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静态机械牵张力对HPDLSCs和PPDLSCs破骨相关基因表达的影响
编辑人员丨4天前
目的:探讨健康牙周组织来源的牙周膜干细胞(HPDLSCs)和牙周病组织来源的牙周膜干细胞(PPDLSCs)在静态机械牵张力作用下破骨相关基因表达的异同.方法:采用低密度接种法分离培养HPDLSCs和PPDLSCs,应用流式细胞仪对两种细胞的表面间充质干细胞标记物表达进行检测,使用Flexcell Tension Unit对HPDLSCs和PPDLSCs进行不同力值静态机械牵张力(SMS)加载,实时定量RT-PCR检测HPDLSCs和PPDLSCs中破骨相关基因RANKL和C-fos的表达.结果:间充质干细胞表面标记物STRO-1、CD146、CD90、CD29在HPDLSCs和PPDLSCs中均强阳性表达,且HPDLSCs中的表达显著高于PP-DLSCs(P<0.05).在未加载SMS情况下,PPDLSCs中RANKL和C-fos的表达水平明显高于HPDLSCs(P<0.05);当加载SMS≤12%形变量时,HPDLSCs中两种破骨相关基因的表达水平较未加力时无明显变化(P>0.05),而形变量达到14%时,二者的表达显著上调(P<0.05);在PPDLSCs组,当SMS≤8%形变量时,RANKL和C-fos的表达无明显变化(P>0.05),而SMS≥10%形变量时,可明显激活两种破骨基因的表达(P<0.05).结论:HPDLSCs和PPDLSCs对SMS的反应不同,过大的静态牵张力会导致PPDLSCs表达破骨相关基因增强.
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编辑人员丨4天前
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人脐带间充质干细胞尾静脉移植对围绝经期大鼠卵巢凋亡相关蛋白的影响
编辑人员丨4天前
目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)移植对围绝经期大鼠卵巢功能改善情况.方法:选取13~15 月龄雌性大鼠30 只,构建围绝经期大鼠模型.将围绝经期鼠分为hUCMSCs移植组和空白组,每组 15 只,另选 15 只健康雌性大鼠为青年对照组.hUCMSCs移植前,检测大鼠血清E2、AMH、FSH水平;hUCMSCs移植后 2、3、4 周,每组随机选取5 只大鼠检测血清E2、AMH、FSH,并取卵巢组织检测Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表达水平.结果:hUCMSCs移植后,hUCMSCs组大鼠E2、AMH高于空白组,FSH低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);hUCMSCs组大鼠卵巢始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡、窦状卵泡数均多于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);移植后4 周hUCMSCs组大鼠卵巢组织中Bcl-2、Bcl-2/Bax高于空白组,Bax、Caspase-3 低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:hUCMSCs移植后大鼠E2、AMH升高,FSH降低;卵巢组织中Bcl-2、Bcl-2/Bax比率提高,Bax、Caspase-3 下降,进一步支持了hUCMSCs在调节卵巢细胞凋亡过程中可能发挥作用.
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编辑人员丨4天前
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预处理间充质基质细胞免疫调控巨噬细胞的研究进展
编辑人员丨4天前
间充质基质细胞(MSCs)是一种具有多向分化和自我更新潜能的干细胞,除了干细胞潜能外,最近因其在免疫反应中的调控作用而受到广泛关注。巨噬细胞是一种固有免疫细胞,在炎症起始和消散中发挥关键作用,可极化为经典活化的促炎M1型巨噬细胞和选择性活化的抗炎M2型巨噬细胞,通过调控巨噬细胞可以调节炎性反应。研究表明,低氧、生物活性分子和热等预处理方式可改变MSCs的免疫调控能力。在此,笔者总结了经不同方式预处理的MSCs对巨噬细胞免疫调控作用及其在疾病治疗中的研究进展。
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编辑人员丨4天前
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长链非编码RNA同源盒A簇反义RNA 2调控Zeste同源物增强子2表达对体外人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
编辑人员丨4天前
目的:基于Zeste同源物增强子2(EZH2)探究长链非编码RNA(lncRNA)同源盒A簇反义RNA 2(HOXA-AS2)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化的影响及机制。方法:将体外培养hBMSC分为对照组(Control组)、si-NC组、HOXA-AS2沉默组、pcDNA3.1-NC组、HOXA-AS2过表达组、HOXA-AS2沉默+si-EZH2组共6组,转染24 h后采用hBMSC成骨分化培养基诱导成骨分化。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HOXA-AS2、EZH2 mRNA表达;茜素红染色观察钙结节的形成情况;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒测量ALP活性;蛋白质印迹法(Western blot)检测EZH2、Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)蛋白表达。两组间比较采用 t检验,多组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)。 结果:HOXA-AS2沉默组中ALP活性、RUNX2、OPN表达明显低于Control组(0.63±0.09比1.00±0.00, t=5.610, P<0.05;0.27±0.04比0.48±0.06, t=5.412, P<0.05;0.20±0.04比0.36±0.04, t=5.032, P<0.05),差异有统计学意义;EZH2 mRNA(2.65±0.14比1.00±0.00, t=31.726, P<0.05)和蛋白(1.25±0.10比0.77±0.09, t=10.182, P<0.05)表达明显高于Control组,差异有统计学意义。HOXA-AS2过表达组结果与HOXA-AS2沉默组相反。在沉默HOXA-AS2的基础上敲低EZH2的表达逆转了沉默HOXA-AS2对hBMSC成骨分化能力的抑制作用。 结论:过表达HOXA-AS2可能通过下调EZH2的表达,促进hBMSC成骨分化。
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编辑人员丨4天前
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间充质干细胞在鼻黏膜损伤缺失后再生中的研究进展
编辑人员丨4天前
鼻黏膜是上呼吸道系统的第一道防御屏障,在抵御外来不良刺激,维持鼻腔正常生理功能方面起到重要作用。鼻黏膜广泛损伤缺失后,其愈合常受到各种生长因子、细胞因子及蛋白酶等因素的干扰而导致再生鼻黏膜的功能障碍。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)具有归巢性、免疫调节功能,分泌细胞因子和促进生长因子增殖等优势,可通过分泌生长因子、细胞因子及白介素等,加快再上皮化过程和纤毛再生的速度,从而促进鼻黏膜损伤缺失后的再生过程。将MSC运用到功能性鼻内窥镜手术或鼻颅底外科手术产生的缺损中,可提高鼻黏膜的再生活性。目前MSC在鼻黏膜再生治疗方面仍处于探索阶段,本文就此作一综述,为将来临床上该方法的进一步研究和运用提供依据。
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编辑人员丨4天前
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骨髓间充质干细胞可减轻脂多糖所致肾损伤大鼠的细胞焦亡
编辑人员丨4天前
目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对肾损伤大鼠体内细胞焦亡的影响及其机制。方法:体外分离培养4~5周龄清洁级雌性SD大鼠的BMSC,取第3代细胞用于后续实验。采用成组设计,随机将15只6周龄清洁级雌性SD大鼠分为对照组、肾损伤模型组和BMSC组,每组5只。采用经尾静脉注射脂多糖(LPS)1 mg/kg构建肾损伤模型;对照组以相同途径给予等量生理盐水。BMSC组于制模后2 h经尾静脉注射BMSC 0.5 mL(含BMSC 2×10 6个);肾损伤模型组和对照组给予等量生理盐水。于术后3 d取各组大鼠腹主动脉血,采用苦味酸法检测血肌酐(SCr)水平,采用二乙酰一肟法检测血尿素氮(BUN)水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血胱抑素C(Cys C)和白细胞介素(IL-1β、IL-18)水平。处死大鼠取肾组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测大鼠肾组织NOD样受体蛋白3(NLRP3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)的mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测大鼠肾组织NLRP3、caspase-1的蛋白表达。 结果:体外培养显示,骨髓细胞悬液培养24 h后出现大量圆形贴壁细胞和悬浮细胞,培养4~5 d后有大量长梭形细胞聚集性贴壁生长,仍可见明显的杂质细胞,经胰酶消化并传代至第3代以长梭形贴壁细胞为主,基本纯化为BMSC。体内实验显示,与对照组比较,肾损伤模型组大鼠SCr、BUN、Cys C、IL-1β、IL-18水平均明显升高〔SCr(μmol/L):85.22±2.29比21.80±0.59,BUN(mmol/L):11.50±0.64比5.86±0.83,Cys C(mg/L):0.13±0.01比0.11±0.02,IL-1β(ng/L):31.49±1.42比4.74±0.49,IL-18(ng/L):29.01±1.95比1.52±0.03,均 P<0.05〕,NLRP3及caspase-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显升高〔NLRP3 mRNA(2 -ΔΔCt):3.635±0.296比1.000±0.002,caspase-1 mRNA(2 -ΔΔCt):4.020±0.228比1.001±0.003;NLRP3蛋白(NLRP3/β-actin):1.560±0.868比0.902±0.036,caspase-1蛋白(caspase-1/β-actin):1.392±0.097比0.895±0.046,均 P<0.05〕。与肾损伤模型组比较,BMSC组大鼠SCr、BUN、IL-1β、IL-18水平均明显下降〔SCr(μmol/L):51.64±3.84比85.22±2.29,BUN(mmol/L):9.90±0.46比11.50±0.64,IL-1β(ng/L):24.20±1.45比31.49±1.42,IL-18(ng/L):12.97±1.25比29.01±1.95,均 P<0.05〕,NLRP3及caspase-1的mRNA和蛋白表达水平也均明显下降〔NLRP3 mRNA(2 -ΔΔCt):1.488±0.136比3.635±0.296,caspase-1 mRNA(2 -ΔΔCt):1.643±0.143比4.020±0.228;NLRP3蛋白(NLRP3/β-actin):1.227±0.053比1.560±0.868,caspase-1蛋白(caspase-1/β-actin):1.159±0.107比1.392±0.097,均 P<0.05〕。 结论:在体内,BMSC可以减轻LPS所致肾损伤大鼠的细胞焦亡。
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编辑人员丨4天前
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难治性黄斑裂孔治疗研究进展
编辑人员丨4天前
难治性黄斑裂孔是指玻璃体切割、内界膜剥除、眼内填充和术后俯卧位等方法难以使裂孔闭合且视力预后较差的黄斑裂孔,主要包括大直径、长病程、外伤性、继发性、高度近视性,初次手术后未闭合的黄斑裂孔。目前手术治疗方法主要包括扩大内界膜剥除术、黄斑裂孔充填术(内界膜翻转覆盖术,内界膜填塞术,晶状体前、后囊膜填塞术,自体视网膜神经上皮层移植术)、自体骨髓间充质干细胞或外泌体移植术和玻璃体腔填充术。而干细胞或外泌体移植术、新型长效内填充物术的应用及其手术技巧的改进可促进黄斑裂孔的原位愈合,是未来较有前景的治疗手段。目前所有手术方式的目标均为促使黄斑裂孔内的胶质增生以最大程度地闭合裂孔。依照循证医学证据进行更具有针对性的个体化治疗是未来发展趋势。本文就近年来难治性黄斑裂孔治疗研究进行综述,以期提高临床医师对难治性黄斑裂孔的认知并为优化和规范其治疗方案提供参考。
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编辑人员丨4天前
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脂肪源性间充质干细胞免疫调节作用的研究与应用
编辑人员丨4天前
脂肪源性间充质干细胞(ADSC)因其存量丰富、易于获取、免疫原性低等特点,已经成为近年来再生医学和干细胞领域的研究热点。ADSC不仅能与T细胞、巨噬细胞和B细胞等免疫细胞作用而直接参与调节免疫系统,还能通过分泌可溶性细胞因子,如白介素、生长因子和细胞外囊泡等进行间接调节。ADSC的免疫调节作用已经在多项体内、外实验中得到证实,也已被尝试应用于临床治疗多种免疫相关性疾病并取得良好效果,如硬皮病、系统性红斑狼疮和特应性皮炎等。该文就ADSC免疫调节作用的直接机制、间接机制以及临床应用进行总结,并对其研究方向与应用前景进行展望。
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编辑人员丨4天前
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银屑病患者皮损间充质干细胞的培养鉴定及其表达HES1和CXCL6的研究
编辑人员丨4天前
目的:培养鉴定银屑病患者皮损处真皮间充质干细胞(DMSC),并研究DMSC的发状分裂相关增强子1(HES1)和趋化因子配体6(CXCL6)表达情况。方法:分离培养15例银屑病患者皮损及18例健康人(健康对照组)皮肤的DMSC,利用流式细胞仪进行表型鉴定,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹(Western blot)检测HES1和CXCL6的mRNA及蛋白表达水平,两组间比较采用 t检验。 结果:银屑病组DMSC形态与健康对照组无差异,但HES1和CXCL6基因的mRNA水平分别是对照组的3.56和3.44倍,且差异有统计学意义( P < 0.05)。在蛋白水平,银屑病组DMSC中HES1和CXCL6的表达明显高于对照组( P < 0.05)。 结论:银屑病患者皮肤DMSC HES1及CXCL6表达升高可能参与银屑病的发病。
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编辑人员丨4天前
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间充质干细胞源性外泌体治疗肝衰竭的研究进展
编辑人员丨4天前
肝衰竭是由于各种致病因素造成肝细胞大量坏死,超过肝脏的自我修复能力,是一种严重的临床综合征,病情进展迅速,病死率高。肝移植是肝衰竭最有效的治疗手段,但是存在供肝不足、费用高昂等弊端。间充质干细胞在肝衰竭的临床疗效已得到证实,但其应用也受到一定限制,基于干细胞的无细胞疗法,尤其是间充质干细胞来源的外泌体成为近年来的研究热点。现就间充质干细胞源性外泌体在肝衰竭中应用的研究进展进行综述。
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编辑人员丨4天前