自中科院上海细胞生物研究所)为研究对象,使用TGF-β1建立EMT模型,分为正常组、TGF-β1处理组(TGF-β1,10 ng/ml)、PEDF处理组(TGF-β1,10 ng/ml;PEDF,20 nmol/L)和氯化锂(GSK-3β抑制剂,LiCl)处理组(TGF-β1,10 ng/ml;PEDF,20 nmol/L;LiCl,20 mmol/L)。光镜下观察各组A549细胞的形态变化;划痕实验观察细胞的迁移能力;免疫荧光法和免疫印迹法观察和检测各组钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达和分布。两组间比较采用 t检验。 结果:TGF-β1促使A549细胞呈狭长纺锤形变化,显著增加其迁移能力;PEDF部分逆转A549形态改变和迁移能力的增加;LiCl消除了PEDF的逆转作用。免疫荧光和免疫印迹结果显示,TGF-β1组α-SMA(0.973±0.081)、p-GSK-3β Ser9(0.875±0.065)和snail(0.562±0.049)高于正常组α-SMA(0.594±0.041)、p-GSK-3β Ser9(0.267±0.043)、snail(0.222±0.041, t=7.283、13.886、11.634, P值均<0.05),TGF-β1组E-cadherin(0.442±0.066)低于正常组E-cadherin(0.892±0.052, t=10.378, P<0.05);PEDF组α-SMA(0.712±0.063)、p-GSK-3β Ser9(0.566±0.067)和snail(0.354±0.056)低于TGF-β1组α-SMA(0.973±0.081)、p-GSK-3β Ser9(0.875±0.065)和snail(0.562±0.049, t=4.383、6.256、5.927, P值均<0.05),PEDF组E-cadherin(0.785±0.071)高于TGF-β1组E-cadherin(0.442±0.066, t=6.845, P<0.05);LiCl组α-SMA(1.021±0.083)、p-GSK-3β Ser9(0.750±0.050)和snail(0.687±0.032)高于PEDF组α-SMA(0.712±0.063)、p-GSK-3β Ser9(0.566±0.067)和snail(0.354±0.056, t=4.868、4.276、9.667, P值均<0.05),LiCl组E-cadherin(0.385±0.056)低于PEDF组E-cadherin(0.785±0.071, t=8.633, P<0.05)。 结论:PEDF通过调节p-GSK-3β Ser9/snail信号通路抑制TGF-β1诱导的A549细胞EMT进程。
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编辑人员丨6天前
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参附注射液抑制HMGB1诱发的CD11b +细胞麻痹对严重脓毒症内皮的保护作用
编辑人员丨6天前
目的:探讨严重脓毒症幼猪生化指标、肺部病理损伤与免疫机制间的相互关系,以及参附注射液的干预作用。方法:将2~3月龄巴拿马香猪按随机数字表法分为假手术组(Sham组;静脉注射生理盐水)、脂多糖(LPS)致严重脓毒症模型组(LPS组;静脉注射LPS 1 mg/kg,0.5 mg·kg -1·h -1维持12 h)、参附注射液干预组(SF组;制模同时静脉注射参附注射液10 mL/kg,每日2次),每组5只。制模后48 h取血检测C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、氧合指数(PaO 2/FiO 2)、剩余碱(BE)、血乳酸(Lac)等生化指标;取外周血行流式细胞检测,分析中性粒细胞数目〔髓过氧化物酶阳性(MPO +)〕及其激活亚群CD11b + CD64 +、M1型巨噬细胞(CD80 + CD64 +)、CD4 +和CD8 + T细胞的变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆细胞因子水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理损伤;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织损伤相关分子及其受体、趋化因子、炎性因子、血管内皮相关分子、紧密连接蛋白的mRNA表达。 结果:与Sham组比较,LPS组CRP、PCT、Lac水平明显升高,PaO 2/FiO 2、BE明显下降;外周血CD80 + CD64 +、CD11b + CD64 +、MPO +、CD4 +和CD8 + T细胞数、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显降低,白细胞介素-10(IL-10)、内皮细胞生长因子(VEGF)水平明显升高;肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、促血管生成素2/1(Ang2/Ang1)的mRNA表达均明显升高,Toll样受体9(TLR9)、趋化因子(CXCL9、CXCL10)、TNF-α、IL-27、内皮细胞TEK酪氨酸激酶2(TIE2)、紧密连接蛋白血管内皮-钙黏蛋白(VE-CAD)和封闭蛋白(Occludin)的mRNA表达均明显下降;HE染色显示,肺泡腔炎性细胞浸润渗出、肺泡实变及肺泡间质层明显增厚、肺气肿。与LPS组比较,SF组Lac明显下降(mmol/L:4.2±1.0比6.3±1.1, P<0.05),BE、PaO 2/FiO 2明显升高〔BE(mmol/L):-6.4±2.6比-11.6±2.5,PaO 2/FiO 2(mmHg,1 mmHg=0.133 kPa):180±36比105±35,均 P<0.05〕,CD80 + CD64 +、CD11b + CD64 +、MPO +细胞比例均明显上升〔CD80 + CD64 +:(7.13±2.01)%比(3.80±0.46)%,CD11b + CD64 +:(8.33±2.55)%比(2.15±0.47)%,MPO +:(21.22±2.33)%比(8.31±0.46)%,均 P<0.05〕;肺组织HMGB1、RAGE的mRNA表达有一定程度下降〔HMGB1 mRNA(2 -ΔΔCT):1.81±0.45比2.23±0.85,RAGE mRNA(2 -ΔΔCT):6.69±3.48比11.60±6.91,均 P<0.05〕,CXCL9和TIE2的mRNA表达有一定程度上升〔CXCL9 mRNA(2 -ΔΔCT):1.06±0.63比0.50±0.12,TIE2 mRNA(2 -ΔΔCT):1.42±0.68比0.27±0.16,均 P<0.05〕;肺组织病理改变明显减轻。 结论:BE、Lac、PaO 2/FiO 2的加重,免疫耗竭、麻痹和无能,可能是导致严重脓毒症幼猪肺脏致死性损伤的重要因素,该损伤可能与HMGB1及其受体RAGE过度活化,TLR9和相应趋化因子及炎性因子受到抑制,导致血管内皮细胞损伤加重和紧密连接蛋白表达减少的毛细血管渗漏机制相关。参附注射液改善严重肺炎并脓毒症的免疫紊乱可能与上调外周血M1型巨噬细胞和激活中性粒细胞、抑制HMGB1及其受体RAGE表达、上调CXCL9和TIE2表达有关。
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编辑人员丨6天前
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加味参苓白术散对不同含糖量腹膜透析液诱导大鼠腹膜纤维化的干预作用
编辑人员丨6天前
目的:探讨加味参苓白术散对不同含糖量腹膜透析液(PDF)诱导腹膜纤维化大鼠腹膜组织病理学改变和细胞外基质(ECM)的影响及其机制。方法:将70只雄性SD大鼠按照单纯随机抽样原则分为对照组、不同含糖量PDF模型组及其相应中药干预组,每组10只。分别腹腔注射含糖量为1.5%、2.5%、4.25%的PDF 100 mL·kg -1·d -1诱导大鼠腹膜纤维化模型,每日1次,连续8周;对照组大鼠给予等量生理盐水。各中药干预组大鼠每日于制模后即刻灌胃加味参苓白术散溶液10 mL/kg(每升含2.014 kg生药);各PDF模型组及对照组大鼠灌胃等量生理盐水。8周后,检测各组大鼠腹膜超滤量。取腹膜组织,苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察壁层腹膜形态学改变及腹膜厚度;Masson染色后,光镜下观察腹膜胶原纤维沉积情况;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定腹膜组织中ECM主要成分E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)的表达;采用免疫组化法检测ECM调控因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的阳性表达。 结果:与对照组比较,不同含糖量PDF均可诱导大鼠发生腹膜纤维化,且纤维化程度随含糖量增加而逐渐加重,表现为腹膜增厚,胶原纤维沉积增加,腹膜超滤量减少,伴随腹膜组织中E-cadherin、MMP-9表达下调,α-SMA、Vimentin、TIMP-1、TGF-β1表达上调,以4.25% PDF模型组腹膜组织病理学改变及ECM聚积情况更加严重。经加味参苓白术散干预后,与相应PDF模型组比较,大鼠腹膜纤维化均得到不同程度改善,仍以4.25% PDF相应中药干预组效果更为显著,壁层腹膜明显变薄(μm:101.86±16.01比140.65±10.13, P<0.05),胶原纤维沉积明显减少,腹膜超滤量明显增加(mL:-0.01±3.45比-3.53±1.84, P<0.05),同时腹膜组织中E-cadherin、MMP-9表达明显上调〔E-cadherin蛋白(E-cadherin/β-actin):0.84±0.08比0.28±0.05,MMP-9( A值):0.60±0.15比0.37±0.01,均 P<0.05〕,α-SMA、Vimentin、TIMP-1、TGF-β1表达明显下调〔α-SMA蛋白(α-SMA/β-actin):0.36±0.08比1.05±0.09,Vimentin蛋白(Vimentin/β-actin):0.53±0.07比1.19±0.04,TIMP-1( A值):0.49±0.06比0.87±0.02,TGF-β1( A值):0.67±0.04比0.89±0.10,均 P<0.05〕。 结论:大鼠腹膜纤维化程度随PDF含糖量增加而逐渐加重;加味参苓白术散对不同含糖量PDF诱导的大鼠腹膜纤维化均有一定改善作用,其机制与调节纤维化标志物表达及减少ECM聚积有关。
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编辑人员丨6天前
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溶瘤腺病毒差异显示编码3-ZD55-精子相关抗原9对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞的治疗效果
编辑人员丨6天前
目的:观察溶瘤腺病毒差异显示编码3(DD3)-ZD55-精子相关抗原9(SPAG9)在体外对激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞的治疗效果,并探讨作用机制。方法:将LNCaP细胞分为4组进行干预,分别为磷酸盐缓液组(PBS)、病毒对照组[ZD55-增强型绿色荧光蛋白(EGFP),10 MOI]、病毒治疗组(ZD55-SPAG9,10 MOI)、DD3启动子调控组(DD3-ZD55-SPAG9,10 MOI)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率;Transwell检测细胞迁移和侵袭能;蛋白质印迹法(Western blot)检测SPAG9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和腺病毒早期区1A基因(E1A)的表达。多组之间采用方差分析,进一步组间比较采用SNK法。结果:CCK-8结果,DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组LNCaP细胞存活率均显著低于PBS组[(73.80 1.43)%、(73.66 2.19)%、(81.79 2.59)%比100%, F=1038.210, P<0.01],ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞存活率降低更为显著,但两者之间存活率差异无统计学意义( P>0.05)。Transwell迁移结果,DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组小室底膜细胞数明显低于PBS组[(52.57±5.57)、(48.67±4.04)、(69.67±6.02)比(109.06±9.54), F=384.466, P<0.05],ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞迁移能力降低更为显著,且两者之间差异无统计学意义( P>0.05)。侵袭实验结果,DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组穿透Matrigel胶,进入小室下层的细胞数目明显少于PBS组[(58.33±3.79)、(55.36±7.51)、(78.06±4.36)比(115.67±11.59), F=305.885, P<0.01],提示细胞侵袭能力显著降低,ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组细胞侵袭能力降低更为显著。Western blot结果显示,与PBS组比较,DD3-ZD55-SPAG9组、ZD55-SPAG9组和ZD55-EGFP组内SPAG9蛋白表达下调[(0.32±0.07)、(0.47±0.09)、(0.66±0.05)比1, F=594.522, P<0.01],E-cadherin表达上调[(4.80±0.34)、(3.80±0.35)、(2.81±0.52)比1, F=482.275, P<0.01],Vimentin表达下调[(0.33±0.04)、(0.46±0.06)、(0.53±0.05)比1, F=903.749, P<0.01],MMP-2表达下调[(0.30±0.03)、(0.44±0.05)、(0.60±0.05)比1, F=1 540.940, P<0.01],上述变化在ZD55-SPAG9组与DD3-ZD55-SPAG9组内更为显著。WPMY-1细胞内E1A在DD3-ZD55-SPAG9组内的表达明显低于ZD55-SPAG9和ZD55-EGFP组。 结论:溶瘤腺病毒DD3-ZD55-SPAG9在体外可以有效降低LNCaP细胞的存活率,并抑制迁移和侵袭,并对正常细胞具有更高的安全性。
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编辑人员丨6天前
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高分组前列腺癌组织中PCDH9表达缺失且与p53、Rb、STAT3的表达相关
编辑人员丨2周前
目的 探讨前列腺癌中原钙黏蛋白9(PCDH9)的表达缺失在调控细胞周期、促进肿瘤进展中的作用.方法 选取南充市中心医院病理科2018-2023年存档的前列腺癌样本127例,其中根据世界卫生组织/国际泌尿病理协会分级标准(WHO/ISUP)分组为G4~5组的石蜡组织标本87例,G1~3组的石蜡组织标本40例.应用免疫组织化学染色检测前列腺癌组织中PCDH9和细胞周期相关蛋白人类肿瘤抑制蛋白53(p53)、视网膜母细胞瘤(Rb)肿瘤抑制蛋白及信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达情况,分析其表达与临床病理特征的关系.结果 PCDH9在G4~5组前列腺癌组织中的表达缺失率(44.8%vs.7.5%)显著高于G1~3组(P<0.001).G4~5组前列腺癌组织中p53、STAT3的阳性表达率分别为34.5%、89.7%,Rb的表达缺失率为27.6%.PCDH9、Rb的表达缺失与是否伴有神经内分泌样组织学形态、神经侵犯和脉管侵犯相关(P<0.05).高分组前列腺癌组织中,PCDH9 表达与 p53(r=0.345,P<0.05)、Rb(r=0.503,P<0.05)及 STAT3(r=0.224,P<0.05)的表达呈正相关.结论 PCDH9在高分组前列腺癌组织中易发生表达缺失,且表达缺失患者常伴有神经内分泌样组织学形态,高分组前列腺癌中PCDH9表达缺失可能通过STAT3信号通路调控细胞周期,进而促进肿瘤的进展.
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编辑人员丨2周前
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蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子的表达对脑胶质瘤患者的预后意义及其作用机制的探讨
编辑人员丨2周前
目的 探讨蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子(CIP2A)的表达对脑胶质瘤患者的临床预后、胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 自中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)提取脑胶质瘤CIP2A mRNA表达的相关数据和临床资料,分析CIP2A在胶质瘤中的表达情况;随后选取67例来源于2016年1月至2018年10月贵阳市第二人民医院神经外科的胶质瘤手术标本,采用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织的CIP2A表达水平.基于CGGA数据库资料,比较不同性别、年龄、世界卫生组织(WHO)分级、异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变状态、染色体1p/19q共缺失状态、肿瘤类别(原发、复发、继发)、放化疗胶质瘤患者间CIP2A表达的差异.采用Kaplan-Meier生存分析、单因素Cox和多因素Cox回归模型及受试者工作特征(ROC)曲线探讨CIP2A的表达水平在胶质瘤患者预后评估中的价值.应用siRNA干扰U87和U251细胞中CIP2A的表达;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测U87和U251细胞中CIP2A的表达水平;采用划痕实验和Transwell实验检测CIP2A基因沉默对U87和U251细胞迁移和侵袭能力的影响,以蛋白质免疫印迹实验检测U87和U251细胞中CIP2A蛋白、E钙黏蛋白(E-Cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9的表达水平.结果 CGGA数据库中,CIP2A mRNA的表达随着脑胶质瘤病理学级别的升高而增强(F=49.32,P<0.001);CIP2A低表达组患者的总生存期长于高表达组(CGGA数据库资料:P<0.001;临床样本资料:P<0.05).CIP2A高表达与肿瘤类别(复发和继发)、IDH野生型、1p/19q非共缺失显著相关,差异均有统计学意义(均P<0.001).ROC曲线分析显示,CIP2A mRNA表达水平预测脑胶质瘤患者1、3、5年生存率的曲线下面积分别为0.72、0.74和0.73.多因素Cox回归模型分析显示,CIP2A高表达、高龄、肿瘤复发或继发以及高级别肿瘤是脑胶质瘤患者预后的独立危险因素(均P<0.001).siRNA可抑制胶质瘤细胞U87和U251中CIP2A mRNA和蛋白的表达(均P<0.05),低表达CIP2A的U87和U251细胞的划痕愈合能力、细胞迁移和侵袭能力均明显下降(均P<0.05).低表达CIP2A的U87和U251细胞E-Cadherin的表达上调,而MMP2、MMP9蛋白的表达下调(均P<0.05).结论 CIP2A在脑胶质瘤中呈高表达并提示脑胶质瘤患者的预后不良,可能能够作为脑胶质瘤的相关预测标志物.CIP2A低表达可能通过调控上皮-间质转化抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭.
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编辑人员丨2周前