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EGCG-PLGA纳米粒子减轻心肌缺血损伤的作用及机制研究
编辑人员丨4天前
目的:构建基于聚乳酸—羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒子的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)药物递送系统,研究其对心肌缺血损伤的作用及机制.方法:改进现有EGCG-PLGA纳米粒子(E-P-NPs)制备工艺,以透射电镜观察所制备的E-P-NPs形态,并测量聚合物分散性指数、Zeta电位、纳米粒径和载药率,进行纳米粒表征;以荧光标记法观察心肌细胞对纳米粒子的摄取情况.体外建立心肌细胞缺氧模型,体内建立小鼠急性心肌缺血损伤模型,检测不同浓度E-P-NPs对细胞活力、细胞凋亡、心肌肌钙蛋白I(cTn-I)水平及Bcl-2、Caspase9、Bax表达的影响.结果:E-P-NPs呈圆球形,多分散性指数(PDI)为0.285,平均粒径193.5 nm,电位-28.7 mV,载药率9.23%,可被心肌细胞摄取.体内、外实验研究均表明,E-P-NPs可剂量依赖性地增强心肌细胞活力,降低cTn-I水平,降低凋亡率,上调Bcl-2蛋白表达,下调Caspase9、Bax蛋白表达,抑制细胞凋亡;E-P-NPs对缺血心肌的保护作用优于EGCG.结论:E-P-NPs粒径分布较集中,均一性较好,可通过抑制凋亡减轻心肌缺血损伤,且能使EGCG更好地发挥药效.
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编辑人员丨4天前
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基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路探讨丹皮酚改善酒精性肝、脑损伤小鼠氧化应激损伤与炎症的作用机制
编辑人员丨4天前
目的 探讨丹皮酚基于Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白 1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1)/核因子 E2 相关因子 2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)信号通路改善乙醇刺激所致小鼠肝、脑炎症和氧化应激损伤的作用机制.方法 将 C57BL/6 小鼠随机分为空白组,模型组,水飞蓟宾组(36.8 mg/kg),丹皮酚高、中、低(480、240、120 mg/kg)剂量组,每组 15 只;适应期各组小鼠自由饮用 Liber-DeCarli对照液体饲料,模型复制期空白组小鼠自由饮用 Lieber-DeCarli对照液体饲料,其他组小鼠自由饮用 Lieber-DeCarli乙醇液体饲料并连续灌胃相对应的药液 10d;测定小鼠血脂[三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)]、肝功能[丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)]、炎症因子[白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1α、IL-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α)]以及氧化应激指标[过氧化氢酶(catalase,CAT)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)]水平;采用苏木精—伊红染色法、油红 O染色观察各组小鼠肝、脑组织形态变化;采用 Western blot法、免疫荧光法以及 qRT-PCR法检测小鼠肝、脑组织Keap1/Nrf2/ARE信号通路相关蛋白及 mRNA表达水平.结果 与模型组比较,丹皮酚高剂量组小鼠体质量显著增加(P<0.05),血脂(TG、TC)、肝功能(ALT、AST)、炎症因子(IL-6、IL-1α、IL-1β、TNF-α)、氧化应激指标(CAT、GSH、SOD)水平显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05);小鼠肝、脑组织 Nrf2、血红素氧合酶-1、醌 NADH脱氢酶 1、谷氨酸—半胱氨酸连接酶催化亚基蛋白及 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),Keap1 蛋白及 mRNA表达水平显著降低(P<0.05);丹皮酚高剂量组小鼠肝、脑组织病理状态明显改善.结论 丹皮酚能显著减轻乙醇诱导的小鼠肝、脑炎症和氧化应激损伤,其机制可能是通过调控 Keap1/Nrf2/ARE信号通路实现的.
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编辑人员丨4天前
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SR8278改善时差所致小鼠泪腺功能紊乱的转录组学分析
编辑人员丨4天前
目的 探讨核受体亚家族1 D组成员1(NR1D1)合成拮抗剂SR8278在改善时差诱导的小鼠眶外泪腺结构和功能损伤方面的作用及其机制.方法 36只健康的8~10周龄野生型C57BL/6J小鼠在12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱内适应2周后随机分为3组:正常组(12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱饲养)、时差组(8 h前移的12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱饲养)及时差+SR8278组(8 h前移的12 h光照/12 h黑暗循环的昼夜节律箱饲养,并给予25 mg·kg-1的SR8278干预),每组12只,共干预5 d.干预结束后,收集各组小鼠的活动度和核心体温,记录小鼠的泪液分泌量,并对泪腺组织进行称重和泪腺细胞大小测量.采用免疫组织化学方法对小鼠眶外泪腺进行组织学评估.提取泪腺RNA进行包含NR1D1的高通量RNA-Seq分析,并对获得的转录组数据进行KEGG和GO功能富集分析.结果 与正常组相比,时差组小鼠白天活动度较高,夜间活动度较低,白天核心体温较高,夜间核心体温较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与时差组相比,时差+SR8278组小鼠白天活动度较低,夜间活动度较高,白天核心体温较低,夜间核心体温较高,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与正常组相比,时差组小鼠泪腺重量及泪液分泌量降低,泪腺细胞增大,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与时差组相比,时差+SR8278组小鼠泪腺重量及泪液分泌量增加,泪腺细胞减小,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与正常组相比,时差组小鼠夜晚泪腺中NR1D1表达量较高;与时差组相比,时差+SR8278组小鼠夜晚泪腺中NR1D1表达量较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05).生物信息学分析显示,时差组和时差+SR8278组共有947个显著性差异基因,其中显著性上调基因43个,显著性下调基因904个,信号通路差异最大的为Notch信号通路.结论 SR8278通过靶向抑制NR1D1,有效增强了时差小鼠的泪液分泌功能,其过程可能是通过Notch信号通路完成的.
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编辑人员丨4天前
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人参皂苷Rb1调控MAPK通路改善小鼠脑缺血再灌注诱导血脑屏障损伤的作用研究
编辑人员丨4天前
目的 探讨人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注诱导的血脑屏障(BBB)损伤的作用及机制.方法 将C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组和人参皂苷Rb1低、中、高剂量(5、10、20mg·kg-1)组,采用线栓法栓塞颈内动脉1h后复灌建立脑缺血再灌注损伤模型,假手术组不栓塞,其余操作同模型小鼠.缺血1h后ip相应药物,于再灌注24h后处死取材.采用伊文思蓝染色法检测各组小鼠BBB损伤程度;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组小鼠脑组织中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及紧密连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的mRNA表达水平;同时采用Western blotting检测各组小鼠脑组织中ZO-1、Occludin蛋白,金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及MAPK通路相关蛋白磷酸化的表达水平.结果 与模型组相比,人参皂苷Rb,可显著减少脑缺血再灌注小鼠脑组织中伊文思蓝的渗漏量(P<0.05),显著降低脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA转录水平(P<0.05、0.01);显著上调ZO-1和Occludin的mRNA转录和蛋白表达水平(P<0.05、0.01);显著降低MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平(P<0.05、0.01);显著抑制MAPK通路p38、JNK及ERK磷酸化蛋白的表达(P<0.05、0.01).结论 人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注诱导的BBB损伤具有一定的改善作用,其作用机制可能与抑制MAPK信号通路激活,减少MMP-2、MMP-9蛋白的表达,进而减轻对ZO-1、Occludin等紧密连接蛋白的降解有关.
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编辑人员丨4天前
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利多卡因调节Hippo-YAP信号通路对原位肝移植大鼠缺血再灌注损伤的影响
编辑人员丨4天前
目的 探究利多卡因(LID)对原位肝移植(OLT)大鼠缺血再灌注损伤的影响,并分析其作用机制.方法 随机将60只大鼠平均分为维替泊芬(Verteporfin)组、LID高剂量组、LID中剂量组、LID低剂量组、模型组和对照组,除对照组大鼠外的其余大鼠构建OLT模型.苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织的病理变化,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肝组织炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6、IL-1β和IL-10水平,荧光探针法检测活性氧(ROS),硫代巴比妥酸显色法检测丙二醛(MDA),氮蓝四唑显色法检测超氧化物歧化酶(SOD),分光光度计法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),原位末端标记法(TUNEL)检测肝组织细胞凋亡,蛋白印迹法(Western blot)检测Hippo-YAP信号通路相关蛋白哺乳动物STE20样蛋白激酶(MST1)、磷酸化(p)-MST1、大肿瘤抑制因子1(LATS1)、p-LATS1、Yes相关蛋白(YAP)、p-YAP以及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达.结果 与对照组相比,模型组大鼠肝组织出现损伤,肝细胞坏死且大量炎性细胞浸润,细胞凋亡率、血清 AST、ALT、TBIL、LDH 活性、肝组织 TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax 水平显著升高,肝组织 IL-10、SOD、GSH-Px及 Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP 蛋白表达降低(P<0.05);与模型组相比,LID 低、中、高剂量组的肝组织损伤减轻,细胞凋亡率、血清AST、ALT、TBIL、LDH活性、肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、ROS、Bax水平显著降低,肝组织 IL-10、SOD、GSH-Px 及 Bcl-2、p-MST1/MST1、p-LATS1/LATS1、p-YAP/YAP 蛋白表达的水平显著升高(P<0.05);Hippo-YAP信号通路抑制剂Verteporfin逆转了 LID对OLT大鼠缺血再灌注损伤的改善作用(P<0.05).结论 LID可能通过激活Hippo-YAP通路,减少炎症反应、氧化应激和肝细胞凋亡,对OLT大鼠肝缺血再灌注损伤发挥改善作用.
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编辑人员丨4天前
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雪衣藻叶绿素荧光特性及抗氧化系统对汞胁迫的响应
编辑人员丨4天前
文章选用对汞(Hg)具有较强耐受性的雪衣藻(Chlamydomonas nivalis)为对象,探究藻细胞对汞胁迫的响应及其耐受机制.结果表明,Hg2+对藻细胞的胁迫具有明显的时间依赖的量效关系,48h半数效应浓度EC50为1.44 mg/L.与对照组相比,1.0和1.5 mg/L Hg2+处理组能维持生长和光合活性;2.0 mg/L Hg2+处理组生物量和色素含量在胁迫6h时无显著变化(P>0.05),48h时均显著降低(P<0.05).随着Hg2+浓度和暴露时间的增加,藻细胞最大光化学量子产率(Fv/Fm)、最大电子传递速率(ETRmax)、半饱和光强(Ik)及光能利用效率(α)均降低,OJIP快速荧光诱导动力学曲线和Q(-A)再氧化变化明显,光合电子传递受阻.Hg2+胁迫导致能量流的变化,藻细胞部分反应中心失活,显著增加用于热耗散的能量,并提高有活性的反应中心的光合作用效率,从而维持能量平衡和生命代谢活动.光合损伤也造成细胞活性氧(ROS)含量上升,总可溶性蛋白含量降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高、还原型谷胱甘肽(GSH)含量降低,以缓解细胞损伤.研究确认雪衣藻具有较强的Hg2+耐受性,光系统Ⅱ是Hg2+的作用靶标;光合能量分配及抗氧化系统是细胞对抗Hg2+胁迫的重要解毒机制.
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编辑人员丨4天前
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N-亚硝基布美他尼SD大鼠体内致突变性风险研究
编辑人员丨4天前
目的 评价布美他尼杂质N-亚硝基布美他尼的体内致突变风险和肝细胞DNA损伤风险.方法 SD大鼠随机分为6组,分别为:溶媒对照组(溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),N-亚硝胺布美他尼100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组,阳性对照组1[N-乙基-N-亚硝基脲(ENU),40 mg·kg-1]、阳性对照组 2[甲磺酸乙酯(EMS),200 mg·kg-1].2 个阳性对照组均为每组 6 只动物,其余每组 12 只动物.大鼠连续14 d经口灌胃给予受试物N-亚硝胺布美他尼.首次给药后约14 d和约 28 d后采集外周血用于Pig-a基因突变率检测,末次给药后约 3 h取肝细胞开展彗星试验.结果 试验期间给予N-亚硝基布美他尼未导致异常临床症状和动物体重及摄食量改变.100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组动物肝细胞平均tail%DNA值(平均数/中位数)分别为2.90±0.38/2.34±0.46、3.58±0.27/2.87±0.51、3.45±0.59/2.21±1.44,与溶媒对照组相应数值相比未见差异,且无明显剂量效应相关性.首次给药后14 d,100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组动物平均RBCCD59-和RETCD59-百万分之发生率(RBCCD59-百万分之发生率/RETCD59-百万分之发生率)分别为2.9±1.6/1.2±0.8、2.8±2.4/1.3±1.5、2.4±1.0/1.3±1.5;首次给药后28 d,100、300、1 000 mg·kg-1 剂量组动物RBCCD59-百万分之发生率/RETCD59-百万分之发生率分别为5.1±1.5/2.2±0.6、4.3±1.5/3.5±3.6、4.8±2.4/2.5±2.7.上述数值与相同时间点溶媒对照组相比均未见差异,且经统计学分析未见剂量效应相关性.结论 连续经口给予N-亚硝基布美他尼 14 d,SD大鼠的最大耐受量高于1 000 mg·kg-1,未检出外周血基因突变风险和肝细胞DNA损伤风险.研究数据可为药品中遗传毒性杂质的合理监管和含N-亚硝基杂质药物的安全使用提供数据支持.
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编辑人员丨4天前
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Metrnl对2型糖尿病小鼠主动脉重构的影响及相关机制研究
编辑人员丨4天前
目的 观察Metrnl在2 型糖尿病小鼠中的浓度变化及对小鼠主动脉重构的影响,探讨其可能的作用机制.方法 取15 只健康雄性小鼠,随机分成对照组(Control组)、糖尿病组(DM组)、Metrnl干预组(DM +Metrnl组),Metrnl干预组予以重组Metrnl,对照组和糖尿病组给予等体积生理盐水.注射结束后测定各组小鼠血脂水平.观察小鼠主动脉病理变化,主动脉内ROS含量,主动脉细胞凋亡情况,主动脉中P-P38 MAPK、P38 MAPK、P-STAT1、STAT1、BAX、BCL-2 蛋白表达水平.结果 Metrnl干预组体质量及血糖较糖尿病组差异无统计学意义(P>0.05);重组Metrnl干预前,各组小鼠血清Metrnl浓度差异无统计学意义(P>0.05).Metrnl降低了2 型糖尿病小鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P<0.05),提高血清HDL-C浓度(P<0.05);Metrnl可改善2 型糖尿病小鼠主动脉细胞形态,但无法改变主动脉厚度(P>0.05);Metrnl可减少ROS产生,降低细胞凋亡率(P<0.05),并下调P-P38/P38 MAPK、P-STAT1/STAT1、BAX蛋白表达(P<0.05),提高BCL-2 蛋白表达(P<0.05).结论 糖尿病小鼠血清Metrnl水平无明显变化,外源性Metrnl干预不能改善糖尿病小鼠体质量及血糖,但可以改善糖尿病小鼠脂质代谢,Metrnl通过抑制ROS/P38 MAPK/STAT1 信号通路,减轻氧化应激损伤,从而发挥对主动脉的保护作用.
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编辑人员丨4天前
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吗替麦考酚酯联合泼尼松对IgA肾病患者尿β2-MG、U-mAlb及α1-MG水平的影响
编辑人员丨4天前
目的 观察吗替麦考酚酯联合泼尼松治疗免疫球蛋白A(IgA)肾病对患者尿β2微球蛋白(β2-MG)、尿微量白蛋白(U-mAlb)及尿液α1微球蛋白(α1-MG)水平的影响.方法 选取秦皇岛市第一医院肾内科2019年1月至2022年1月收治的89例IgA肾病患者为研究对象,采用信封随机法分为泼尼松组(n=43)和联合组(n=46).泼尼松组给予常规治疗联合小剂量泼尼松治疗,联合组在泼尼松组基础上联合吗替麦考酚酯治疗.比较两组尿β2-MG、U-mAlb、α1-MG、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)及尿足细胞蛋白的水平,检测两组肾功能、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子-α(TGF-α)、血尿酸、血红蛋白的差异,统计两组疗效.结果 治疗后,两组尿液β2-MG、U-mAlb、α1-MG、NAG下降,且联合组低于泼尼松组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组尿NPHS1蛋白、Podocin蛋白下降,且联合组低于泼尼松组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组VEGF、TGF-β1、TGF-α下降,且联合组低于泼尼松组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组Scr、BUN、24hU-TP、eGFR下降,且联合组24hU-TP、eGFR下降后水平低于泼尼松组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 吗替麦考酚酯联合小剂量泼尼松治疗IgA肾病可保护患者足细胞,减轻肾损伤,提高疗效.
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编辑人员丨4天前
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血管软化丸调控Nrf2/xCT/GPX4通路抑制血管内皮细胞铁死亡改善动脉粥样硬化的作用机制
编辑人员丨4天前
目的 从核因子E2相关因子2(Nrf2)/胱氨酸谷氨酸反向转运蛋白(xCT)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路探讨血管软化丸对ApoE-/-动脉粥样硬化(AS)小鼠铁死亡的作用及分子机制.方法 10只普通饲料喂养C57BL/6J雄性小鼠为正常组.ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养12周构建AS动物模型,按随机数字表法将50只造模成功的小鼠分为模型组、血管软化丸低剂量(2.34 g/kg)组、血管软化丸高剂量(4.68 g/kg)组、血管软化丸高剂量+ML385(0.03 g/kg)组、铁死亡抑制剂(1 mg/kg)组,每组10只,连续干预6周.采用全自动血脂分析仪检测血脂水平[甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)],油红O染色观察主动脉脂质沉积情况,苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉窦组织形态学变化,比色法检测各组小鼠血清中Fe2+、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平,免疫荧光观察各组小鼠主动脉窦铁蛋白重链(FTH1)和铁蛋白轻链(FTL)蛋白表达,蛋白质印迹法检测小鼠主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白水平,透射电镜观察主动脉线粒体超微结构改变.结果 与正常组比较,模型组小鼠主动脉可见明显脂质斑块沉积、主动脉窦钙化病变严重,血清TC、TG、LDL-C、Fe2+、MDA水平均升高,HDL-C、SOD、GSH水平下降(P<0.01),主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL表达下降(P<0.01),线粒体结构形态损伤严重;与模型组比较,血管软化丸低、高剂量组及铁死亡抑制剂组小鼠治疗后主动脉斑块面积占比下降、主动脉窦钙化病变减轻,血清TC、TG、LDL-C、Fe2+、MDA水平下降,HDL-C、SOD、GSH水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL阳性表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),线粒体结构趋近正常;与血管软化丸高剂量组比较,血管软化丸高剂量+ML385组小鼠血脂及脂质过氧化水平有所增加,主动脉组织Nrf2、xCT、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL阳性表达下降(P<0.01),线粒体结构损伤,可逆转血管软化丸对AS小鼠的治疗作用.结论 血管软化丸可改善AS小鼠血脂水平、减少动脉斑块病变程度,其作用机制可能与激活Nrf2/xCT/GPX4通路、抑制铁死亡有关.
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编辑人员丨4天前